"VMRC-RCZ epithelioid cells人腎細胞癌細胞系 細胞背景資料:詳見相關文獻介紹 細胞形態(tài):上皮細胞樣 細胞復蘇相關注意事項:1.取細胞的過程中注意帶好防凍手套,護目鏡。此項尤為重要,細胞凍存管可能漏入液氮,解凍時凍存管中的氣溫急劇上升,可導致爆炸。2.凍存液的問題:凍存液的配置已是常識,在這里不作詳述,但二甲基亞砜(DMSO )對細胞不是完全無毒副作用,在常溫下,二甲基亞砜對細胞的毒副作較大,因此,必須在1-2min內使凍存液完全融化。如果復蘇溫度太慢,會造成細胞的損傷,二甲基亞砜(DMSO)選擇進口產品。3.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細胞解凍后二甲基亞砜濃度較高,注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度,以減少對細胞的損傷。4.離心問題:目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng),第二天換液。因為離心的目的是兩個,去除DMSO,去除死細胞,這個是標準流程,但對一般人來說,把握不好離心轉速和時間,轉的不夠活細胞沉底的少,細胞就全被扔掉了,轉過了活細胞會受壓過大,死亡。此外在操作過程中容易污染,所以不推薦。另一種說法為細胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO),DMSO對細胞有一定的毒副作用,所以須將離心后的液體前倒凈,且一定倒干凈。我在試驗中按照常規(guī)的離心分裝的方法進行復蘇,結果無異常。5.細胞貼壁少的問題:教科書中說明凍存細胞解凍時1ml細胞液要加10ml-15ml培養(yǎng)液,而在我的試驗中的經驗總結為培養(yǎng)基越少細胞越容易貼附。6.復蘇細胞分裝的問題:試驗中我的經驗總結為復蘇1管細胞一般可分裝到1-2只培養(yǎng)瓶中,分裝過多,細胞濃度過低,不利于細胞的貼壁。7.加培養(yǎng)基的量放入問題:這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度,從如果你加培養(yǎng)基的太少,那么DMSO的濃度就會比較大,就會影響細胞生長,從以前的資料來看,DMSO的濃度在小于0.5%的時候對一般細胞沒有什么影響,還有一個說法是1%。所以如果你的凍存液的濃度是10%DMSO的話那么加10ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。 16HBE細胞系相關產品:MC38細胞、RASMC細胞、SNB.19細胞 SMMC7721細胞系相關產品:CTLA4Ig-24細胞、C-6細胞、GM07404細胞 C3H/10T1/2-clone8細胞系相關產品:MSF細胞、SW-962細胞、NSC-34細胞 細胞生長:貼壁 VMRC-RCZ epithelioid cells人腎細胞癌細胞系 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細胞產品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 為了防止因污染或技術原因使長期培養(yǎng)功虧一簣,考慮到培養(yǎng)細胞因傳代而遲早會出現(xiàn)變異,有時因寄贈、交換和購買,培養(yǎng)細胞從一個實驗室轉運到另一個實驗室,的策略是進行低溫保存。這對于維持一些特殊細胞株的遺傳特性極為重要?,F(xiàn)簡要介紹深低溫保存法(-70℃~-196℃)的特點。細胞深低溫保存的基本原理是:在-70℃以下時,細胞內的酶活性均己停止,即代謝處于完全停止狀態(tài),故可以長期保存。細胞低溫保存的關鍵,在于通過0~20℃階段的處理過程。在此溫度范圍內,水晶呈針狀,極易招致細胞的嚴重損傷。凍存細胞的復蘇:凍存細胞較脆弱,要輕柔操作。凍存細胞要快速融化,并直接加入完全生長培養(yǎng)基中。若細胞對凍存劑(DMSO或甘油)敏感,離心去除凍存培養(yǎng)基,然后加入完全生長培養(yǎng)基中。直接鋪板方法:取出貯存細胞,37℃水浴中快速融化;直接用完全生長培養(yǎng)基鋪板細胞。1ml凍存細胞使用10~20ml完全生長培養(yǎng)基。進行活細胞計數(shù),細胞接種應該至少在3×10(5)活細胞/ml;培養(yǎng)細胞12到24小時,更換新鮮的完全生長培養(yǎng)基,去除凍存劑。離心方法:取出貯存細胞,37℃水浴中快速融化;把1到2ml凍存細胞加入到大約25ml完全生長培養(yǎng)基,輕輕混勻;以大約80x離心2到3分鐘;棄去上清。在完全生長培養(yǎng)基輕輕再次懸浮細胞,并且進行活細胞計數(shù)。細胞鋪板,細胞接種應該至少為3×10(5)活細胞/ml。細胞的分化:一個成年人全身細胞總數(shù)約1012個,可以區(qū)分為200多種不同類型的細胞:形態(tài)結構,代謝,行為,功能等各不相同。追根溯源,這么多種細胞均來自一個受精卵細胞。所以,通常把發(fā)育過程中,細胞后代在形態(tài)、結構和功能上發(fā)生差異的過程稱為細胞分化。