"Caco-2 epithelioid cells人結(jié)直腸腺癌細胞系 細胞背景資料:細胞株分離自一個原發(fā)性結(jié)腸癌。當(dāng)細胞長滿時,表現(xiàn)出典型的腸細胞分化的特征。Caco-2細胞表達維生素A酸結(jié)合蛋白I和視黃醇結(jié)合蛋白II,角蛋白陽性。 細胞形態(tài):上皮細胞樣 貼壁消化難題:1,先用PBS 把細胞洗兩遍,使瓶內(nèi)沒有血清了,減少對胰酶的中和,然后用新配的0.25%的胰酶加入3ml左右,放在37度,然后可以在細胞有些消化下來時,拿著瓶口,運用手腕的力量輕輕震蕩瓶內(nèi)液體,這樣細胞很快就下來了,還不需要吹打,分散也均勻;2,成團、絮狀:消化液里加入edta可以減少細胞成團的現(xiàn)象,血清可以終止胰酶的作用,如果是進口血清的話也能終止edta的作用。用胰酶消化后胰酶可以倒掉,也可以不倒,直接加血清終止,如果消化液中加入了edta的話,就要將消化液倒干凈,如果細胞貼壁要求不是很嚴格的話,一般不需要進行離心。鼻咽癌細胞的貼壁能力很強,用0.5%胰酶(含0.1%EDTA)一般要消化12~15min。用PBS洗滌時要洗凈殘余的培養(yǎng)基,加入胰酶后在培養(yǎng)箱中消化(避免細胞室溫下受損以及在此溫度時胰酶活性最強)至細胞收縮變圓(可顯微鏡下觀察)且有少許細胞脫落(有流下來的趨勢),隨后立即棄去胰酶(如果脫落的細胞很多且需要大量細胞實驗,則不能棄去胰酶),加入培養(yǎng)基仔細吹打(不能用無血清培養(yǎng)基或者PBS替代,否則細胞聚集成團塊或絮狀)。一般我都離心一次棄去上清(去除殘留的胰酶及漂浮的死細胞或細胞碎片);消化過度:馬上用培養(yǎng)基中和,用吸管吹打細胞,收集全部的細胞到以無菌的離心管中800RPM 3分鐘。棄上清,用全培重懸,換新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng),狀態(tài)不好的細胞在培養(yǎng)的過程中會死亡脫落,在換液的時候可以清除掉! NB9細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM451細胞、A-9細胞、MPC11細胞 MUM2B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EL4細胞、H-187細胞、KP-N-RT-BM-1細胞 CCRF SB細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1355細胞、KTCTL-140細胞、A101D細胞 細胞生長:貼壁 Caco-2 epithelioid cells人結(jié)直腸腺癌細胞系 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細胞復(fù)蘇基本方法:1.從液氮罐中取出安剖;有時因安剖未封嚴,浸入了液氮,取出后因安剖內(nèi)液氮迅速氣化而發(fā)生爆炸,因此應(yīng)帶有防護眼睛和手套。2.迅速放入盛有36℃~37℃水的搪瓷罐中,扣上蓋并不時搖動,盡快解凍。3.剪開紗布口袋,取出安剖,用70%酒精擦拭消毒后,凈化臺上打開蓋,用吸管吸出細胞懸液,裝入離心管中,再補加10ml培養(yǎng)液,吹打使細胞懸浮。4.低速離心(500~1000轉(zhuǎn)/分)5分鐘,取上清后再重復(fù)用培養(yǎng)液漂洗、離心。5.加入培養(yǎng)液適當(dāng)稀釋后,再移裝入培養(yǎng)瓶中,置溫箱培養(yǎng),次日更換一次培養(yǎng)液后再繼續(xù)培養(yǎng)。收到T25 flask細胞時,處理方式為:在寄送過程中,為避免起泡造成細胞脫落死亡,T25 flask均加滿培養(yǎng)基。請檢查flask外觀,并于顯微鏡下觀察細胞生長狀況和有無污染現(xiàn)象,若有任何問題,不要打開蓋子,請立即通知細胞實驗室。將原封之T25 flask靜置于37°C,5%CO2培養(yǎng)箱中,使細胞回溫至37°C,并讓運送過程中少數(shù)脫落的細胞可再附著生長。隔天后,于無菌操作箱內(nèi)取出flask內(nèi)之培養(yǎng)基(取出之培養(yǎng)基可以再使用),僅留約5-10ml培養(yǎng)基于flask內(nèi),依一般培養(yǎng)方式再將細胞置入培養(yǎng)箱中,或細胞已長滿盤,則將細胞做傳代培養(yǎng)。 細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 P560細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuT-78細胞、H889細胞、OVCAR-10細胞 NCIH1781細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Jijoye細胞、NRK52E細胞、Sarcoma OSteogenic-2細胞 BrCL12細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LM2-4175細胞、HM06.A1細胞、EOL1細胞 GM02132C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HR-8348細胞、GLC82細胞、MC57G細胞 Jurkat-FHCRC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNK-1細胞、SKLMS1細胞、H-508細胞 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系 Caco-2 epithelioid cells人結(jié)直腸腺癌細胞系 細胞生長特性:貼壁 細胞形態(tài)特性:上皮細胞樣 細胞接收后的操作流程與注意事項:1)如果細胞為貼壁細胞,而收到時呈懸浮或者部分懸浮的狀態(tài),請將懸浮的細胞即時離心,加15%血清的完全培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)3天;同時原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細胞更換為15%血清的完全培養(yǎng)基培養(yǎng)3天。3天后若原瓶或者新瓶中的細胞都沒有出現(xiàn)增值而是繼續(xù)脫落死亡,請及時聯(lián)系實驗室技術(shù)人員會跟進解決;2)貼壁細胞生長緩慢;適當(dāng)提高血清濃度(最高不能超過20%),或可根據(jù)該細胞生長密度,考慮胰酶消化后,轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng);3)生長不均:貼壁細胞若出現(xiàn)分布不均,成島狀生長,可將細胞進行消化,重懸打散細胞,加入新鮮培養(yǎng)基進行培養(yǎng)。 KRC Y細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L540細胞、B-95-8細胞、McG-1細胞 SK-RC-39細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PE/CA-PJ34細胞、BT.549細胞、COR-L51細胞 IOSE-Mar細胞系相關(guān)產(chǎn)品:4T1-A細胞、GM02132細胞、SEG1細胞 CC-LP-I細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MES-SA Dx5細胞、NCIH2052細胞、OVHM細胞 Hepatoma 22細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM03190A細胞、NCI-H1563細胞、OCILY-19細胞 SW-48細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO 16細胞、H-2030細胞、B16 F1細胞 PECAPJ34細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BT細胞、C518細胞、Hs611T細胞 HMC3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LC-1Sq細胞、CG-4細胞、HConEpic細胞 SK-N-BE(1)n細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NSC34細胞、H-2023細胞、EAHY-926細胞 