"MDA-PCa-2b epithelioid cells人前列腺癌細胞系 細胞背景資料:詳見相關文獻介紹 細胞形態(tài):上皮細胞樣 細胞復蘇后貼壁細胞較少的問題分析:總結1:復蘇過程沒有問題,是否是從液氮拿出直接放入溫水,還有培養(yǎng)箱,二氧化碳濃度,培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS 15-20%,看看能否幫助貼壁,當然也需要考慮血清問題,還有確信拿來的細胞沒問題。總結2:首先應該懷疑凍存,實際上復蘇出問題的可能非常小,因為操作簡單,而且死板。1、你凍存的時候是不是消化的時間過長,這是一般人所注意不到的,即使書上也不講這個問題,太長的消化時間會讓細胞復蘇時失去貼壁能力,表現(xiàn)為先貼后死,原因是在你復蘇的時候細胞已進入凋亡程序,不可逆轉(zhuǎn)的死亡。2、你的凍存液好不好,是什么,甘油還是DMSO,質(zhì)量非常重要,否則也會死亡。3、你的凍存液的量加的是不是太多,ATCC推薦是不超過7%,大于5%,太多也不好。4、你在凍存的時候是不是把DMSO混均勻,這個有一些影響,但不算太大。5、你的凍存是否按部就班,就是所溫度梯度是不是把握嚴格,很多人容易忘卻這個事情,因為這個東西流程長。6、如果你細胞污染,你是否能很快看到,我比我的導師能早一天看到污染。從這個角度講建議去除離心這步。7、你的細胞在凍存前是否過密。還有,不贊成孵箱污染這個概念的,所有在一個孵箱里的細胞都污染一個細菌的話,這個細菌是源于孵箱的,但這不代表孵箱污染,因為孵箱無論你如何處理都有大量的細菌,問題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找,以后就不犯同樣的問題,這個很重要,不能靠猜,否則你就有可能細胞養(yǎng)絕最后換課題,這個見得太多了,別不當會事。 TC-1[JHU-1]細胞系相關產(chǎn)品:OCI/AML5細胞、BEL/FU細胞、MLA 144細胞 ROS1728細胞系相關產(chǎn)品:T_T_細胞、SW962細胞、SW 954細胞 H295細胞系相關產(chǎn)品:T173細胞、CMK細胞、KRCY細胞 細胞生長:貼壁 MDA-PCa-2b epithelioid cells人前列腺癌細胞系 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細胞的衰老:體外細胞培養(yǎng)實驗證明:成纖維細胞:來自胎兒傳代50次后衰老死亡,來自成人傳代20次后衰老死亡(與具體年齡有關;來自小鼠傳代14--28次后衰老死亡,來自烏龜傳代90--125次后衰老死亡。細胞衰老過程中會發(fā)生一系列的變化,包括:蛋白質(zhì)合成速度降低,已有蛋白質(zhì)結構變化,特異蛋白質(zhì)成份出現(xiàn);同時,細胞核,線粒體,膜系統(tǒng)、骨架系統(tǒng)等都有結構、功能的改變。細胞衰老原因,尚無定論,出現(xiàn)過好幾種理論與假說,其中得到較廣泛認可的是“自由基損傷假說”。細胞凋亡:細胞的死亡是個體存活的正?,F(xiàn)象,常見的細胞死亡形式有3種:壞死、凋亡和細胞毒性。多細胞生物的生命活動中,因為環(huán)境因素的突然變化或病原物的入侵,導致一部分細胞死去,稱為細胞的病理死亡,或細胞壞死。壞死是細胞暴露于嚴重的物理或化學刺激時導致的細胞死亡;細胞毒性是由細胞或者化學物質(zhì)引起的單純的細胞殺傷事件,不依賴于其它兩種細胞死亡機理,如殺傷T細胞的細胞毒性作用。還有一種情況,一部分細胞的死亡是生物個體正常生命活動(代謝、生長、發(fā)育、分化)的一個必要部分;似乎帶有“犧牲局部,保全整體”的意味。這種情況下的細胞死亡,明顯地受遺傳控制,稱為細胞凋亡。凋亡(Apoptosis)則是程序性的、正常的細胞死亡,是機體清除無用的或者不想要的細胞的手段。它與細胞壞死是兩個截然不同的過程,無論從形態(tài)學、生物學還是生化的特征來說,都有明顯的區(qū)別。細胞凋亡現(xiàn)象普遍存在于生物界。細胞凋亡與細胞增殖、分化和衰老起著互補與平衡的作用,在多細胞動物的發(fā)育、形態(tài)建成與維持中扮演至關重要的角色。