"MDCK epithelioid cells犬腎細胞系
細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞復(fù)蘇相關(guān)注意事項：１.取細胞的過程中注意帶好防凍手套，護目鏡。此項尤為重要，細胞凍存管可能漏入液氮，解凍時凍存管中的氣溫急劇上升，可導(dǎo)致爆炸。２.凍存液的問題：凍存液的配置已是常識，在這里不作詳述，但二甲基亞砜(DMSO )對細胞不是完全無毒副作用，在常溫下，二甲基亞砜對細胞的毒副作較大，因此，必須在１-２min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復(fù)蘇溫度太慢，會造成細胞的損傷，二甲基亞砜(DMSO)選擇進口產(chǎn)品。３.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細胞解凍后二甲基亞砜濃度較高，注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度，以減少對細胞的損傷。４.離心問題：目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng)，第二天換液。因為離心的目的是兩個，去除DMSO，去除死細胞，這個是標準流程，但對一般人來說，把握不好離心轉(zhuǎn)速和時間，轉(zhuǎn)的不夠活細胞沉底的少，細胞就全被扔掉了，轉(zhuǎn)過了活細胞會受壓過大，死亡。此外在操作過程中容易污染，所以不推薦。另一種說法為細胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO)，DMSO對細胞有一定的毒副作用，所以須將離心后的液體前倒凈，且一定倒干凈。我在試驗中按照常規(guī)的離心分裝的方法進行復(fù)蘇，結(jié)果無異常。５.細胞貼壁少的問題：教科書中說明凍存細胞解凍時１ml細胞液要加１０ml-１５ml培養(yǎng)液，而在我的試驗中的經(jīng)驗總結(jié)為培養(yǎng)基越少細胞越容易貼附。６.復(fù)蘇細胞分裝的問題：試驗中我的經(jīng)驗總結(jié)為復(fù)蘇１管細胞一般可分裝到１-２只培養(yǎng)瓶中，分裝過多，細胞濃度過低，不利于細胞的貼壁。７.加培養(yǎng)基的量放入問題：這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度，從如果你加培養(yǎng)基的太少，那么DMSO的濃度就會比較大，就會影響細胞生長，從以前的資料來看，DMSO的濃度在小于０.５%的時候?qū)σ话慵毎麤]有什么影響，還有一個說法是１%。所以如果你的凍存液的濃度是１０%DMSO的話那么加１０ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
COLO206細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NALM-6-M1細胞、H-II-E-C3細胞、SU-DHL-16細胞
H1155細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HM細胞、C32 [Human melanoma]細胞、NCIH526細胞
38C-13細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MAVER細胞、HT-3細胞、U343細胞
細胞生長：貼壁
MDCK epithelioid cells犬腎細胞系
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代的一般方法：開始細胞傳代前，仔細檢查細胞傳代所需的儀器和試劑是否齊全：一般主要有：細胞(單層細胞，鏡檢適合)、培養(yǎng)液(MEM-０.２%LH培養(yǎng)液或MEM培養(yǎng)液或１９９等適合細胞有要求的培養(yǎng)液)、滅活小牛血清、慶大霉素溶液（１萬單位）、７.５％NaHC０３溶液、０.２５％胰蛋白酶、PBS洗液。用具：小方瓶(１００m１)、克氏瓶、膠塞、吸管(１０ml、１m１）、細胞吹打管（２０ml）(以上用具需經(jīng)１２１℃至少１５分鐘高壓滅菌)、C０２ 孵箱、超凈臺、倒置顯微鏡、４℃、-２０℃冰箱；操作步驟：鏡檢細胞，挑選生長狀態(tài)良好，細胞界限清晰，具有立體感，形態(tài)好無污染、無異常及可疑病變細胞。配制細胞培養(yǎng)液：按以下配比配制MEM-０.２%LH培養(yǎng)液１００ml內(nèi)，加入滅活小牛血清１０m１，慶大霉素溶液０.３m１，７.５%碳酸鈉溶液３ml。（僅供一般參考）。消化細胞；先用PBS洗液沖洗細胞表面１-２次，每次１０m１，棄去洗液，向細胞瓶內(nèi)加入０.２５％胰蛋白酶溶液，每瓶１m１，細胞瓶平放，使消化液完全覆蓋細胞表面。至細胞完全脫落到胰酶中。每瓶加入１０m１細胞培養(yǎng)液吹打分散細胞，按所需的傳代比例分裝于小方瓶(１００m１)中，再加入１０m１細胞培養(yǎng)液重復(fù)吹打一次后分裝，然后補加至所需培養(yǎng)量。加塞，置于３７±１℃孵箱培養(yǎng)。約２～４天成片。(由細胞接種濃度決定)；填寫傳代記錄。
細胞傳代方法：１：２傳代
NCI-H1341細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-407細胞、Case 3細胞、Dysplastic Oral Keratinocyte細胞
TE14細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C3H/10T1/2 clone 8細胞、OVCAR10細胞、7404細胞
SV40-MES13細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KRC Y細胞、G519細胞、149 PT細胞
Hs 729細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK Hep1細胞、YES-2細胞、JB-6 Cl 30細胞
HCC1937細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JROECL 21細胞、SHSY-5Y細胞、DMS53細胞
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
MDCK epithelioid cells犬腎細胞系
細胞生長特性：貼壁生長
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