RM-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ChaGo K-1細胞、HOP-92細胞、159PT細胞 Caco-2 epithelioid cells人結(jié)直腸腺癌細胞系 HEP3B2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hos TE-85細胞、H647細胞、HMSC細胞 GEO細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1373細胞、BSC-40細胞、OCI-LY-7細胞 HOS-MNNG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GB1細胞、HUC細胞、H187細胞 SUD4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HNTEC細胞、T HEECs細胞、Hs688(A)T細胞 C33A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1770細胞、HCC2157細胞、Chinese Hamster Ovary細胞 Chang liver細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COS-7細胞、IB-RS2細胞、L-6TG細胞 Chang liver細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COS-7細胞、IB-RS2細胞、L-6TG細胞 NCI-H2195細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Menschliche Und Tierische Zellkulture-3細胞、HEK 293 EBNA細胞、VMCUB1細胞 NCIH1568細胞系相關(guān)產(chǎn)品:THEECs細胞、118 MG細胞、RPMC細胞 SNU-638細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hu-P-T4細胞、VeroC1008細胞、Anip[973]細胞 PBMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:kms 11細胞、LLC-MK-2細胞、526-mel細胞 D10.G4.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHP-126細胞、QGY-7703細胞、MDA-MB157細胞 HARAB細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EA. hy 926細胞、Jurkat FHCRC細胞、FUOV1細胞 C32-mel細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GLAG-66細胞、huH 1細胞、WEHI-279細胞 L5178Y細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Transformed Human Liver Epithelial-3細胞、J774.A1細胞、PL-5細胞 NCI-H596細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDCK supertube細胞、Vero C1008細胞、Los Angeles Prostate Cancer-4細胞 SF 126細胞系相關(guān)產(chǎn)品:B16/BL6細胞、BSC-1細胞、SUM102細胞 HEC1B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PTK 2細胞、MIMVEC細胞、OE-21細胞 NTC-200細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc-05.04細胞、MDAMB-231細胞、K7M2 wt細胞 WM 266-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CMT 167細胞、SNU484細胞、CTLL-2細胞 SKMEL5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C57 Mouse Tumor 93細胞、PC-3M-1E8細胞、293-EBNA1細胞 Rat 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AR4IP細胞、TEV-1細胞、253J B-V細胞 Hx147細胞系相關(guān)產(chǎn)品:343 MG細胞、BJAB細胞、COLO 394細胞 TFK-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PNT1A細胞、MES-SA-Dx5細胞、MDA PCa 2b細胞 AdHek細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BHT101細胞、WPE-int細胞、Hs 766細胞 UM-UC14細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH510細胞、OVCAR 8細胞、Psi2-DAP細胞 WPMY-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:8226細胞、K7M2-WT細胞、VM Cub 1細胞 HK2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-Ly 10細胞、2E8細胞、H-4-II-E細胞 Ha Fe細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC1008細胞、AN3CA細胞、OVCAR.8細胞 LNCaP FGC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H446細胞、SMC-1細胞、H1092細胞 GH3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UPCI-SCC090細胞、HCT15細胞、293T細胞 Transformed Human Liver Epithelial-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NRCC細胞、TE-1細胞、S.B.細胞 H920細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HG2855細胞、SPCA-1細胞、MA-c細胞 SUP T1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BT-325細胞、MT-2細胞、SKNF1細胞 Nb2-11細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2444細胞、L-363細胞、MFE 280細胞 HCC-1438細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LN229細胞、PA I細胞、BpRcl細胞 G361細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EBNA-293細胞、H-1755細胞、Ly10細胞 MDA2B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WC00079細胞、LC1/Sq細胞、NCTC clone 1469細胞 NCI-HUT-69細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKUT1細胞、Karpas 299細胞、H596細胞 SGC-7901/DDP細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD-841CoTr細胞、DHL5細胞、LLCPK1細胞 H2228細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ocular Choroidal Melanoma-1細胞、N87細胞、210RCY3-Ag1.2.3細胞 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