作為細胞的一種基本生命現(xiàn)象,凋亡失控的結果將是可怕的:凋亡不足時,易發(fā)生癌變、病毒性疾病和自身免疫疾病;而凋亡過量則可能產(chǎn)生獲得性免疫缺陷綜合征(HIV)、重癥肝炎與退行性神經(jīng)疾病,如老年性癡呆癥(Alzheimer""s disease)、帕金森氏癥(Parkinson""s disease)。因此研究細胞凋亡及其機理具有重要的理論和實踐意義。 細胞傳代方法:1:2-1:4傳代,2-3天換液1次。 P 3 HR 1細胞系相關產(chǎn)品:SK-MEL-31細胞、Monomac-1細胞、NCI-HUT-460細胞 KS-1 [Human glioblastoma]細胞系相關產(chǎn)品:BEL 7405細胞、BC-021細胞、TE-7細胞 NCIH524細胞系相關產(chǎn)品:SDBMSC細胞、MDA-415細胞、Kit225細胞 MRMT-1細胞系相關產(chǎn)品:HOEC細胞、SNU-638細胞、CORL88細胞 UACC 893細胞系相關產(chǎn)品:M2-10B4細胞、RT-BM-1細胞、293S細胞 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系 MDA-PCa-2b epithelioid cells人前列腺癌細胞系 細胞生長特性:貼壁生長 細胞形態(tài)特性:上皮細胞 細胞培養(yǎng)實驗中常見問題總結:1)一般客戶拿到細胞后,應該注意什么?客戶收到細胞后先不開蓋,放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議受收細胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,顯微鏡下拍細胞100X,200X各一張),排除細胞本身污染的情況;收到細胞未開封,出現(xiàn)污染狀況我們負責免費發(fā)送一株細胞。收到細胞時如無異常情況,請在顯微鏡下觀察細胞密度,如為貼壁細胞,未超過80%匯合度時,將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出,留下10ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng);超過80%匯合度時,請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞,吸出培養(yǎng)液、1000轉(zhuǎn)/分鐘離心2分鐘,吸出上清,管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。細胞消化液建議使用PBS配制,慎用Hanks液配制;2)快遞細胞多久能到,是寄凍存的細胞還是復蘇好的細胞?我們采用快遞發(fā)貨,一般外地2--3天,寄細胞前請確認當?shù)販囟龋绻麣鉁氐陀冢炊鹊?,則采用郵寄凍存細胞;3)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基?不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應之細胞培養(yǎng)基,若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基,細胞大都無法立即適應,造成細胞無法存活;4)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類?不能。血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的種類和品質(zhì)對于細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清,在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同,血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。 