培養(yǎng)細胞真的不難，最關(guān)鍵幾點：１)所有的東西使用，如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進口的，真的很難相信你會把細胞養(yǎng)壞；２)動作要快，胰酶消化，換液什么，細胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外，要掌握好胰酶消化時間，所謂的細胞狀態(tài)差，很多時候是傳代的原因；３)有時間的話，需要細胞計數(shù)，傳相應(yīng)數(shù)目的細胞到培養(yǎng)皿中，可以大致清楚細胞的生長曲線，不會臨時要處理，手足無措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排時間，傳代細胞的實驗穿插進行，可以節(jié)省很多時間，也不會耽誤別人的實驗；５)個人的實驗器具自己收一套，不要和別人混用，最近換了什么新的東西稍微記一下，試劑一旦懷疑污染，馬上丟；６)傳代細胞不能進去太多人，避免相互干擾。每天對待細胞比孝敬爹媽還用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丟了，培養(yǎng)細胞時有哪些經(jīng)驗教訓可以分享呢?１)嚴格無菌操作，多噴噴酒精，要是對滅菌的東西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和別人共用試劑耗材，自己準備一套；３)有可能的話在拿到新細胞的時候做好支原體衣原體檢測；４)水浴鍋很臟，生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟，勤換(滅菌水加進去)；５)晚上離開的時候給傳代細胞照紫外，超凈臺是用完就開；６)是同一時間就你一個人在用傳代細胞在養(yǎng)細胞。
HO8910PM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TGBC-11-TKB細胞、SK.MEL.5細胞、NCI-H220細胞
P3-X63Ag8.653細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PL-11細胞、RMS1598細胞、MUTZ-1細胞
H345細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NPC-TW039細胞、UMR106細胞、P3-X63-Ag8細胞
OP9細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU354細胞、P3X63 Ag8細胞、HCC-1187細胞
BEL-7402細胞系相關(guān)產(chǎn)品：5-8F細胞、P-36細胞、Epithelioma Papulosum Cyprini細胞
CCRF-CEM/S細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc05.04細胞、PANC0403細胞、MLOY4細胞
MDAPCa-2b細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TOV-112D細胞、U-373MG細胞、HS-683細胞
FU-97細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCl-H157細胞、MAD109細胞、Hs819T細胞
Ramos (RA 1)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：hESC細胞、K7M2 wt細胞、SW-1990細胞
H-1048細胞系相關(guān)產(chǎn)品：3T3-442A細胞、C 6細胞、OC316細胞
MDCK epithelioid cells犬腎細胞系
Capan 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAOV3細胞、BHP 10-3細胞、NCI-SNU-5細胞
Tb1Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品：J-774細胞、SUM-52細胞、BE(2)C細胞
H3255_DA細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCS2/8細胞、KPL-4細胞、OCI Ly3細胞
SK-MEL-24細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HL 60細胞、EM-3細胞、NuTu 19細胞
SKNBE-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Laboratory of Allergic Diseases 2細胞、IMCD3細胞、SCL I細胞
LNCaP-C4-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C6細胞、QGY細胞、HT29細胞
A2058細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-480細胞、AMC-HN8細胞、A7r5細胞
NCI-SNU-1040細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DHL-2細胞、NIE 115細胞、H-1417細胞
Hs281T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HBdSMC細胞、T9細胞、MC3T3-E1 Subclone 4細胞
IMCD-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2009細胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-2細胞、LIM 1215細胞
Bowes melanoma cells細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-1187細胞、Panc327細胞、QGY-7701細胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tsup-1細胞、P3X63Ag8細胞、HTori-3.1細胞
MC-3T3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CESS細胞、A-172MG細胞、RFL 6細胞
OAW42細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EAC細胞、M210B4細胞、MDA-MB-175-VII細胞
HGMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MFE 296細胞、DSL-6A/C1細胞、OVCAR-8細胞
H2108細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MES-13細胞、H-2405細胞、NCIH69細胞
C-8161細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PLB-985細胞、BS-C-1細胞、SNU-423細胞
SNUC2B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PaTu 8988 S細胞、H-727細胞、C-28/I2細胞
Pro-5WgaRI3C細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-SNU-423細胞、NCIH69細胞、Hs 934.T細胞
OVCAR10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U 937細胞、LS-180細胞、SAOS 2細胞
