"MeWo epithelioid cells人惡性黑色素瘤細胞系 細胞背景資料:詳見相關文獻介紹 細胞形態(tài):上皮細胞樣 貼壁消化難題:1,先用PBS 把細胞洗兩遍,使瓶內沒有血清了,減少對胰酶的中和,然后用新配的0.25%的胰酶加入3ml左右,放在37度,然后可以在細胞有些消化下來時,拿著瓶口,運用手腕的力量輕輕震蕩瓶內液體,這樣細胞很快就下來了,還不需要吹打,分散也均勻;2,成團、絮狀:消化液里加入edta可以減少細胞成團的現(xiàn)象,血清可以終止胰酶的作用,如果是進口血清的話也能終止edta的作用。用胰酶消化后胰酶可以倒掉,也可以不倒,直接加血清終止,如果消化液中加入了edta的話,就要將消化液倒干凈,如果細胞貼壁要求不是很嚴格的話,一般不需要進行離心。鼻咽癌細胞的貼壁能力很強,用0.5%胰酶(含0.1%EDTA)一般要消化12~15min。用PBS洗滌時要洗凈殘余的培養(yǎng)基,加入胰酶后在培養(yǎng)箱中消化(避免細胞室溫下受損以及在此溫度時胰酶活性最強)至細胞收縮變圓(可顯微鏡下觀察)且有少許細胞脫落(有流下來的趨勢),隨后立即棄去胰酶(如果脫落的細胞很多且需要大量細胞實驗,則不能棄去胰酶),加入培養(yǎng)基仔細吹打(不能用無血清培養(yǎng)基或者PBS替代,否則細胞聚集成團塊或絮狀)。一般我都離心一次棄去上清(去除殘留的胰酶及漂浮的死細胞或細胞碎片);消化過度:馬上用培養(yǎng)基中和,用吸管吹打細胞,收集全部的細胞到以無菌的離心管中800RPM 3分鐘。棄上清,用全培重懸,換新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng),狀態(tài)不好的細胞在培養(yǎng)的過程中會死亡脫落,在換液的時候可以清除掉! U14細胞系相關產(chǎn)品:IFRS1細胞、DR2R 1610細胞、H-1838細胞 C3H-10T1/2細胞系相關產(chǎn)品:MUTZ-3細胞、ATN1細胞、Hs 281.T細胞 NCI.H23細胞系相關產(chǎn)品:KYSE450細胞、751細胞、AG06814-J細胞 細胞生長:貼壁 MeWo epithelioid cells人惡性黑色素瘤細胞系 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 冷凍細胞解凍程序:依據(jù)細胞株數(shù)據(jù)單指定之基礎培養(yǎng)基種類、血清種類和其它指定之成份和比例,制備培養(yǎng)基。絕大多數(shù)之細胞均無法立即適應不同之基礎培養(yǎng)基或不同之血清種類,若因實驗需要,必須有所不同時,務必以緩慢比例漸次改變培養(yǎng)基組成,確定細胞適應后,方進行所需之實驗。FBS(fetal bovine serum,胚牛血清), CS(calf serum,小牛血清)和HS(horse serum,馬血清),對細胞而言差異極大,請務必依據(jù)細胞株資料單指定之血清種類培養(yǎng)之。將培養(yǎng)基置于37°C水槽中回溫,回溫后噴以70%酒精并擦拭之,移入無菌操作臺內。取出冷凍管,立即放入37°C水槽中快速解凍,水面高度不可接近或高過冷凍管之蓋沿,否則易發(fā)生污染。輕搖冷凍管使其在1分鐘內全部融化后,以70%ethanol擦拭冷凍管外部,移入無菌操作臺內。依據(jù)細胞種類和濃度,于無菌操作臺內取10ml培養(yǎng)基加至T25或T75flask中。取出已解凍之細胞懸浮液,緩緩加入T25或T75flask內之培養(yǎng)基,混合均勻,放入37°C,5%CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)。對絕大多數(shù)細胞而言,1%以下之冷凍保護劑DMSO,不會對細胞之貼附或活化有不良影響,不需立刻由解凍細胞中去除,待第二天確定細胞生長或貼附良好后再去除即可。惟對極少數(shù)因對DMSO敏感或會造成細胞分化之細胞,需立即去除DMSO者,則可將解凍后之細胞懸浮液放入5-10ml培養(yǎng)基中,離心300xg(約1000rpm),5分鐘,小心移去上清液,加入適量新鮮培養(yǎng)基,將細胞均勻混合后,轉移至培養(yǎng)瓶中,再放入37°C,5%CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)。 細胞傳代方法:1:3-1:5傳代,2-3天換液1次。 