"A-375 epithelioid cells人惡性黑色素瘤細胞系
細胞背景資料：A３７５源自一位５４歲女性，是Giard DJ等人建立的一系列細胞株中的一株。該細胞可在免疫抑制小鼠上成瘤，在瓊脂上形成克隆。
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞復蘇相關(guān)注意事項：１.取細胞的過程中注意帶好防凍手套，護目鏡。此項尤為重要，細胞凍存管可能漏入液氮，解凍時凍存管中的氣溫急劇上升，可導致爆炸。２.凍存液的問題：凍存液的配置已是常識，在這里不作詳述，但二甲基亞砜(DMSO )對細胞不是完全無毒副作用，在常溫下，二甲基亞砜對細胞的毒副作較大，因此，必須在１-２min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復蘇溫度太慢，會造成細胞的損傷，二甲基亞砜(DMSO)選擇進口產(chǎn)品。３.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細胞解凍后二甲基亞砜濃度較高，注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度，以減少對細胞的損傷。４.離心問題：目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng)，第二天換液。因為離心的目的是兩個，去除DMSO，去除死細胞，這個是標準流程，但對一般人來說，把握不好離心轉(zhuǎn)速和時間，轉(zhuǎn)的不夠活細胞沉底的少，細胞就全被扔掉了，轉(zhuǎn)過了活細胞會受壓過大，死亡。此外在操作過程中容易污染，所以不推薦。另一種說法為細胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO)，DMSO對細胞有一定的毒副作用，所以須將離心后的液體前倒凈，且一定倒干凈。我在試驗中按照常規(guī)的離心分裝的方法進行復蘇，結(jié)果無異常。５.細胞貼壁少的問題：教科書中說明凍存細胞解凍時１ml細胞液要加１０ml-１５ml培養(yǎng)液，而在我的試驗中的經(jīng)驗總結(jié)為培養(yǎng)基越少細胞越容易貼附。６.復蘇細胞分裝的問題：試驗中我的經(jīng)驗總結(jié)為復蘇１管細胞一般可分裝到１-２只培養(yǎng)瓶中，分裝過多，細胞濃度過低，不利于細胞的貼壁。７.加培養(yǎng)基的量放入問題：這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度，從如果你加培養(yǎng)基的太少，那么DMSO的濃度就會比較大，就會影響細胞生長，從以前的資料來看，DMSO的濃度在小于０.５%的時候?qū)σ话慵毎麤]有什么影響，還有一個說法是１%。所以如果你的凍存液的濃度是１０%DMSO的話那么加１０ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
YH-13細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEp-2細胞、NT2細胞、SHEE細胞
SK-OV-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM-239-A細胞、TCMK1細胞、NCIH2405細胞
LN382細胞系相關(guān)產(chǎn)品：526mel細胞、PL5細胞、GC1-SPG細胞
細胞生長：貼壁
A-375 epithelioid cells人惡性黑色素瘤細胞系
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
最近在培養(yǎng)細胞時，發(fā)現(xiàn)其狀態(tài)不是很好，很容易扎堆生長，用胰酶消化的時候也是一團一團地被消化下來，很難把它們吹散成一個一個細胞。而且長得也挺快也挺不均勻的，傳代的第二天，有些地方就長得滿滿的了。想請教一下這是為什么呢？你好，我養(yǎng)的細胞和你一樣，消化下來也是一團的，但吹打以后就沒有這樣的情況了。建議你分皿前還是要吹勻，分皿后在鏡下看一看，移動培養(yǎng)皿的時候盡量動作輕，避免晃動。細胞生長挺快，那么細胞的增殖能力應該較強。胰酶消化成團的問題我覺得有以下幾種可能：一、細胞消化后吹打不均勻，造成細胞成團生長：二、細胞細化太過，細胞成片脫落，吹打時沒有受力點，細胞聚團生長。解決辦法：根據(jù)細胞生長的情況進行多次消化，將同次消化下來的細胞放在一個細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)。貼壁細胞傳代培養(yǎng)：一般步驟為：真空泵吸走培養(yǎng)基，１XPBS漂洗兩次，加入１mlEDTA-Tripsin（１００mm皿為例），３７度放置數(shù)分鐘，輕拍培養(yǎng)瓶使細胞自瓶壁脫落，加入適量血清，以吸管上下吸放數(shù)次以打散細胞團塊，離心后加入新鮮培養(yǎng)基，按比例轉(zhuǎn)移至新皿。細胞的傳代最重要的是胰酶處理時間，若胰酶處理太久，容易造成細胞貼壁不緊，顯微鏡下觀察立體感不強，嚴重的時候甚至會造成細胞死亡。我談談個人經(jīng)驗：HepG-２、A５４９、Hela、SGC-７９０１幾種癌細胞處理時間可適當放長，一般處理５-６min，C２C１２、COS-７、NIH-３T３比較容易脫落，２min足矣，P１９Cl６和２９３細胞貼壁不緊，可在PBS漂洗后，直接換新鮮培養(yǎng)基打散。
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
CFPAC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PJ34細胞、143B TK-細胞、G-402細胞
HCE細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEC-1-A細胞、SMA560細胞、LUDLU-1細胞
H3396細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1693細胞、KYSE 410細胞、WSU-DLCL(2)細胞
JROECL33細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS-411N細胞、HEK AD293細胞、OCI-AML5細胞
BNL.CL2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TFK-1細胞、MA-104細胞、NCIH244細胞
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
A-375 epithelioid cells人惡性黑色素瘤細胞系
細胞生長特性：貼壁
細胞形態(tài)特性：上皮細胞樣
