"COV434 epithelioid cells人卵巢顆粒腫瘤細(xì)胞系 細(xì)胞背景資料:詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹 細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣 細(xì)胞復(fù)蘇后貼壁細(xì)胞較少的問題分析:總結(jié)1:復(fù)蘇過程沒有問題,是否是從液氮拿出直接放入溫水,還有培養(yǎng)箱,二氧化碳濃度,培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS 15-20%,看看能否幫助貼壁,當(dāng)然也需要考慮血清問題,還有確信拿來的細(xì)胞沒問題。總結(jié)2:首先應(yīng)該懷疑凍存,實(shí)際上復(fù)蘇出問題的可能非常小,因?yàn)椴僮骱?jiǎn)單,而且死板。1、你凍存的時(shí)候是不是消化的時(shí)間過長(zhǎng),這是一般人所注意不到的,即使書上也不講這個(gè)問題,太長(zhǎng)的消化時(shí)間會(huì)讓細(xì)胞復(fù)蘇時(shí)失去貼壁能力,表現(xiàn)為先貼后死,原因是在你復(fù)蘇的時(shí)候細(xì)胞已進(jìn)入凋亡程序,不可逆轉(zhuǎn)的死亡。2、你的凍存液好不好,是什么,甘油還是DMSO,質(zhì)量非常重要,否則也會(huì)死亡。3、你的凍存液的量加的是不是太多,ATCC推薦是不超過7%,大于5%,太多也不好。4、你在凍存的時(shí)候是不是把DMSO混均勻,這個(gè)有一些影響,但不算太大。5、你的凍存是否按部就班,就是所溫度梯度是不是把握嚴(yán)格,很多人容易忘卻這個(gè)事情,因?yàn)檫@個(gè)東西流程長(zhǎng)。6、如果你細(xì)胞污染,你是否能很快看到,我比我的導(dǎo)師能早一天看到污染。從這個(gè)角度講建議去除離心這步。7、你的細(xì)胞在凍存前是否過密。還有,不贊成孵箱污染這個(gè)概念的,所有在一個(gè)孵箱里的細(xì)胞都污染一個(gè)細(xì)菌的話,這個(gè)細(xì)菌是源于孵箱的,但這不代表孵箱污染,因?yàn)榉跸錈o論你如何處理都有大量的細(xì)菌,問題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找,以后就不犯同樣的問題,這個(gè)很重要,不能靠猜,否則你就有可能細(xì)胞養(yǎng)絕最后換課題,這個(gè)見得太多了,別不當(dāng)會(huì)事。 Hep2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-660細(xì)胞、hFOB1.19細(xì)胞、LICR-LON-HN6-R細(xì)胞 GM04680細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PL11細(xì)胞、KYSE270細(xì)胞、WSU-HN13細(xì)胞 Colo205細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KBM-7細(xì)胞、RAG細(xì)胞、MHCC 97細(xì)胞 細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁 COV434 epithelioid cells人卵巢顆粒腫瘤細(xì)胞系 細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細(xì)胞復(fù)蘇基本方法:1.從液氮罐中取出安剖;有時(shí)因安剖未封嚴(yán),浸入了液氮,取出后因安剖內(nèi)液氮迅速氣化而發(fā)生爆炸,因此應(yīng)帶有防護(hù)眼睛和手套。2.迅速放入盛有36℃~37℃水的搪瓷罐中,扣上蓋并不時(shí)搖動(dòng),盡快解凍。3.剪開紗布口袋,取出安剖,用70%酒精擦拭消毒后,凈化臺(tái)上打開蓋,用吸管吸出細(xì)胞懸液,裝入離心管中,再補(bǔ)加10ml培養(yǎng)液,吹打使細(xì)胞懸浮。4.低速離心(500~1000轉(zhuǎn)/分)5分鐘,取上清后再重復(fù)用培養(yǎng)液漂洗、離心。5.加入培養(yǎng)液適當(dāng)稀釋后,再移裝入培養(yǎng)瓶中,置溫箱培養(yǎng),次日更換一次培養(yǎng)液后再繼續(xù)培養(yǎng)。收到T25 flask細(xì)胞時(shí),處理方式為:在寄送過程中,為避免起泡造成細(xì)胞脫落死亡,T25 flask均加滿培養(yǎng)基。請(qǐng)檢查flask外觀,并于顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀況和有無污染現(xiàn)象,若有任何問題,不要打開蓋子,請(qǐng)立即通知細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室。將原封之T25 flask靜置于37°C,5%CO2培養(yǎng)箱中,使細(xì)胞回溫至37°C,并讓運(yùn)送過程中少數(shù)脫落的細(xì)胞可再附著生長(zhǎng)。隔天后,于無菌操作箱內(nèi)取出flask內(nèi)之培養(yǎng)基(取出之培養(yǎng)基可以再使用),僅留約5-10ml培養(yǎng)基于flask內(nèi),依一般培養(yǎng)方式再將細(xì)胞置入培養(yǎng)箱中,或細(xì)胞已長(zhǎng)滿盤,則將細(xì)胞做傳代培養(yǎng)。 