"Reh Cell:人急性非B非T淋巴細胞性白血病細胞系
細胞形態(tài):淋巴母細胞樣
細胞生長:懸浮
細胞背景資料:詳見相關(guān)文獻介紹
CRFK細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TCC-PAN2細胞、JVM3細胞、NCI.H522細胞
PNT1A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPE-1細胞、HCCLM6細胞、HLEC-SRA 01/04細胞
3T3-F442A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:rRTEC細胞、SK-LU-1細胞、Panc 05.04細胞
SNU-251細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NSC-34細胞、751-NA-15細胞、CPA 47細胞
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
Reh Cell:人急性非B非T淋巴細胞性白血病細胞系
因為細胞生長的時候肯定是要相互聯(lián)系,大部分的細胞都是要成片生長的,尤其是對于貼壁細胞,單個細胞貼壁之后長著長著就長到一片去了。但是如果是成片的細胞抱團的話,傳代后細胞是不能貼壁的,這樣抱團的細胞就會死亡。所以,消化傳代的時候一定要將細胞消化成單個單個的獨立狀態(tài),這個啊是非??季磕愕墓Ψ虻?!細胞一旦脫落入懸液里你很難再將他吹打成單個,因為他沒有受力點了。很難找到受力點讓你對他吹打的力分散開細胞。所以必須要在細胞未脫落之前將其吹打開,受力點就是細胞貼壁的地方。這樣你就必須要嚴格控制好消化的程度啊,這和大師做飯掌握好火候是一樣的道理啊。既要消化到容易吹打下來,又不能太過,一吹就整片脫落,要單個單個地往下掉。所以我才要分批分次地加胰酶消化就是為了保證不同生長狀態(tài)貼壁程度的細胞能夠都維持在好的受力點分散開。這個是很重要的一點。尤其是對于某些細胞這一點就是他活去死的致命點。像Caco-2細胞就是如此。另外關(guān)于傳代很重要一點就是一定不能等到細胞長滿的時候才去消化傳代。要在細胞長到70%左右的時候就要傳代了,一旦發(fā)現(xiàn)細胞生長中已經(jīng)有疊層生長的時候就要立即進行消化傳代。不能再拖了。關(guān)于換液傳代時候洗瓶的問題。對于用DMEM培養(yǎng)基培養(yǎng)的細胞,你在洗的時候如果是用無血清1640去洗細胞在隨即后的幾次中會比用DMEM洗的長的要好。同樣,用1640培養(yǎng)的也有這個現(xiàn)象。如果不嫌麻煩的話,可以用PBS來洗,洗的效果和用無血清培養(yǎng)基洗的效果基本上是一樣的,對于有些細胞會更勝一籌。洗的目的主要是洗去培養(yǎng)瓶里殘留的血清,防止它對胰酶的影響。這樣能夠保證胰酶的消化能力優(yōu)先,是很關(guān)鍵的一點。先補充這么多,還會后續(xù)更新。再補充一點:傳代時PBS洗是很重要的一步,最近發(fā)現(xiàn),用PBS就可以把細胞消化開來。加入PBS放置10-15分鐘,有些需要更長的時間,等到細胞一個個分離開來的時候,就可以直接吹打下來,但是和胰酶消化一樣,要控制好時間,不能時間太過了,要不然損傷細胞,細胞不容易成活,狀態(tài)容易不好。這個方法對于某些細胞是很管用的。有些細胞用胰酶消化不容易消化成單個的時候,或者臨時沒有胰酶了,可以選用此方法。不過一定要試試,看是否適合你的細胞。
細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:1:2傳代。3天內(nèi)可長滿。
培養(yǎng)細胞真的不難,最關(guān)鍵幾點:1)所有的東西使用,如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進口的,真的很難相信你會把細胞養(yǎng)壞;2)動作要快,胰酶消化,換液什么,細胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外,要掌握好胰酶消化時間,所謂的細胞狀態(tài)差,很多時候是傳代的原因;3)有時間的話,需要細胞計數(shù),傳相應數(shù)目的細胞到培養(yǎng)皿中,可以大致清楚細胞的生長曲線,不會臨時要處理,手足無措;4)要做什么心里要非常清楚,合理安排時間,傳代細胞的實驗穿插進行,可以節(jié)省很多時間,也不會耽誤別人的實驗;5)個人的實驗器具自己收一套,不要和別人混用,最近換了什么新的東西稍微記一下,試劑一旦懷疑污染,馬上丟;6)傳代細胞不能進去太多人,避免相互干擾。每天對待細胞比孝敬爹媽還用心,那真是捧在手里怕碎了,含在嘴里怕化了,看在眼里怕丟了,培養(yǎng)細胞時有哪些經(jīng)驗教訓可以分享呢?1)嚴格無菌操作,多噴噴酒精,要是對滅菌的東西不放心,自己包自己送自己烘干;2)不要和別人共用試劑耗材,自己準備一套;3)有可能的話在拿到新細胞的時候做好支原體衣原體檢測;4)水浴鍋很臟,生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟,勤換(滅菌水加進去);5)晚上離開的時候給傳代細胞照紫外,超凈臺是用完就開;6)是同一時間就你一個人在用傳代細胞在養(yǎng)細胞。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
SHI1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RAG細胞、U266 Bl細胞、LIM1215細胞
H-1770細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RSC 96細胞、Fetal Human Lens-124細胞、PLC/PRF/5細胞
Kit225/K6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:J111細胞、GM00215細胞、OCI-AML4細胞
HConEpic細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Vero 76 clone E-6細胞、KP-N-RT細胞、NCIH929細胞
C3H/10T1/2-clone8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MSF細胞、SW-962細胞、NSC-34細胞
細胞生長特性:懸浮生長
Reh Cell:人急性非B非T淋巴細胞性白血病細胞系
