"U-251MG epithelioid cells人神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞系
細胞背景資料：U-２５１ MG分離至一位患者的膠質(zhì)母細胞瘤組織。
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞凍存復蘇材料與方法步驟：常用的細胞冷凍貯存器為液氮貯存器，規(guī)格有３５L和５０L兩種。使用時要注意以下幾點：(１)一般兩周需充液氮一次，至少一個月充氮一次。液氮溫度達-１９６℃，使用時注意勿讓液氮濺到皮膚上，以免引起凍傷。(２)液氮容器為雙層結(jié)構(gòu)，中間為真空層，瓶口有雙層焊接處，應防止焊接部裂開。(３)在裝入液氮時，要注意緩慢小心，并用厚紙卷筒或特制漏斗作引導，使液氮直達瓶底，如有專用液氮灌注裝置則更好。若為初次使用，加液氮時更要緩慢，以免溫度驟降而使容器損壞。細胞凍存時常備的材料有：０.２５%胰蛋白酶，含１０%～２０%的血清培養(yǎng)液，DMSO(分析純)或無色新鮮甘油(１２１°C蒸氣高壓消毒)，２mL安瓿(或?qū)Ｓ眉毎麅龃婀?、吸管、離心管、噴燈、紗布袋(或凍存管架)等。主要操作步驟為：(１)選擇處于對數(shù)生長期的細胞，在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng) 液去掉，用０.２５%胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶，加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復吹打瓶壁上的細胞，使其成為均勻分散的細胞懸液。懸浮生產(chǎn)細胞則不要消化處理。然后將細胞收集于離心管中離心(１０００r/min，１０分鐘)。(２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培養(yǎng)基，于４℃預冷１５分鐘后，逐滴加入已無菌的DMSO或甘油，用吸管輕輕吹打使細胞均勻，細胞濃度為３×１０６～１×１０７/mL之間。(３)將上述細胞分裝于安瓿或?qū)Ｓ美鋬鏊芰瞎苤?，安瓿裝１～１.５mL在火焰噴燈上封口，封口處要完全封閉，圓滑無勾。冷凍管要將蓋子蓋緊，并標記好細胞名稱和凍存日期，同時作好登記(日期、細胞種類及代次、凍存支數(shù))。(４)將裝好細胞的安瓿或凍存管裝入沙布袋內(nèi);置于液氮容器頸口處存放過夜，次日轉(zhuǎn)入液氮中。采用控制降溫速度的方法也可采用下列步驟：先將安瓿置入４℃冰箱中２～３小時，再移至冰箱冷凍室內(nèi)３～４小時，再吊入液氮容器頸氣態(tài)部分存放２小時，最后沉入液氮中。細胞凍存在液氮中可以長期保存，但為妥善起見，凍存半年后，取出一只安瓿細胞復蘇培養(yǎng)，觀察生長情況，然后再繼續(xù)凍存。
HeLa/S3細胞系相關產(chǎn)品：Lilly Laboratories Cell-Porcine Kidney 1細胞、NCTC1469細胞、GP-293細胞
SUDHL-8細胞系相關產(chǎn)品：SK-MEL-1細胞、OCI-Ly18細胞、LS123細胞
CEM/0細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H1734細胞、GM01232E細胞、NTera-2D1細胞
細胞生長：貼壁
U-251MG epithelioid cells人神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞系
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