細胞分化發(fā)生在胚胎階段,也發(fā)生在胎兒出生以后,乃至成人階段。例如,人體血細胞的產生和分化,這個過程在人的一生中一直持續(xù)著。由旺盛生長不斷分裂的細胞,轉入分化,通常從細胞周期中G1期開始時一個確定的點G0點“逃逸”出細胞周期。旺盛生長分裂的細胞和各種分化了的細胞,它們的基因表達和代謝活動各不相同。 細胞傳代方法:1:6傳代 SU-DHL-8細胞系相關產品:CII細胞、HMrSV5細胞、MCA38細胞 LS-174T細胞系相關產品:H4-II-EC3細胞、NCIH1869細胞、SKCol1細胞 Lu99A細胞系相關產品:B16-F1細胞、Renal Carcinoma細胞、MBT2細胞 LAPC-4細胞系相關產品:MESSA Dx5細胞、COR-L51細胞、B95.8細胞 AMJ2-C8細胞系相關產品:ANA1細胞、CHO K1細胞、SGC 7901細胞 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系 VMRC-RCZ epithelioid cells人腎細胞癌細胞系 細胞生長特性:貼壁生長 細胞形態(tài)特性:上皮細胞 培養(yǎng)細胞真的不難,最關鍵幾點:1)所有的東西使用,如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進口的,真的很難相信你會把細胞養(yǎng)壞;2)動作要快,胰酶消化,換液什么,細胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外,要掌握好胰酶消化時間,所謂的細胞狀態(tài)差,很多時候是傳代的原因;3)有時間的話,需要細胞計數(shù),傳相應數(shù)目的細胞到培養(yǎng)皿中,可以大致清楚細胞的生長曲線,不會臨時要處理,手足無措;4)要做什么心里要非常清楚,合理安排時間,傳代細胞的實驗穿插進行,可以節(jié)省很多時間,也不會耽誤別人的實驗;5)個人的實驗器具自己收一套,不要和別人混用,最近換了什么新的東西稍微記一下,試劑一旦懷疑污染,馬上丟;6)傳代細胞不能進去太多人,避免相互干擾。每天對待細胞比孝敬爹媽還用心,那真是捧在手里怕碎了,含在嘴里怕化了,看在眼里怕丟了,培養(yǎng)細胞時有哪些經驗教訓可以分享呢?1)嚴格無菌操作,多噴噴酒精,要是對滅菌的東西不放心,自己包自己送自己烘干;2)不要和別人共用試劑耗材,自己準備一套;3)有可能的話在拿到新細胞的時候做好支原體衣原體檢測;4)水浴鍋很臟,生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟,勤換(滅菌水加進去);5)晚上離開的時候給傳代細胞照紫外,超凈臺是用完就開;6)是同一時間就你一個人在用傳代細胞在養(yǎng)細胞。 HEL 299細胞系相關產品:H2085細胞、MM.1S細胞、L-5178-Y細胞 MES-13細胞系相關產品:OSK-1細胞、CTLL(2)細胞、Calu3細胞 COR-L 105細胞系相關產品:CHP212細胞、MDCKII細胞、HCCLM3細胞 PC 61.5.3細胞系相關產品:alpha TC1 clone 6細胞、SK-MEL-MeWo細胞、U-251-MG細胞 MRCV細胞系相關產品:NCI-H524細胞、BEP2D細胞、D-283細胞 38C13細胞系相關產品:YH細胞、P31-FUJ細胞、Tn5 B1-4細胞 D-283細胞系相關產品:NP69細胞、NCIH2023細胞、Vero-E6細胞 HT-144細胞系相關產品:RMC-1細胞、SU-DH-L5細胞、Line 522細胞 Panc 8.13細胞系相關產品:BC-3H-1細胞、TOV-112D細胞、Medical Research Council cell strain-5細胞 LTEP-sm 1細胞系相關產品:Mono-Mac-6細胞、UPCI-SCC-090細胞、SNU-475細胞 VMRC-RCZ epithelioid cells人腎細胞癌細胞系 alpha TC1-6細胞系相關產品:Namalva細胞、H-1688細胞、NCIH2228細胞 RGC-5細胞系相關產品:B16F0細胞、Human Epidermoid carcinoma #2細胞、A 72細胞 HTSMC細胞系相關產品:LIM-1215細胞、Ej138細胞、HTori-3細胞 HS-766T細胞系相關產品:SW-1353細胞、NCI-H2085細胞、C32r細胞 NCI-H102細胞系相關產品:KHYG1細胞、B/C3T3細胞、WIL2 S細胞 BOWES細胞系相關產品:T 24細胞、MDA 435細胞、3T3-A31細胞 BOWES細胞系相關產品:T 24細胞、MDA 435細胞、3T3-A31細胞 NIE 115細胞系相關產品:B16-F10-BL6細胞、Bac1 2F5細胞、NCIH1395細胞 MCA-205細胞系相關產品:HEK-293 c18細胞、NCI-SNU-1040細胞、Nb2a細胞 P3-NS1/1Ag 4.1細胞系相關產品:SIRC細胞、VERO C 1008細胞、H-2122細胞 SJSA-1細胞系相關產品:PECAPJ34細胞、HAC-84細胞、MDA.MB.435細胞 