細(xì)胞傳代方法:1:2傳代 ketr 3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HTSMC細(xì)胞、Granta-519細(xì)胞、OVCAR 4細(xì)胞 A2780CP70細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3 NS1 Ag4/1細(xì)胞、THLE2細(xì)胞、B16 melanoma細(xì)胞 SUM-52PE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM01232E細(xì)胞、LLC-PK1細(xì)胞、U-226AR1細(xì)胞 3-LL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD 966 SK細(xì)胞、SRS-82細(xì)胞、SW-954細(xì)胞 SU.86細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TCam-2細(xì)胞、IGROV1細(xì)胞、HPAF-I細(xì)胞 細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系 COV434 epithelioid cells人卵巢顆粒腫瘤細(xì)胞系 細(xì)胞生長(zhǎng)特性:貼壁生長(zhǎng) 細(xì)胞形態(tài)特性:上皮細(xì)胞 細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中常見問題總結(jié):1)一般客戶拿到細(xì)胞后,應(yīng)該注意什么?客戶收到細(xì)胞后先不開蓋,放在培養(yǎng)箱靜置若干小時(shí)后(看細(xì)胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況,并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議受收細(xì)胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,顯微鏡下拍細(xì)胞100X,200X各一張),排除細(xì)胞本身污染的情況;收到細(xì)胞未開封,出現(xiàn)污染狀況我們負(fù)責(zé)免費(fèi)發(fā)送一株細(xì)胞。收到細(xì)胞時(shí)如無異常情況,請(qǐng)?jiān)陲@微鏡下觀察細(xì)胞密度,如為貼壁細(xì)胞,未超過80%匯合度時(shí),將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出,留下10ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng);超過80%匯合度時(shí),請(qǐng)按細(xì)胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細(xì)胞,吸出培養(yǎng)液、1000轉(zhuǎn)/分鐘離心2分鐘,吸出上清,管底細(xì)胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細(xì)胞后移回培養(yǎng)瓶。細(xì)胞消化液建議使用PBS配制,慎用Hanks液配制;2)快遞細(xì)胞多久能到,是寄凍存的細(xì)胞還是復(fù)蘇好的細(xì)胞?我們采用快遞發(fā)貨,一般外地2--3天,寄細(xì)胞前請(qǐng)確認(rèn)當(dāng)?shù)販囟?,如果氣溫低于4度的,則采用郵寄凍存細(xì)胞;3)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基?不能。每一細(xì)胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細(xì)胞培養(yǎng)基,若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基,細(xì)胞大都無法立即適應(yīng),造成細(xì)胞無法存活;4)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類?不能。血清是細(xì)胞培養(yǎng)上一個(gè)極為重要的營(yíng)養(yǎng)來源,所以血清的種類和品質(zhì)對(duì)于細(xì)胞的生長(zhǎng)會(huì)產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清,在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同,血清使用錯(cuò)誤常會(huì)造成細(xì)胞無法存活。 BAR-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK-293F細(xì)胞、H22-H8D8細(xì)胞、CWR-22rv1細(xì)胞 Bac 1.2F5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:130-T細(xì)胞、K422細(xì)胞、NTERA-2cl.D1細(xì)胞 Strain L-929細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LED-WiDr細(xì)胞、H1915細(xì)胞、MT-4細(xì)胞 LAD 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GC-1細(xì)胞、SN4741細(xì)胞、Hs 746T細(xì)胞 NCIH2170細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Karpas-422細(xì)胞、Roswell Park Memorial Institute 8226細(xì)胞、OCILY7細(xì)胞 HuH 6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UACC812細(xì)胞、OE19細(xì)胞、NCI-SNU-601細(xì)胞 A375S2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1341細(xì)胞、PANC 1005細(xì)胞、PNT1-a細(xì)胞 CEM/0細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1734細(xì)胞、GM01232E細(xì)胞、NTera-2D1細(xì)胞 3T3-L1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NS1-Ag 4/1細(xì)胞、LTEP-a2細(xì)胞、CCD1112Sk細(xì)胞 HCC1500細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OEC33細(xì)胞、HTR-8/SV neo細(xì)胞、H1417細(xì)胞 COV434 epithelioid cells人卵巢顆粒腫瘤細(xì)胞系 