V-79細胞系相關產(chǎn)品:NCI-SNU-5細胞、H9細胞、SKM1細胞 MCA205細胞系相關產(chǎn)品:JB-6細胞、COLO 320DM細胞、293c18細胞 NCIH250細胞系相關產(chǎn)品:NCIH322細胞、8305-C細胞、SNU-761細胞 Hs-746T細胞系相關產(chǎn)品:NOZAWA細胞、CCRF/CEM-C7細胞、EAhy926細胞 alphaTC1 Clone 6細胞系相關產(chǎn)品:CCRF.CEM細胞、HBE135-E6E7細胞、ZR-75-1細胞 Hs 863.T細胞系相關產(chǎn)品:CHO-Lec1細胞、A431細胞、WEHI-231細胞 HBL100細胞系相關產(chǎn)品:PLB985細胞、Mel RM細胞、SU-DHL-10細胞 BS-C-1細胞系相關產(chǎn)品:U87-MG細胞、RCC-4細胞、H-1693細胞 H 9細胞系相關產(chǎn)品:Tadarida brasiliensis 1 lung細胞、BE(2)C細胞、P3/NS1/1-Ag4.1細胞 RAW264.7細胞系相關產(chǎn)品:SK MEL 5細胞、U-266細胞、Panc02-H0細胞 MDA-PCa-2b epithelioid cells人前列腺癌細胞系 UM-UC-3細胞系相關產(chǎn)品:16HBEo-細胞、A704細胞、AN3CA細胞 MDA-MB-435 S細胞系相關產(chǎn)品:MDA231-LM2細胞、DHL6細胞、INS1E細胞 NCIH1792細胞系相關產(chǎn)品:HOS TE85細胞、Y3-Ag 1.2.3細胞、HCC1833細胞 3AO細胞系相關產(chǎn)品:TH1細胞、H711細胞、RN細胞 NCTC 3960細胞系相關產(chǎn)品:MD Anderson-Metastatic Breast-157細胞、HOS/MNNG細胞、JAR細胞 UO.31細胞系相關產(chǎn)品:MDA-MB-134 VI細胞、GB-1細胞、NBL-1細胞 UO.31細胞系相關產(chǎn)品:MDA-MB-134 VI細胞、GB-1細胞、NBL-1細胞 LS 1034細胞系相關產(chǎn)品:MNNG-HOS (TE 85, clone F-5)細胞、LY細胞、OVCA 433細胞 COR-L88細胞系相關產(chǎn)品:FLC-7細胞、JCA1細胞、H-1385細胞 GM07404A細胞系相關產(chǎn)品:SNU407細胞、HTori-3細胞、CTLL(2)細胞 SW 780細胞系相關產(chǎn)品:Hs-695-T細胞、H82sclc細胞、H-1734細胞 H196細胞系相關產(chǎn)品:WM-2664細胞、HcaF細胞、GM01232細胞 C3H10T1/2CL8細胞系相關產(chǎn)品:SKNFI細胞、TE-15細胞、H-2073細胞 HPAFII細胞系相關產(chǎn)品:UM-UC-1細胞、SKG-3a細胞、Centre Antoine Lacassagne-85-1細胞 End1/E6E7細胞系相關產(chǎn)品:Vero E6細胞、HECCL-1細胞、H1869細胞 hFOB 1.19細胞系相關產(chǎn)品:HTR8細胞、MiaPaCa2細胞、THP-1(ATCC)細胞 FHL 124細胞系相關產(chǎn)品:38C13細胞、L-M[TK-]細胞、FRO 81-2細胞 P3-Jiyoye細胞系相關產(chǎn)品:M-NFS-60細胞、SHZ-88細胞、SK-RC-39細胞 Hu-P-T3細胞系相關產(chǎn)品:OCM1細胞、NCI-H28細胞、526mel細胞 SU-DHL-4細胞系相關產(chǎn)品:NCI-522細胞、SW 579細胞、NIHOVCAR3細胞 HOS TE 85細胞系相關產(chǎn)品:293AD細胞、LI7細胞、MOVAS-1細胞 RT4細胞系相關產(chǎn)品:U-118-MG細胞、OLN 93細胞、SVOG細胞 Swiss-3T3細胞系相關產(chǎn)品:H-1688細胞、Capan2細胞、HCC1395細胞 HTR-8/SV neo細胞系相關產(chǎn)品:BDCM細胞、RMa-bm細胞、NCI-H747細胞 MN-9D細胞系相關產(chǎn)品:Mono