細胞復蘇相關(guān)注意事項:1.取細胞的過程中注意帶好防凍手套,護目鏡。此項尤為重要,細胞凍存管可能漏入液氮,解凍時凍存管中的氣溫急劇上升,可導致爆炸。2.凍存液的問題:凍存液的配置已是常識,在這里不作詳述,但二甲基亞砜(DMSO )對細胞不是完全無毒副作用,在常溫下,二甲基亞砜對細胞的毒副作較大,因此,必須在1-2min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復蘇溫度太慢,會造成細胞的損傷,二甲基亞砜(DMSO)選擇進口產(chǎn)品。3.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細胞解凍后二甲基亞砜濃度較高,注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度,以減少對細胞的損傷。4.離心問題:目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng),第二天換液。因為離心的目的是兩個,去除DMSO,去除死細胞,這個是標準流程,但對一般人來說,把握不好離心轉(zhuǎn)速和時間,轉(zhuǎn)的不夠活細胞沉底的少,細胞就全被扔掉了,轉(zhuǎn)過了活細胞會受壓過大,死亡。此外在操作過程中容易污染,所以不推薦。另一種說法為細胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO),DMSO對細胞有一定的毒副作用,所以須將離心后的液體前倒凈,且一定倒干凈。我在試驗中按照常規(guī)的離心分裝的方法進行復蘇,結(jié)果無異常。5.細胞貼壁少的問題:教科書中說明凍存細胞解凍時1ml細胞液要加10ml-15ml培養(yǎng)液,而在我的試驗中的經(jīng)驗總結(jié)為培養(yǎng)基越少細胞越容易貼附。6.復蘇細胞分裝的問題:試驗中我的經(jīng)驗總結(jié)為復蘇1管細胞一般可分裝到1-2只培養(yǎng)瓶中,分裝過多,細胞濃度過低,不利于細胞的貼壁。7.加培養(yǎng)基的量放入問題:這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度,從如果你加培養(yǎng)基的太少,那么DMSO的濃度就會比較大,就會影響細胞生長,從以前的資料來看,DMSO的濃度在小于0.5%的時候?qū)σ话慵毎麤]有什么影響,還有一個說法是1%。所以如果你的凍存液的濃度是10%DMSO的話那么加10ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
細胞形態(tài)特性:淋巴母細胞
NS1-1 Ag4.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1238細胞、PANC1005細胞、EB3 [Human Burkitt lymphoma]細胞
OKT3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TNC-1B12B4細胞、Experimental Mammary Tumour-6細胞、343 MG細胞
Jurkat E6.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1869細胞、H2291細胞、NCI522細胞
KASUMI1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:9L細胞、Tca-8113細胞、NCI-H295R細胞
HepG2/C3A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM-102PT細胞、HUCCT1細胞、LS411細胞
L-6 myoblast細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P30-OHKUBO細胞、SKCO-1細胞、TALL-104細胞
T47-D細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L 1210細胞、EFM-19細胞、CAL 33細胞
Reh Cell:人急性非B非T淋巴細胞性白血病細胞系
BJ [Human fibroblast]細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2591細胞、PGBE1細胞、JCA-1細胞
H1666細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 888.Lu細胞、H-2122細胞、LA795細胞
A 172細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A427細胞、BEAS2B細胞、Tissue Culture-1細胞
CEM-CCRF細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PLC-8024細胞、A7r5細胞、COLO 320HSR細胞
HSC3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc3_27細胞、NCI-H498細胞、HuTu-80細胞
HSAS1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:hEM15A細胞、NSH細胞、rHSC-99細胞
NCI-H2347細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KATO III細胞、32D/cl3細胞、KAT-5細胞
MonoMac6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DMS53細胞、SUM190細胞、NCI-H810細胞
H-2228細胞系相關(guān)產(chǎn)品:VB細胞、KE-39細胞、KP-N-RT-BM細胞
H-2228細胞系相關(guān)產(chǎn)品:VB細胞、KE-39細胞、KP-N-RT-BM細胞
Kit 225-K6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:3T3-F442A細胞、PIEC細胞、SK-MEL-3細胞
SJRH-30細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC3T3-E1 Subclone 14細胞、746T細胞、SuDHL 4細胞
LC2/Ad細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RCM1細胞、McG-1細胞、Hep II細胞
GM3190細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RS4-11細胞、C17.2細胞、Hep 3B2.1-7細胞
UM-UC3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEC1A細胞、H1299細胞、HD-LM-2細胞
GFP-Olig2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:hTERT-RPE細胞、AML 12細胞、NCIH1618細胞
NCI-H1184細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H748細胞、L363細胞、Hs 870.T細胞
Tu212細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FOX-NY細胞、RT4P細胞、H-1436細胞
NPA87-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM 52PE細胞、Y3細胞、HT 1376細胞
AR-42J細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCC4細胞、RAEC細胞、RCC_7860細胞