Pt K1 (NBL-3)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Jurkat 77細胞、Hs-281-T細胞、Huh-7.5.1細胞
MMQ細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Potorous tridactylus Kidney 2細胞、PANC0504細胞、EBTr (NBL-4)細胞
OV90細胞系相關(guān)產(chǎn)品：McG-1細胞、Hs 821.T細胞、PANC-03-27細胞
PA-TU-8988S細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2286細胞、OVCA 420細胞、MDA1386細胞
Hs-578-T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2196細胞、OKa-C-1細胞、H-2228細胞
NCIH2029細胞系相關(guān)產(chǎn)品：16-HBE細胞、CFPAC1細胞、Transformed Human Liver Epithelial-3細胞
ND7/23細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BA/F3細胞、LN229細胞、P3X63 Ag8細胞
BetaTC6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NIH-OVCAR-3細胞、Hs895.T細胞、A-172細胞
3T6-Swiss albino細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC-9/S1細胞、STC-1細胞、G361細胞
OAW-42細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKNDZ細胞、Granta519細胞、NCIH2085細胞
Nb2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C-4I細胞、C32-mel細胞、U-251MG細胞
Cor L88細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1573細胞、SW-900細胞、CV1細胞
HEK/293細胞系相關(guān)產(chǎn)品：VMM5A細胞、Human Corneal Epithelial cells-Transformed細胞、L-M[TK-]細胞
MLO-Y4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HELF細胞、Hs 832(C).T細胞、Jiyoye (P-2003)細胞
HME-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ACT-1細胞、GM02219C細胞、MIHA細胞
LP1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW480細胞、HCC 94細胞、AML12細胞
DI-TNC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SN12CPM6細胞、Baby Hamster Kidney from litter No. 21細胞、hEM15A細胞
Panc08.13細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC-3M-1E8細胞、MEL-526細胞、NIH3T3-L1細胞
Transformed C3H Mouse Kidney-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-1088細胞、NK92-MI細胞、HAEC細胞
CALU1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LUDLU1細胞、NCI-HUT-69細胞、H1770細胞
NRK 52E細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR8細胞、Human Fetal Thymocyte-8810細胞、GC-1細胞
H146細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCTC 3960細胞、CWR22-Rv1細胞、HFLS-OA細胞
PC615.3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC827細胞、LIM1215細胞、BEL7402細胞
Japanese Tissue Culture-28細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuH-28細胞、Pa18C細胞、Molm14細胞
U373-MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human Melanoma Cell Bowes細胞、HCC1954細胞、Me-Wo細胞
SK-ChA1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Sc-1細胞、BetaTC6細胞、SCaBER細胞
AtT-20細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1436細胞、HConEpic細胞、A-253細胞
OV1/P細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CA46細胞、MDAMB435細胞、CCD18細胞
SNU354細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI522細胞、PK (15)細胞、BN-CL2細胞
SAOS 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EO771細胞、SU.86細胞、Toledo細胞
NCI-H1838細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A3細胞、Strain V細胞、B16細胞
MDCK epithelioid cells犬腎細胞系
HT-1197細胞系相關(guān)產(chǎn)品：766T細胞、GA-10 (Clone 4)細胞、HCT-8/V細胞
CNLMG-B5537SKIN細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UPCI:SCC90細胞、SK-ChA-1細胞、CEMC1細胞
ZYM-DIEC02細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPaSteC(HPSC)細胞、ML-2細胞、N1S1細胞
H341細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MTEC1細胞、KYSE-30細胞、C8D1A細胞
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