Mac6細胞、BT549細胞、H-2405細胞 HS-940-T細胞系相關產(chǎn)品:Hs940-T細胞、WILL-2細胞、HSF2細胞 7404細胞系相關產(chǎn)品:4-1st細胞、Hs 706.T細胞、Hs 821.T細胞 HT細胞系相關產(chǎn)品:WM35細胞、MIHA細胞、SNU1細胞 D407 RPE細胞系相關產(chǎn)品:NCI H508細胞、SuDHL 10細胞、GM05384細胞 IPLB-SF-21細胞系相關產(chǎn)品:Z-138細胞、COLO320 DM細胞、786O細胞 H2052_MM細胞系相關產(chǎn)品:SNU-368細胞、GBCSD細胞、WM 451-Lu細胞 SHIN-3細胞系相關產(chǎn)品:Ball 1細胞、N2a細胞、HTR8細胞 OVCA 432細胞系相關產(chǎn)品:YES2細胞、NT-2細胞、HOC細胞 SW 48細胞系相關產(chǎn)品:HCe-8693細胞、MFHL-2細胞、Detroit-562細胞 RDES細胞系相關產(chǎn)品:RC-4B/C細胞、CD 18細胞、BT 549細胞 HEK 293 c18細胞系相關產(chǎn)品:HBEpiC細胞、OVCAR 420細胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-2細胞 3T3-L1 ad細胞系相關產(chǎn)品:D-283 Med細胞、Hs 819.T細胞、H2009細胞 RBMEC細胞系相關產(chǎn)品:mRTEC細胞、Hs 729細胞、Ramos(RA1)細胞 3T3-J2細胞系相關產(chǎn)品:Potorous tridactylus Kidney 1細胞、C-127細胞、VK2細胞 NS1細胞系相關產(chǎn)品:H-889細胞、OVCAR-5細胞、AN3細胞 HPAF-I細胞系相關產(chǎn)品:KM.12細胞、HC11 Mammary Epithelium細胞、Hs 832(C).T細胞 SUM-102細胞系相關產(chǎn)品:H-1651細胞、NRK 49F細胞、SKN-AS細胞 SK-N-BE2C細胞系相關產(chǎn)品:MDA-MB468細胞、TE 32.T細胞、OVCAR-432細胞 Kit225細胞系相關產(chǎn)品:SK-N-BE(2)-M17細胞、CAL-27細胞、NCIH2107細胞 624-mel細胞系相關產(chǎn)品:HSC-5 [Human skin squamous cell carcinoma]細胞、aNK細胞、NUGC-2細胞 KMS11細胞系相關產(chǎn)品:B 95-8細胞、HCA-7細胞、RBMEC細胞 FL 62891細胞系相關產(chǎn)品:HL60細胞、NCI-SNU-216細胞、KPL-1細胞 Det 562細胞系相關產(chǎn)品:Loucy細胞、G402細胞、NCI-H1882細胞 HDLM-2細胞系相關產(chǎn)品:MHCC-97細胞、D407細胞、H2106細胞 MCF-12A細胞系相關產(chǎn)品:LSC-1細胞、SKHEP-1細胞、EB-2細胞 Vx-2細胞系相關產(chǎn)品:HuPT3細胞、GL-261細胞、Sun Yat-sen university Ophtalmic center-Retinoblastoma 50細胞 MDA-PCa-2b epithelioid cells人前列腺癌細胞系 OsA-CL細胞系相關產(chǎn)品:TE11細胞、TE6細胞、NRK 52E細胞 SKN-AS細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H1238細胞、ME 180細胞、Mino細胞 UMR106細胞系相關產(chǎn)品:TGW-nu細胞、IGROV-1細胞、Potorous tridactylus Kidney 2細胞 NCIH250細胞系相關產(chǎn)品:NCIH322細胞、NCIH2009細胞、MDA-MB-175VII細胞 "
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