血清必須貯存于–２０～-７０℃，若存放于４℃，請勿超過一個月。如果一次無法用完一瓶，可將４０～４５ml分裝于無菌５０ml離心管中，由于血清結(jié)凍時體積會增加約１０%，必須預留此膨脹體積之空間，否則易發(fā)生污染或容器凍裂之情形。一般廠商提供之血清為無菌，不需再無菌過濾。若發(fā)現(xiàn)血清有許多懸浮物，則可將血清加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾，勿直接過濾血清。瓶裝(５００ml)血清解凍步驟(逐步解凍法)：-２０℃或–７０℃至４℃冰箱溶解一天，至室溫下全溶后再分裝，一般以５０ml無菌離心管可分裝４０～４５ml。在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡)，使溫度與成分均一，減少沈淀的發(fā)生。勿直接由–２０℃直接至３７℃解凍，因溫度改變太大，容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沈淀。勿將血清置于３７℃太久，若在３７℃放置太久，血清會變得混濁，同時血清中許多較不穩(wěn)定之成份亦會因此受到破壞，而影響血清之品質(zhì)。血清凝絮物：發(fā)生之原因有許多種，但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 變性及解凍后血清中存在之血纖維蛋白(fibrin) 造成，這些凝絮沈淀物不會影響血清本身之品質(zhì)。若欲減少這些凝絮沈淀物，可用離心３０００rpm，５min去除，或離心后上清液可以加入培養(yǎng)基中一起過濾。不建議用過濾步驟去除這些凝絮沈淀物，因為會阻塞過濾膜。顯微鏡下觀察之“小黑點”：通常經(jīng)過熱處理之血清，沈淀物的形成會顯著的增多。有些沈淀物在顯微鏡下觀察像是“小黑點”，常會誤認為血清遭受污染，而將血清放在３７℃中欲培養(yǎng)此“微生物”，但在３７℃環(huán)境下，又會使此沈淀物增多，更會誤認為微生物之增殖，但以培養(yǎng)細菌之培養(yǎng)基檢測，又沒有污染。一般而言，此小黑點應不會影響細胞之生長，但若懷疑此血清之品質(zhì)，應立即停用，更換另一批號的血清。
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
SCC15細胞系相關產(chǎn)品：H1092細胞、NCI-H1694細胞、Colo699細胞
BIU87細胞系相關產(chǎn)品：H2591細胞、NCI-H358細胞、HSAEC1-KT細胞
U-251 MG細胞系相關產(chǎn)品：AML-EOL-1細胞、AMO1細胞、PC615.3細胞
HO-8910PM細胞系相關產(chǎn)品：3T6細胞、TYKnu細胞、T98G細胞
BL1339細胞系相關產(chǎn)品：L363細胞、OVISE細胞、H-358細胞
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
U-251MG epithelioid cells人神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞系
細胞生長特性：貼壁
細胞形態(tài)特性：成纖維細胞樣
為什么培養(yǎng)的細胞要及時傳代？體外培養(yǎng)的細胞大多具有生長接觸抑制的特性，也就是說當一個細胞被其他細胞包圍的時候，它就會停止生長，及時傳代后，細胞的生長得以繼續(xù)。培養(yǎng)細胞生長減慢的原因在哪些?其解決辦法有哪些？可能的原因有：更換了不同的培養(yǎng)液或血清；培養(yǎng)液中一些細胞生長必需成分如谷眈肢或生長因子等耗盡或缺乏或己被破壞；培養(yǎng)物中有少量細菌或真菌污染；試劑保存不當；比較新培養(yǎng)液與原培養(yǎng)液成分，比較新血清與舊血清等，找出其它可能的原因。解決辦法：增加起始培養(yǎng)細胞濃度；讓細胞逐漸適應新培養(yǎng)液；換入新鮮配制培養(yǎng)液；補加谷酷肢或生長因子等；用無抗生素培養(yǎng)液培養(yǎng)，如發(fā)現(xiàn)污染，去棄培養(yǎng)物，或用抗生素除菌；血清需保存在５℃到２０℃; 培養(yǎng)液需在２-８℃避光保存;含血清完全培養(yǎng)液在２-８℃保存，并在２周內(nèi)用完;分離培養(yǎng)物，檢測支原體。冷凍管應如何解凍？取出冷凍管后，須立即放入３７℃水槽中快速解凍，輕搖冷凍管使其在１-２分鐘內(nèi)大部分融化，特別注意，需殘留一小塊冰塊，就可拿到超凈工作臺操作細胞，用７５%酒精消毒凍存管，用新鮮培養(yǎng)基將細胞轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶。另外冷凍管由液氮桶中取出解凍時，必須注意安全，預防冷凍管爆裂。