培養(yǎng)細胞真的不難，最關(guān)鍵幾點：１)所有的東西使用，如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進口的，真的很難相信你會把細胞養(yǎng)壞；２)動作要快，胰酶消化，換液什么，細胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外，要掌握好胰酶消化時間，所謂的細胞狀態(tài)差，很多時候是傳代的原因；３)有時間的話，需要細胞計數(shù)，傳相應數(shù)目的細胞到培養(yǎng)皿中，可以大致清楚細胞的生長曲線，不會臨時要處理，手足無措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排時間，傳代細胞的實驗穿插進行，可以節(jié)省很多時間，也不會耽誤別人的實驗；５)個人的實驗器具自己收一套，不要和別人混用，最近換了什么新的東西稍微記一下，試劑一旦懷疑污染，馬上丟；６)傳代細胞不能進去太多人，避免相互干擾。每天對待細胞比孝敬爹媽還用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丟了，培養(yǎng)細胞時有哪些經(jīng)驗教訓可以分享呢?１)嚴格無菌操作，多噴噴酒精，要是對滅菌的東西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和別人共用試劑耗材，自己準備一套；３)有可能的話在拿到新細胞的時候做好支原體衣原體檢測；４)水浴鍋很臟，生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟，勤換(滅菌水加進去)；５)晚上離開的時候給傳代細胞照紫外，超凈臺是用完就開；６)是同一時間就你一個人在用傳代細胞在養(yǎng)細胞。
SRA01/04細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM-149PT細胞、MAEC細胞、Colo-201細胞
RGC-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI7666細胞、RKO-AS45-1細胞、RCC10 RGB細胞
C2-C12細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AQ-Mel細胞、WEHI3細胞、KYSE-450細胞
MDA-MB157細胞系相關(guān)產(chǎn)品：hUC-MSC細胞、CZ-1細胞、SUM-102細胞
SO-RB50細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U118-MG細胞、NP69SV40T細胞、H-660細胞
Oregon J-111細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RGC6細胞、hTERT-HME1細胞、ARIP細胞
QBC(939)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSC（Human Schwann）細胞、ARPE-19細胞、MuM-2C細胞
Psi-2 DAP細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HFT 8810細胞、SJRH 30細胞、HCC1954 BL細胞
RPMI-8226細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human Epithelioma-2細胞、CCRF-CEM細胞、Turbot Embryonic Cell line細胞
CMECs細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1573細胞、JHH2細胞、mREC細胞
A-375 epithelioid cells人惡性黑色素瘤細胞系
MES-SA/Dx-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RS1細胞、HEK 293T/17細胞、HSCT6細胞
4T1-A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KU-812細胞、IMR 90細胞、OVCA5細胞
KATO III細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MES 23.5細胞、PLC8024細胞、TGW-I-nu細胞
293 HEK細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FAO-1細胞、Huh 7.5細胞、Sp 2/0-Ag 14細胞
KAT-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2030細胞、NCIH1993細胞、CMT93細胞
GM03569B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1819細胞、HCC1588細胞、MOLT 3細胞
GM03569B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1819細胞、HCC1588細胞、MOLT 3細胞
HTR8svn細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-9204細胞、Panc3_27細胞、HT-144細胞
Hep G2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKLU1細胞、NCI-H187細胞、C8166-CD4細胞
COLO_320DM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HANK-1細胞、SUDHL-8細胞、H22細胞
H-1944細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNB.19細胞、H-35細胞、Rat 2細胞
ME-1 [Human leukemia]細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Murine Thymic Epithelial Cell line 1細胞、U373MG細胞、NCIH2591細胞
DU 4475細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WRL68細胞、32D.cl3細胞、K562/ADR細胞
RS4:11細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC-3/M細胞、Ramos (RA 1)細胞、COLO-394細胞
HM1900細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 636.T細胞、RFL6細胞、Immortal Pig Intestinal-2I細胞
8226/S細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LCD細胞、HCC-4006細胞、293細胞
HIT T-15細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CORL23細胞、SGC 7901細胞、SK RC 20細胞
Hs 578T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-N-AS細胞、F98細胞、WM 239-A細胞
SUDHL-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LP-1細胞、SK-N-BE-2細胞、8226細胞
SupB15WT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1944細胞、IGROV 1細胞、ME 180細胞