NCIH1417細胞系相關產品:SUP-T1細胞、E.L.4細胞、Panc 2.03細胞 PE/CA-PJ34 (clone C12)細胞系相關產品:MOLT 4細胞、Swiss-3T3細胞、H-2087細胞 PA-1細胞系相關產品:Becker細胞、NUGC-2細胞、NCIH1819細胞 SNU-16細胞系相關產品:2E8細胞、JurkatE6-1細胞、X63-Ag8.653細胞 Nthy-ori 3.1細胞系相關產品:CL 1-5細胞、LLC-PK(1)細胞、IPEC1細胞 NCI-H820細胞系相關產品:P31/FUJ細胞、Caco 2細胞、HHUA細胞 NCI-H522細胞系相關產品:SJCRH30細胞、RIN-m 14B細胞、H2170細胞 KYSE0520細胞系相關產品:Caki-1細胞、RM-1細胞、S16細胞 Tb 1 Lu (NBL-12)細胞系相關產品:VMM-5A細胞、SU-DHL-2細胞、RASMCs細胞 Bat lung細胞系相關產品:LTEP-sm細胞、SHI1細胞、H-187細胞 NCIH820細胞系相關產品:HBE細胞、SNU-668細胞、SKBr3細胞 IMR-90細胞系相關產品:LC1細胞、WILL2細胞、MIN6細胞 AML12細胞系相關產品:MC-3T3-E1細胞、PIG3細胞、Panc-08.13細胞 RN-c細胞系相關產品:BSC-1細胞、X63細胞、NTERA-2細胞 KBM-7/Hap8細胞系相關產品:HEP3B2細胞、GCT0404細胞、4T1-A細胞 CAL-12T細胞系相關產品:BEL-7404細胞、RF/6A細胞、NCI-HUT-292細胞 HEK-293H細胞系相關產品:SGC7901/DDP細胞、H1650_CO細胞、10T1/2細胞 SUM-190PT細胞系相關產品:SK-N-F1細胞、Calu-1細胞、CWR22-R1細胞 HEK 293細胞系相關產品:WM266細胞、PaTu8988s細胞、LN382細胞 NCIH1648細胞系相關產品:NRK-49F細胞、Hs343T細胞、NS-1細胞 PLA801-95C細胞系相關產品:NCI-HUT-292細胞、SK Mel 1細胞、H841細胞 Gejiu Lung Carcinoma-82細胞系相關產品:NCI-H1395細胞、87 MG細胞、OCILY-3細胞 JB6 clone 30, subclone 7b細胞系相關產品:JB6 Cl 30細胞、RS4;11細胞、RC92A細胞 DI TNC1細胞系相關產品:H-2172細胞、HREC細胞、ATDC5細胞 COLO 738細胞系相關產品:T 98 G細胞、Hs 688(A).T細胞、P560細胞 RAW2647細胞系相關產品:P30/OHK細胞、0V-1063細胞、SNU520細胞 KMBC細胞系相關產品:MKN-28細胞、TE 85 ClF-5細胞、Neukoplast細胞 Sarcoma OSteogenic-2細胞系相關產品:8305C_1細胞、MZ-CRC-1細胞、MC116細胞 Hs888Lu細胞系相關產品:COLO 829細胞、Y79細胞、SUM52PE細胞 H1623細胞系相關產品:OCILY7細胞、HO-8910PM細胞、mouse Inner Medullary Collecting Duct-3細胞 8505C細胞系相關產品:BGC823細胞、NCI-H1930細胞、Danio rerio Gill細胞 U-266 AR1細胞系相關產品:DI TNC1細胞、SU86.86細胞、H1819細胞 NCIH244細胞系相關產品:LIPF155C細胞、MF2059細胞、EJ細胞 UMRC2細胞系相關產品:32D/cl3細胞、Malme3M細胞、HBZY-1細胞 MDAPCa-2b細胞系相關產品:TOV-112D細胞、U-373MG細胞、HS-683細胞 MC 116細胞系相關產品:GM06141細胞、KFB細胞、MH-S細胞 RCK-8細胞系相關產品:University of Arizona Cell Culture-893細胞、WC00079細胞、RPMI 7666細胞 VP 267細胞系相關產品:Statens Seruminstitut Rabbit Cornea細胞、ELD-1細胞、GM03190細胞 MAVER1細胞系相關產品:SNU-761細胞、HuNS1細胞、FF-WT-BJ細胞 UM-RC-2細胞系相關產品:PNEC30細胞、B95.8細胞、Hs832T細胞 VMRC-RCZ epithelioid cells人腎細胞癌細胞系 NBL-7細胞系相關產品:KU 812F細胞、M14細胞、Highly Aggressively Proliferating Immortalized細胞 KYSE-450細胞系相關產品:MHHCALL2細胞、SF-763細胞、MFM223細胞 D10.G4.1細胞系相關產品:CHP-126細胞、GM07404A細胞、NCI-SNU-216細胞 COR-L 105細胞系相關產品:CHP212細胞、CHL細胞、67NR細胞 "
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