"FTC-133 epithelioid cells人甲狀腺癌細胞系 細胞背景資料:詳見相關(guān)文獻介紹 細胞形態(tài):上皮細胞樣 正確的細胞復蘇需知事項:細胞凍存好了,接下來要注意什么問題呢?沒錯,就是記得到時間了,拿出來復蘇。那么,細胞復蘇的過程中又有哪些該注意的事項呢?細胞活力和形態(tài)檢查的作用何在?活力檢查——千萬不要使用不健康的細胞,可能有污染(真菌、支原體等),如果發(fā)現(xiàn)有污染毫不猶豫的丟棄!形態(tài)檢查——檢查細胞的固有形態(tài)和生長行為。凍存細胞:補充新的培養(yǎng)液——在您開始凍存細胞的前一天補充新的培養(yǎng)液。在細胞長至70%單層時收獲細胞,計數(shù)活細胞數(shù),用凍存液調(diào)整細胞密度~5 x106 Cell s/ml (根據(jù)不同的細胞類型調(diào)整);凍存液——用凍存液洗細胞并用凍存液重懸細胞,有不同類型的凍存液,根據(jù)細胞類型選擇最合適的凍存液(常用的凍存液成分有):5-10% DMSO——注意確保DMSO不含有其他的毒性物質(zhì);5-15%甘油;如果細胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長,應在50%條件培養(yǎng)基內(nèi)(細胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長24小時)內(nèi)凍存和復蘇。在凍存管上標記好細胞類型,日期,凍存人等信息,并保證每凍存管不超過1.5ml。放入液氮罐之前記錄凍存管的數(shù)量和位置。以最快的速度轉(zhuǎn)移凍存管知液氮罐內(nèi),因此,此步驟使用干冰,或者把凍存管浸入裝有液氮的小盒內(nèi)。此外還要注意,在凍存管上沒有足夠的空間記錄細胞的詳細信息,做好記錄是非常非常重要的!還有一個最重要的,一定要在異地的液氮罐內(nèi)保存同樣的一份細胞,以免其中的一個液氮罐出現(xiàn)問題!細胞正確的復蘇方式和正確的凍存方式同樣重要,熟記以下要點:當從液氮罐內(nèi)取出細胞時,有可能會出現(xiàn)凍存管破裂的情況,使用保護面罩和防護服十分必要;其實,細胞復蘇只是一個簡單的實驗,不過這其中卻不可避免有一些需要注意的細節(jié),不然,也不一定會盡如人意。例如說,人身健康方面:一定要記得做好防凍工作,戴上護目鏡;盡量降低DMSO對細胞的損傷等等。 EVSA/T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI/AML-5細胞、NCI-H196細胞、A9細胞 HCC-1419細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Adeno 293細胞、MCFs細胞、INS-1E細胞 HT-1197細胞系相關(guān)產(chǎn)品:766T細胞、GA-10 (Clone 4)細胞、HCT-8/V細胞 細胞生長:貼壁 FTC-133 epithelioid cells人甲狀腺癌細胞系 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 最近在培養(yǎng)細胞時,發(fā)現(xiàn)其狀態(tài)不是很好,很容易扎堆生長,用胰酶消化的時候也是一團一團地被消化下來,很難把它們吹散成一個一個細胞。而且長得也挺快也挺不均勻的,傳代的第二天,有些地方就長得滿滿的了。想請教一下這是為什么呢?你好,我養(yǎng)的細胞和你一樣,消化下來也是一團的,但吹打以后就沒有這樣的情況了。建議你分皿前還是要吹勻,分皿后在鏡下看一看,移動培養(yǎng)皿的時候盡量動作輕,避免晃動。細胞生長挺快,那么細胞的增殖能力應該較強。胰酶消化成團的問題我覺得有以下幾種可能:一、細胞消化后吹打不均勻,造成細胞成團生長:二、細胞細化太過,細胞成片脫落,吹打時沒有受力點,細胞聚團生長。解決辦法:根據(jù)細胞生長的情況進行多次消化,將同次消化下來的細胞放在一個細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)。貼壁細胞傳代培養(yǎng):一般步驟為:真空泵吸走培養(yǎng)基,1XPBS漂洗兩次,加入1mlEDTA-Tripsin(100mm皿為例),37度放置數(shù)分鐘,輕拍培養(yǎng)瓶使細胞自瓶壁脫落,加入適量血清,以吸管上下吸放數(shù)次以打散細胞團塊,離心后加入新鮮培養(yǎng)基,按比例轉(zhuǎn)移至新皿。細胞的傳代最重要的是胰酶處理時間,若胰酶處理太久,容易造成細胞貼壁不緊,顯微鏡下觀察立體感不強,嚴重的時候甚至會造成細胞死亡。我談談個人經(jīng)驗:HepG-2、A549、Hela、SGC-7901幾種癌細胞處理時間可適當放長,一般處理5-6min,C2C12、COS-7、NIH-3T3比較容易脫落,2min足矣,P19Cl6和293細胞貼壁不緊,可在PBS漂洗后,直接換新鮮培養(yǎng)基打散。 細胞傳代方法:1:2傳代 HOC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCC 25細胞、Cloudman S91 melanoma clone M-3細胞、H-2023細胞 B16F0細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK-293-FT細胞、NCI H2106細胞、MLA144細胞 GT1-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LY-R細胞、BCaP 37細胞、2B4細胞 BOWES細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T 24細胞、MDA 435細胞、3T3-A31細胞 MDA-157細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SJ-RH30細胞、HES [Human embryonic skin fibroblast]細胞、NCIH820細胞 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系 FTC-133 epithelioid cells人甲狀腺癌細胞系 細胞生長特性:貼壁生長 細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書 常見細胞培養(yǎng)中一些問題總結(jié):1)培養(yǎng)基中血清的比例多少合適?血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的含量多少會對細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。血清的含量一般為5%-15%,不要低于5%或高過20%,因為含量過低會導致細胞營養(yǎng)不足,過高則會破壞滲透壓平衡。一般建議血清含量為10%,可以適量加減;2)何時須更換培養(yǎng)基?視細胞生長密度而定,或遵照細胞株基本數(shù)據(jù)上的更換時間,按時更換培養(yǎng)基即可。還可以參照指示劑的顏色變化進行更換;3)購買的復蘇細胞,為何會有脫落?因為運輸?shù)倪^程中不可避免的會有震蕩,收到后可以離心收集;4)購買的細胞冷凍管經(jīng)解凍后,為何會發(fā)生細胞數(shù)目太少之情形?