PL9細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Centre Antoine Lacassagne-78細胞、CAKI1細胞、MDA-MB-231-GFP細胞
JB-6 Cl 30細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-343 MG細胞、EC-109細胞、V79細胞
P815細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKMEL2細胞、NPA'87細胞、hFOB 1.19細胞
SUDHL-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MX-1細胞、NCI-H929細胞、SKml2細胞
H-226細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RSC96細胞、CAL 62細胞、NCI-H28細胞
HeLaS3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KP-N-RT-BM細胞、HCC0202細胞、AC29細胞
H-2107細胞系相關(guān)產(chǎn)品:rUCMSCs細胞、HDQP1細胞、H-1688細胞
A9(Hamprecht)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCC-15細胞、HCC-1359細胞、PC-14細胞
P3J HR1-K細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-101D細胞、HCC1008細胞、NCIH1563細胞
CHP212細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CTV1細胞、T-98細胞、Farage Original Line細胞
Eca 109細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HO8910/PM細胞、PC 12細胞、SNU869細胞
COLO-320-HSR細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCA 433細胞、TERT-RPE1細胞、RPTEC/TERT1細胞
BC-028細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FHC細胞、H446細胞、IAR20細胞
PC3M-IE8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NWA細胞、SW-1417細胞、X63.Ag8.653細胞
NCI-H2066細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc_08_13細胞、Hs606T細胞、3T3細胞
I90細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MES 13細胞、SW1463細胞、INS-1細胞
HT 144細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CNE1-LUC細胞、UMC-11細胞、PC-9細胞
LC-1-sq細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RH35細胞、P30OHK細胞、Panc_03_27細胞
HSC-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC3M-2B4細胞、OVCAR.8細胞、Ca Ski細胞
SNU-C1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NGP細胞、GLAG-66細胞、Ly7細胞
DMS-53細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPDEC細胞、Hs 695.T細胞、HL-7702細胞
CAL12T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L6細胞、SEG1細胞、NCI H747細胞
KM12 SM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Madin Darby Bovine Kidney細胞、SCH細胞、GAK細胞
Reh Cell:人急性非B非T淋巴細胞性白血病細胞系
UM-UC3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEC1A細胞、H1299細胞、HD-LM-2細胞
WSU-DLCL(2)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDCK細胞、V 79-4細胞、HCV 29細胞
624mel細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO206細胞、K-562細胞、HUT-28細胞
Hs934T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Kit-225-K6細胞、hRPTC細胞、HEK293F細胞
U118MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2141細胞、TCCSUP細胞、SNU-878細胞
RPMI-7951細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HDQP1細胞、SBC-3細胞、TC-1 [Mouse lung]細胞
HCT 116細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1694細胞、MOLT-16細胞、Metastatic Variant-522細胞
HONE1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T2 (174 x CEM.T2)細胞、TR-146細胞、Rin-M-5F細胞
WM 115細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FU-OV-1細胞、N-2a細胞、BT325細胞
NCIH520細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUDHL-16細胞、A 172細胞、DC2.4細胞
H125細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MOLM16細胞、LLC-WRC 256細胞、RPPVEC細胞
Calu-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GTL-16細胞、HMy2.CIR細胞、OCUM-1細胞
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