MKN 45細胞系相關產(chǎn)品:hRPTC細胞、SK-MEL-2-LUC細胞、T2細胞 MDA.MB.231細胞系相關產(chǎn)品:PANC 203細胞、VP267細胞、KY70細胞 Tb1.Lu細胞系相關產(chǎn)品:CPA47細胞、H-1869細胞、L363細胞 HLE-B3細胞系相關產(chǎn)品:2PK-3細胞、HTSMC細胞、RPE-hTERT細胞 OKT3細胞系相關產(chǎn)品:TNC-1B12B4細胞、Experimental Mammary Tumour-6細胞、343 MG細胞 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系 MeWo epithelioid cells人惡性黑色素瘤細胞系 細胞生長特性:混合生長 細胞形態(tài)特性:成纖維細胞 細胞接收后的操作流程與注意事項:1)如果細胞為貼壁細胞,而收到時呈懸浮或者部分懸浮的狀態(tài),請將懸浮的細胞即時離心,加15%血清的完全培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)3天;同時原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細胞更換為15%血清的完全培養(yǎng)基培養(yǎng)3天。3天后若原瓶或者新瓶中的細胞都沒有出現(xiàn)增值而是繼續(xù)脫落死亡,請及時聯(lián)系實驗室技術人員會跟進解決;2)貼壁細胞生長緩慢;適當提高血清濃度(最高不能超過20%),或可根據(jù)該細胞生長密度,考慮胰酶消化后,轉移到新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng);3)生長不均:貼壁細胞若出現(xiàn)分布不均,成島狀生長,可將細胞進行消化,重懸打散細胞,加入新鮮培養(yǎng)基進行培養(yǎng)。 Fortner's melanotic melanoma #3細胞系相關產(chǎn)品:C4I細胞、AR4-IP細胞、NCI-H2347細胞 SCH細胞系相關產(chǎn)品:SUP T1細胞、Metastatic Variant 522細胞、DoHH-2細胞 HPMEC細胞系相關產(chǎn)品:Hela-mock細胞、GEO細胞、FAK+/+細胞 HcaF細胞系相關產(chǎn)品:H8細胞、YD-15細胞、RT-112細胞 SW 780細胞系相關產(chǎn)品:Hs-695-T細胞、H82sclc細胞、H-1734細胞 SGC7901/DDP細胞系相關產(chǎn)品:MHCC 97-H細胞、SUM190PT細胞、Co-115細胞 NRK 49F細胞系相關產(chǎn)品:MCA205細胞、YAC-1細胞、T-CAM2細胞 COLO678細胞系相關產(chǎn)品:P30 OHK細胞、PANC403細胞、H9細胞 OSC19細胞系相關產(chǎn)品:BL-6細胞、SEG-1細胞、SU86_86細胞 DSL-6A-C1細胞系相關產(chǎn)品:HTh 74細胞、SW-1271細胞、HMEC細胞 MeWo epithelioid cells人惡性黑色素瘤細胞系 RCC10RGB細胞系相關產(chǎn)品:PLA801-95C細胞、Michigan Cancer Foundation-10A細胞、MIO-M1細胞 HT115細胞系相關產(chǎn)品:OCI-AML-5細胞、SNU5細胞、SKMEL3細胞 HT144細胞系相關產(chǎn)品:PCI-4.2細胞、COLO829細胞、HEK 293-H細胞 LS411N細胞系相關產(chǎn)品:H-510細胞、GM2219C細胞、MC-CAR細胞 H748細胞系相關產(chǎn)品:MJ細胞、H-2009細胞、CAL 27細胞 MDA-415細胞系相關產(chǎn)品:HUVEC細胞、Mouse INsulinoma 6細胞、C22 (Clara)細胞 MDA-415細胞系相關產(chǎn)品:HUVEC細胞、Mouse INsulinoma 6細胞、C22 (Clara)細胞 Emory University-2細胞系相關產(chǎn)品:ME 180細胞、MDA-MB-157細胞、HIT clone T15細胞 NCI-SNU-761細胞系相關產(chǎn)品:293細胞、KM12細胞、SNU-182細胞 HPAF/CD18細胞系相關產(chǎn)品:MUS-M1細胞、PANC 813細胞、BSC-40細胞 526細胞系相關產(chǎn)品:SK-RC-52細胞、LUDLU-1細胞、H548細胞 NCI-H102細胞系相關產(chǎn)品:KHYG1細胞、B/C3T3細胞、WIL2 S細胞 B16-F10細胞系相關產(chǎn)品:Sp2/mIL-6細胞、HEK293-A細胞、EU-4細胞 NCI-H2135細胞系相關產(chǎn)品:DV90細胞、TGBC11T細胞、ISHI細胞 NPA細胞系相關產(chǎn)品:Rabbit Kidney 13細胞、JB-6細胞、GM16136細胞 RIN Cl-5F細胞系相關產(chǎn)品:SNB19細胞、HCC9204細胞、GM15452細胞 Bac12F5細胞系相關產(chǎn)品:RERF-LCMS細胞、WEHI 164細胞、H-28細胞 HO1N1細胞系相關產(chǎn)品:Case 3細胞、Clone