SCC4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO 201細(xì)胞、SMA 560細(xì)胞、Pt K2細(xì)胞 NW-MEL-38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LL/2(LLc1)細(xì)胞、D324 Med細(xì)胞、NCIH1944細(xì)胞 P-815細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3-X63-Ag8細(xì)胞、Human fetal lung fibroblast 1細(xì)胞、Panc-327細(xì)胞 BNL.CL2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TFK-1細(xì)胞、MA-104細(xì)胞、NCIH244細(xì)胞 SK ES 01細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MKN45細(xì)胞、PSN-1細(xì)胞、NCI-H1385細(xì)胞 Neuro 2a細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A10細(xì)胞、HCC-95細(xì)胞、OLN 93細(xì)胞 Neuro 2a細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A10細(xì)胞、HCC-95細(xì)胞、OLN 93細(xì)胞 HCC-70細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Swiss/3T3細(xì)胞、HBL100細(xì)胞、C8D1A細(xì)胞 GM04679細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK-2細(xì)胞、CO115細(xì)胞、SK-RC-42細(xì)胞 MDA-MB-157細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A 172細(xì)胞、KGN細(xì)胞、LOUNH91細(xì)胞 MALME.3M細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3J細(xì)胞、TALL-1 [Human adult T-ALL]細(xì)胞、SP-2細(xì)胞 A-2058細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-2-OS細(xì)胞、MC-3T3細(xì)胞、PK15細(xì)胞 CWR22-Rv1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3-X63-Ag8-6-5-3細(xì)胞、Hs822T細(xì)胞、Panc203細(xì)胞 MSC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CALU1細(xì)胞、GT38細(xì)胞、ARPE-19細(xì)胞 GH3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UPCI-SCC090細(xì)胞、HCT15細(xì)胞、293T細(xì)胞 PTK 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Medical Research Council cell strain-9細(xì)胞、SKRC-42細(xì)胞、SHI-1細(xì)胞 Nb2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C-4I細(xì)胞、C32-mel細(xì)胞、U-251MG細(xì)胞 GP-293細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mo7e細(xì)胞、NCI-522細(xì)胞、LCMS細(xì)胞 AMC-HN-8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BEL7405細(xì)胞、HMSC細(xì)胞、SKMES-1細(xì)胞 COR-L88細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FLC-7細(xì)胞、JCA1細(xì)胞、H-1385細(xì)胞 HCC1569細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC57細(xì)胞、UPCI-SCC-154細(xì)胞、SU86-86細(xì)胞 H-1666細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-AML-2細(xì)胞、BE(2)M-17細(xì)胞、HCC1428細(xì)胞 B16-F0細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs737T細(xì)胞、AK細(xì)胞、HOEC細(xì)胞 SW579細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human ErythroLeukemia細(xì)胞、HS766T細(xì)胞、Ej138細(xì)胞 TM3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HRCEC細(xì)胞、NS653細(xì)胞、HSC-1細(xì)胞 beta-TC6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BCPAP細(xì)胞、TE3細(xì)胞、Normal Rat Kidney-52E細(xì)胞 CRFK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TCC-PAN2細(xì)胞、JVM3細(xì)胞、NCI.H522細(xì)胞 526細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-RC-52細(xì)胞、LUDLU-1細(xì)胞、H548細(xì)胞 