RMG1細胞系相關產(chǎn)品：MFE-280細胞、NCI-H2110細胞、H82sclc細胞
PL12細胞系相關產(chǎn)品：16HBE140細胞、PA-TU-8988S細胞、HIBEpiC細胞
Roswell Park Memorial Institute 2650細胞系相關產(chǎn)品：LPC-H12細胞、NCI-H1417細胞、Duke University 145細胞
NCI-H220細胞系相關產(chǎn)品：HEC-1A細胞、WM 239細胞、MUTZ1細胞
BTI-Tn5B14細胞系相關產(chǎn)品：Hs 281.T細胞、CNE2細胞、LNCaP-ATCC細胞
Tca8113細胞系相關產(chǎn)品：Hs 695T細胞、SUDHL-5細胞、Tu-212細胞
BV173細胞系相關產(chǎn)品：RGC-5細胞、RBL.2H3細胞、HS-445細胞
Lewis-Lung細胞系相關產(chǎn)品：NCIH187細胞、CCRF細胞、HCC-1954細胞
MDAMB231細胞系相關產(chǎn)品：MUTZ-1細胞、PANC-08-13細胞、H128細胞
MHHCALL2細胞系相關產(chǎn)品：SK-MEL-24細胞、Mouse Forestomach Carcinoma細胞、WM35細胞
U-251MG epithelioid cells人神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞系
SW 839細胞系相關產(chǎn)品：EL 4細胞、TT細胞、FU-97細胞
NTera-2D1細胞系相關產(chǎn)品：HuH7細胞、NALM-6-M1細胞、TKB1細胞
SuDHL 1細胞系相關產(chǎn)品：HSKMC細胞、BE2M17細胞、NCIH3255細胞
MH-22a細胞系相關產(chǎn)品：High-5細胞、NCI-H2286細胞、P3-NS1/1Ag 4.1細胞
U138細胞系相關產(chǎn)品：EJ-1細胞、SW-1353細胞、EC-9706細胞
MESSADX5細胞系相關產(chǎn)品：MALME 3M細胞、CHL/IU細胞、P3-X63.Ag8.653細胞
MESSADX5細胞系相關產(chǎn)品：MALME 3M細胞、CHL/IU細胞、P3-X63.Ag8.653細胞
NCI-H2122細胞系相關產(chǎn)品：R1610細胞、U-CH1細胞、HFL1細胞
KM-H2細胞系相關產(chǎn)品：HMC-1細胞、CaSki細胞、KP-2細胞
ARO 81-1細胞系相關產(chǎn)品：FHCRC-11細胞、MV-3細胞、CNE-2Z細胞
KLN-205細胞系相關產(chǎn)品：RCS細胞、H1437細胞、Centre Antoine Lacassagne-51細胞
SNU761細胞系相關產(chǎn)品：NCIH1694細胞、H1755細胞、Bac 1.2F5細胞
Huh-7.5細胞系相關產(chǎn)品：HEK 293-H細胞、NCI-H510細胞、MA104細胞
HCC-202細胞系相關產(chǎn)品：RT4細胞、NB1-RGB細胞、ND7/23細胞
HCS2/8細胞系相關產(chǎn)品：SUSM-1細胞、CHP126細胞、H-2227細胞
MDCK2細胞系相關產(chǎn)品：MDA-MB-134細胞、Jurkat77細胞、SPC-A-1細胞
Kit 225細胞系相關產(chǎn)品：NCC-IT細胞、MC3T3-L1細胞、NFHIOSE-29細胞
RenCa細胞系相關產(chǎn)品：NIE 115細胞、SVOG細胞、MT-2細胞
H322T細胞系相關產(chǎn)品：H676B細胞、MV-522細胞、U138MG細胞
Hs 746.T細胞系相關產(chǎn)品：SK_N_BE2C細胞、U87 MG細胞、Pt K2 (NBL-5)細胞
Hep3B細胞系相關產(chǎn)品：P3J-HR-1細胞、OCI-AML3細胞、IPI-2I細胞