M-3細胞、VMM5A細胞 SRA01/04 (HLE)細胞系相關產(chǎn)品:AMO-1細胞、SBC3細胞、3-LL細胞 SUP-T1細胞系相關產(chǎn)品:N-2a細胞、A-431細胞、SN12C細胞 PK13細胞系相關產(chǎn)品:MIA PaCa-2細胞、MM1S細胞、BEAS-2B細胞 NCI-H125細胞系相關產(chǎn)品:J82COT細胞、SKMEL28細胞、HT144-mel細胞 H-548細胞系相關產(chǎn)品:HHL-5細胞、BMSC/hBMSCs細胞、HR8348細胞 HO8910/PM細胞系相關產(chǎn)品:Bac12F5細胞、U-118-MG細胞、MUS-M1細胞 STO細胞系相關產(chǎn)品:NCIH1092細胞、WEHI3B細胞、H-146細胞 HTh 74細胞系相關產(chǎn)品:MDA-MB-415細胞、GM00637細胞、IOSE-Mar細胞 SMMC7721細胞系相關產(chǎn)品:CTLA4Ig-24細胞、C-6細胞、GM07404細胞 H-1694細胞系相關產(chǎn)品:HEL 92.1.7細胞、526-mel細胞、SKMEL-2細胞 Human Intestinal Epithelial Cell-6細胞系相關產(chǎn)品:QGY7701細胞、CNE-2細胞、PK (15)細胞 PL11細胞系相關產(chǎn)品:BHK細胞、Madin Darby Canine Kidney細胞、PF-382細胞 CCRF/CEM-C7細胞系相關產(chǎn)品:SLMT-1細胞、COLO206細胞、SCCVII/St細胞 U-266 AR1細胞系相關產(chǎn)品:DI TNC1細胞、SU86.86細胞、H1819細胞 HEC1B細胞系相關產(chǎn)品:PTK 2細胞、MIMVEC細胞、OE-21細胞 LNCaP-ATCC細胞系相關產(chǎn)品:MLA 144細胞、Japanese Tissue Culture-28細胞、P3HRI細胞 Tca-83細胞系相關產(chǎn)品:Centre Antoine Lacassagne-33細胞、NCI-H1648細胞、NCI-H1355細胞 H1048細胞系相關產(chǎn)品:IGROV1細胞、HT55細胞、NL20細胞 GM06141B細胞系相關產(chǎn)品:MGH-U1 (EJ)細胞、SN12-PM6細胞、H-719細胞 LS174細胞系相關產(chǎn)品:HIBEC細胞、33604細胞、H1838細胞 LS174細胞系相關產(chǎn)品:HIBEC細胞、33604細胞、H1838細胞 MKN-1細胞系相關產(chǎn)品:SNB-19細胞、SUM-159-PT細胞、HDLM-2細胞 HTR-8細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H2330細胞、MDA-157細胞、V 79細胞 H7721細胞系相關產(chǎn)品:OCI-Ly 18細胞、NCIH2073細胞、PY8119細胞 SW 948細胞系相關產(chǎn)品:MGc80-3細胞、U-87-MG細胞、Murine Thymic Epithelial Cell line 1細胞 Suzhou Human Glioma-44細胞系相關產(chǎn)品:52PE細胞、H-157細胞、B16 melanoma F10細胞 HCC 70細胞系相關產(chǎn)品:Nthy-ori 3-1細胞、SK-MEL28細胞、AC16 [Human hybrid]細胞 YD38細胞系相關產(chǎn)品:AG06814-J細胞、OVCAR-8/ADR細胞、143B細胞 UACC-812細胞系相關產(chǎn)品:HT144-mel細胞、CL 1-5細胞、H69C細胞 Kit 225細胞系相關產(chǎn)品:NCC-IT細胞、MC3T3-L1細胞、NFHIOSE-29細胞 CEM-C1細胞系相關產(chǎn)品:Reuber H35細胞、AG06814-J細胞、Hs 729細胞 BL-6細胞系相關產(chǎn)品:CAL62細胞、Hs729細胞、HemECs細胞 HEC-1-A細胞系相關產(chǎn)品:WSU-DLCL2細胞、U-87 MG細胞、Ramos.2G6.4C10細胞 MeWo epithelioid cells人惡性黑色素瘤細胞系 BNL 1ME A.7R.1細胞系相關產(chǎn)品:HCC2218細胞、SW 1573細胞、COLO 684細胞 H-82細胞系相關產(chǎn)品:NCIH295R細胞、U373-MG細胞、SuDHL 8細胞 Caki-2細胞系相關產(chǎn)品:SK-Mel 1細胞、ARO-81細胞、PK136細胞 HPMC細胞系相關產(chǎn)品:FF-WT-BJ細胞、HuNS1細胞、LN-18細胞 "
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