NTC-200細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc-05.04細(xì)胞、MDAMB-231細(xì)胞、K7M2 wt細(xì)胞 Med 341細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:373MG細(xì)胞、HG2855細(xì)胞、U-87 MG細(xì)胞 CWR22R細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EAhy926細(xì)胞、A72細(xì)胞、SK_N_BE2C細(xì)胞 H2085細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Epstein-Barr-1細(xì)胞、MC3T3, E1 subgroup-4 clone細(xì)胞、H1618細(xì)胞 WIL2 S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OSKM-1細(xì)胞、SW-1222細(xì)胞、HCC-2218細(xì)胞 CCD-1112sk細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Renal Carcinoma細(xì)胞、Vertebral Cancer of the Prostate細(xì)胞、H727細(xì)胞 U266BL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HP615細(xì)胞、RMG1細(xì)胞、NOZ細(xì)胞 H1666_DA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RK13細(xì)胞、NCI-SNU-387細(xì)胞、ARO細(xì)胞 TE-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Leydig細(xì)胞、KU1919細(xì)胞、T.T細(xì)胞 H-125細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U937細(xì)胞、MV4II細(xì)胞、P388細(xì)胞 MOLM16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:16-HBE14o細(xì)胞、CEM-CCRF細(xì)胞、HSF細(xì)胞 KE 37細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SU-DHL-4細(xì)胞、NCI-H747細(xì)胞、KP-N-RT細(xì)胞 SACCLM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK 293細(xì)胞、HCT/Taxo1細(xì)胞、Det. 562細(xì)胞 NCI-HUT-596細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:675T細(xì)胞、A 253細(xì)胞、CWR22Rv1細(xì)胞 MDA2B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WC00079細(xì)胞、LC1/Sq細(xì)胞、NCTC clone 1469細(xì)胞 MV4:11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P30OHK細(xì)胞、K1細(xì)胞、BXPC3細(xì)胞 Panc-08.13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C4-I細(xì)胞、Normal Rat, August 3, 1983細(xì)胞、MCF 7細(xì)胞 SKMEL28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc 05.04細(xì)胞、Pt K1細(xì)胞、PC3M-1E8細(xì)胞 U-CH1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL33細(xì)胞、Rin-M-5F細(xì)胞、CT26WT細(xì)胞 HSC-I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H69細(xì)胞、Co 205細(xì)胞、HKC細(xì)胞 Jiyoye細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ABC-1細(xì)胞、LNCaP C4-2細(xì)胞、3AO細(xì)胞 Biopsy xenograft of Pancreatic Carcinoma line-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FU-97細(xì)胞、OCM-1細(xì)胞、WM-451Lu細(xì)胞 Detroit-562細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:T98細(xì)胞、H-35 Reuber細(xì)胞、QGP-1細(xì)胞 COV434 epithelioid cells人卵巢顆粒腫瘤細(xì)胞系 A-431細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RL95-2細(xì)胞、Raji細(xì)胞、SKBR-3細(xì)胞 CaSki細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSF2細(xì)胞、WILL-2細(xì)胞、H-650細(xì)胞 U-87 MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LAC細(xì)胞、RMS 1598細(xì)胞、SU-DHL-2細(xì)胞 Strain L-929細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LED-WiDr細(xì)胞、SCL1細(xì)胞、TR 146細(xì)胞 "
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