研究人員在冷凍細胞之培養(yǎng)時出現(xiàn)細胞數(shù)目太少,大都是因為離心過程操作上的失誤,造成細胞的物理性損傷,以及細胞流失。建議細胞解凍后不要立刻離心,應待細胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可;5)購買的細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因?研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后,加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認為死細胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細胞置于–80°C太久;6)收到的冷凍管瓶身破裂,瓶蓋有裂紋,或瓶蓋脫落之原因?冷凍管瓶蓋裂紋,或瓶身破裂,可能是因為操作者夾取冷凍管時用力不當,造成冷凍管裂損,建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫,乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象,冷凍管有可能因此而造成細胞污染,故冷凍管于放入和取出液氮桶時,均應立刻將冷凍管再一次扭緊。 GM00637I細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH292細胞、Medical University of Graz-Chordoma 1細胞、HS-940-T細胞 NCI-H1876細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-647細胞、RBL細胞、RKO細胞 OCI-AML2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO320DM細胞、Panc02.03細胞、HNE1細胞 HELF細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BAR-T細胞、MBT-2細胞、CAL-120細胞 ARH 77細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UMUC-14細胞、MDA-453細胞、HET1A細胞 COLO320/DM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Pro-Lec1.3C細胞、Jurkat-FHCRC細胞、GOTO細胞 SHEE細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO320/DM細胞、SBC5細胞、Jurkat (clone E6-1)細胞 AAV-293細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P19細胞、A1847細胞、HECV細胞 Liver-02細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC-4細胞、GM00637F細胞、Ca-Ski細胞 HEL 92.1.7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MA104細胞、MSTO-211 H細胞、T-24細胞 FTC-133 epithelioid cells人甲狀腺癌細胞系 CLL-CII細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW13細胞、H-441細胞、D341Med細胞 P3X63Ag8.653細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 48細胞、CMT-167細胞、Beta-TC-6細胞 NB-19細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HREC細胞、PGLH7細胞、F98細胞 MDA MB 231細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L5178Y-R細胞、MX1細胞、E.G7-OVA細胞 MPP-89細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Adeno-293細胞、COLO 738細胞、IBRS2細胞 HEC-1-B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:QBC939細胞、BrCL15細胞、KP-4細胞 HEC-1-B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:QBC939細胞、BrCL15細胞、KP-4細胞 Nakata-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2172細胞、JVM-2細胞、NCIADRRES細胞 T2 (174 x CEM.T2)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Bowes melanoma cells細胞、NCIH2347細胞、GP2d細胞 FRH-0201細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LNCaP-Clone-FGC細胞、H-125細胞、SCLC-21H細胞 MZCRC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PNT-1A細胞、YD15細胞、HLF-a細胞 BE2-M17細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO680N細胞、CDC/EU.HMEC-1細胞、SW1222細胞 HLE-B3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:2PK-3細胞、HTSMC細胞、RPE-hTERT細胞 H-498細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NHRF細胞、SNU368細胞、COLO 320 DM細胞 MADISON LUNG TA-109細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PK136細胞、MIA PaCa-2細胞、C666-1細胞 C8-D1A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MN9D細胞、CCRF CEM細胞、CSQT-2細胞 DAKIKI Clone 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-431細胞、766T細胞、LLC-MK-2細胞 C-4 I細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Wills Eye Research Institute-Retinoblastoma-1細胞、THP-1(ATCC)細胞、CCRF/CEM細胞 OVCAR.3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Vero C1008細胞、SKNEP1細胞、Madin Darby Canine Kidney細胞 343MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Fox/NY細胞、ECC-12細胞、BCP-1細胞 Hs 606.