GT1-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LY-R細胞、BCaP 37細胞、2B4細胞
COLO-320HSR細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UACC-812細胞、G-401細胞、NIH3T3細胞
SB細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SU8686細胞、KG-1細胞、Tu 177細胞
NSI/1-Ag4-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2066細胞、Nthy-ori 3.1細胞、alpha TC1 clone 6細胞
FLC7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM00346B細胞、OVCAR8細胞、Nb2細胞
TOV112D細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MKN7細胞、EB1細胞、HIC細胞
VP267細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Adult Retinal Pigment Epithelial cell line-19細胞、COV-434細胞、H2029細胞
RPMI 8226/S細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AC16 [Human hybrid]細胞、NCIH1650細胞、PANC-1細胞
KP-N-RT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1563細胞、Ca-Ski細胞、HG2855細胞
AtT20細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U138MG細胞、HS-766T細胞、PA12細胞
OVSAHO細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM-266-mel細胞、Hs683T細胞、UWB1.289+BRCA1細胞
EoL-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MEG-01細胞、U-138-MG細胞、C-Li-7細胞
IOSE80UBC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HBL1細胞、SW 962細胞、NCIH2141細胞
H-1838細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SVG p12細胞、H1734細胞、WM-239A細胞
SW954細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KNS81細胞、MIA-Pa-Ca-2細胞、HCC15細胞
PLC/PRF5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE 510細胞、SUPB15細胞、LC1sq細胞
KRC Y細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L540細胞、B-95-8細胞、McG-1細胞
Hs-27細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKNBE2細胞、NTERA2-D1細胞、SNU5細胞
OVCA 420細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IOSE 80細胞、RT-112細胞、NK92MI細胞
H1355細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NBL-3細胞、SN-12C細胞、NCI-H250細胞
FHL 124細胞系相關(guān)產(chǎn)品：38C13細胞、L-M[TK-]細胞、FRO 81-2細胞
HELF細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BAR-T細胞、MBT-2細胞、CAL-120細胞
WPE-int細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-2108細胞、DMS-53細胞、BIC細胞
FAK+/+細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1869細胞、Melanoma 14細胞、RD-ES細胞
NCIH322細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-1116細胞、H-865細胞、Henrietta Lacks cells細胞
J111細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH650細胞、Hs819T細胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-14細胞
B16-F10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Sp2/mIL-6細胞、HEK293-A細胞、EU-4細胞
B16 subline B78細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKMEL-2細胞、DMS-273細胞、CALU1細胞
NCIH1184細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AU-565細胞、H498細胞、H-847細胞
NK 10a細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1734細胞、alpha TC1.6細胞、MPP-89細胞
Clone Y1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COR-L23/P細胞、RPE1-hTERT細胞、H1876細胞
A-375 epithelioid cells人惡性黑色素瘤細胞系
RPTC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MES13細胞、293A細胞、M.D. Anderson-Prostate Cancer-2b細胞
VP 229細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO-680N細胞、CG4細胞、RCC10 RGB細胞
SUP-B1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI 7951細胞、WC00079細胞、Cor L88細胞
C2-C12細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AQ-Mel細胞、MDAMB175VII細胞、Menschliche Und Tierische Zellkulture-1細胞
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