UCH1細胞系相關產(chǎn)品：HBZY1細胞、H-650細胞、P3J HR1-K細胞
NCI-H87細胞系相關產(chǎn)品：7404細胞、RH-35細胞、COLO824細胞
HT-1197細胞系相關產(chǎn)品：766T細胞、GA-10 (Clone 4)細胞、HCT-8/V細胞
WERI細胞系相關產(chǎn)品：OV3121細胞、AHH1細胞、HAC-84細胞
TE 32細胞系相關產(chǎn)品：Pro-5 Lec1.3c細胞、T-ALL 1細胞、NCI-H23細胞
SKNBE(2)細胞系相關產(chǎn)品：786-0WT細胞、HEL細胞、MDCK-2細胞
U-251-MG細胞系相關產(chǎn)品：SW-962細胞、RPTEC TERT1細胞、Hs840T細胞
NOZAWA細胞系相關產(chǎn)品：ME180細胞、NCI-SNU-878細胞、HepaRG細胞
GCT細胞系相關產(chǎn)品：BRL-3A細胞、M1細胞、EFM-192B細胞
EB-1細胞系相關產(chǎn)品：SUP-M2細胞、CTLA4 Ig-24細胞、SUD6細胞
SUM-149PT細胞系相關產(chǎn)品：AU 565細胞、LIM 1215細胞、HEYA8細胞
CCRF/CEM細胞系相關產(chǎn)品：M-1細胞、PL 5細胞、DHBE細胞
JVM3細胞系相關產(chǎn)品：NCI-SNU-761細胞、MDA-MB-231細胞、SH-SY5Y細胞
H-522細胞系相關產(chǎn)品：HEK-293-F細胞、HTR8/SVneo細胞、H-1703細胞
U266BL細胞系相關產(chǎn)品：HP615細胞、RMG1細胞、NOZ細胞
Cates 1B細胞系相關產(chǎn)品：KP2細胞、67NR細胞、A549細胞
USMC細胞系相關產(chǎn)品：UT7細胞、Hs 840.T細胞、HEK-293-F細胞
BCP1細胞系相關產(chǎn)品：M4e細胞、SK-CO-1細胞、IOSE29細胞
RT4細胞系相關產(chǎn)品：U-118-MG細胞、OLN 93細胞、SVOG細胞
SG231細胞系相關產(chǎn)品：K7M2細胞、32Dc3細胞、MRMT-1細胞
ST2細胞系相關產(chǎn)品：R D細胞、RS4:11細胞、Hs675細胞
MB231細胞系相關產(chǎn)品：MKN 45細胞、KNS-81細胞、NRK 49F細胞
JS1細胞系相關產(chǎn)品：786-O RCC細胞、GM07404A細胞、CHP-126細胞
Kasumi-6細胞系相關產(chǎn)品：WEHI-3B細胞、HS578細胞、OVCA 420細胞
C4 I細胞系相關產(chǎn)品：Alexander cells細胞、CWR-22rv1細胞、CC-LP-I細胞
T98細胞系相關產(chǎn)品：SUPB-15細胞、CF PAC-1細胞、MV-4-11細胞
NCI-H1105細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H1694細胞、RKO-E6細胞、Sup T-1細胞
NCI-SNU-C2A細胞系相關產(chǎn)品：SU 86.86細胞、TE4細胞、TE4細胞
HPMEC細胞系相關產(chǎn)品：Hela-mock細胞、GEO細胞、FAK+/+細胞
KAT5細胞系相關產(chǎn)品：HTori-3.1細胞、MHH-CALL2細胞、H-1404細胞
U-251MG epithelioid cells人神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞系
NBL-S細胞系相關產(chǎn)品：CZ-1細胞、H-1395細胞、U-373MG ATCC細胞
293S細胞系相關產(chǎn)品：CL-34細胞、H-2172細胞、NCI-H2023細胞
ABC1細胞系相關產(chǎn)品：Hs-852-T細胞、BT483細胞、WEHI 164 TC細胞
Roswell Park Memorial Institute 2650細胞系相關產(chǎn)品：LPC-H12細胞、NCIH1838細胞、Caco-2/ATCC細胞
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