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-SNU-16細胞、TM3細胞、HDSMC細胞 KAT5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HTori-3.1細胞、MHH-CALL2細胞、H-1404細胞 PA317細胞系相關(guān)產(chǎn)品:R 2 C細胞、Panc04.03細胞、H3396細胞 MLO-Y4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HELF細胞、Hs 832(C).T細胞、Jiyoye (P-2003)細胞 HELF細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BAR-T細胞、MBT-2細胞、CAL-120細胞 hA549細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MOLT16細胞、OVCA420細胞、Hs863T細胞 OC 316細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SF-539 BT細胞、Nittby-Salford 1細胞、MNNG-HOS (Cl#5)細胞 G-402細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FU-MMT-1細胞、NCI-H2141細胞、MGH-U1 (EJ)細胞 McA-RH 8994細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-375細胞、Baby Hamster Kidney-21細胞、SCL II細胞 SKCol1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AtT 20細胞、NCIH250細胞、OVCAR-8/ADR細胞 OVCAR 4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TSCC1細胞、HIEC細胞、NPA-87細胞 HR-8348細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MV(4;11)細胞、NCI-H441細胞、PLC/PRF5細胞 COLO-829細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-10細胞、SW48細胞、CA 46細胞 COV 434細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK/EBNA細胞、SKNBE2C細胞、HT1197細胞 NCIH1944細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KMM1細胞、H295R-S1細胞、HCC9204細胞 HEK-293-F細胞系相關(guān)產(chǎn)品:201T細胞、NCI-H1048細胞、STO細胞 SW 780細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs-695-T細胞、H82sclc細胞、H-1734細胞 Epithelioma Papulosum Cyprini細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EOMA細胞、McCoy B細胞、MES-SA Dx5細胞 H-2108細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK;293細胞、KM932細胞、HS578細胞 SKCO 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE32細胞、JJN3細胞、MDA-MB 231細胞 A172細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-Ly 8細胞、SN12C-PM6細胞、RPMI-7951細胞 HFL1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC3T3細胞、COLO-684細胞、SKO-007細胞 NBL-S細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CZ-1細胞、H-1395細胞、U-373MG ATCC細胞 HEK-293-EBNA細胞系相關(guān)產(chǎn)品:32Dcl3細胞、Bac 1.2F5細胞、BALB/3T3 clone A31細胞 H647細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DMS-273細胞、FRhK4細胞、Reuber-H-35 hepatoma細胞 SK-MES-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NEC細胞、SU-86-86細胞、Simpson細胞 RSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SU-DH-L5細胞、TKB1細胞、UWB1.289細胞 KB細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T-ALL1細胞、H-2171細胞、SUM-159PT細胞 SaOS細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EA.Hy926細胞、RPMI #8226細胞、CWR22R-V1細胞 M-NFS-60細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ACC-2細胞、EOL1細胞、Caco-2 BBe細胞 DOK細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM12878細胞、Nthy ori 3.1細胞、NB-19細胞 FTC-133 epithelioid cells人甲狀腺癌細胞系 MES-SA Dx5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs294細胞、HSC6細胞、C-33 A細胞 N2a細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MPP89細胞、BBE細胞、SF 295細胞 Eca109細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H283細胞、SW900細胞、PTK1細胞 OCI-AML2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO320DM細胞、LTPA細胞、HEK293-EBNA細胞 "
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