"P388 Cell:小鼠白血病細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài):淋巴母細(xì)胞樣
細(xì)胞生長:懸浮
細(xì)胞背景資料:詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
T/G HA VSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:10T1/2細(xì)胞、AsPC-1細(xì)胞、HARAB細(xì)胞
VCaP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs274T細(xì)胞、LNCaP-C4-2細(xì)胞、SKOV-3細(xì)胞
Hs675細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1755細(xì)胞、Calf Pulmonary Artery 47細(xì)胞、Panc 1細(xì)胞
SN12PM6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO679細(xì)胞、HeLa細(xì)胞、KYSE180細(xì)胞
細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
P388 Cell:小鼠白血病細(xì)胞系
細(xì)胞傳代時(shí)消化的問題:可以這樣說,對(duì)于需要消化傳代的細(xì)胞,每一次的消化都是對(duì)這個(gè)細(xì)胞存活與否,狀態(tài)好與不好最至關(guān)重要的考驗(yàn)。很多同學(xué)都遇到過這個(gè)問題,自己養(yǎng)的細(xì)胞開始的幾代長的還挺好的,可是穿過幾代之后就發(fā)現(xiàn)自己的細(xì)胞,狀態(tài)越來越差勁了。對(duì)于這個(gè)問題,可以非??隙ǖ卣f,你的消化環(huán)節(jié)出問題了。你每一次的消化都讓細(xì)胞受到較大損傷了。所以,越長越差。在消化的過程中,你加入胰酶后,所有細(xì)胞都在被胰酶消化著,但是我們忽視了一個(gè)問題就是,細(xì)胞的生長狀態(tài)是不一樣的,每一個(gè)細(xì)胞的貼壁情況也是不一樣的,有的貼壁牢固,有的貼壁沒有那么牢固的,所以,讓所有的細(xì)胞消化同樣的時(shí)間對(duì)細(xì)胞是不公平的,他們受到了差別待遇當(dāng)然會(huì)有脾氣啊。我后來對(duì)消化的方法進(jìn)行了改良。爭(zhēng)取做到因材施教呵呵。我稱之為“四步消化法”。(以難消化細(xì)胞為例);具體操作:1)首先不加胰酶,倒掉舊培養(yǎng)基加入少量新培養(yǎng)基洗1-2遍,(這是前奏,即為步,目的是將漂浮著的死細(xì)胞之類盡量洗掉。2)然后再加入少量新培養(yǎng)基直接吹打一遍,這一遍是把貼壁不牢固的細(xì)胞吹打下來。再用培養(yǎng)基洗一遍,兩次所得懸液混合傳入新瓶。即為第二步(你可以將這些傳入新瓶培養(yǎng),以與后面胰酶消化過的細(xì)胞對(duì)比觀察看誰長的更好一點(diǎn)就知道該細(xì)胞對(duì)胰酶的敏感度了。)3)吸干凈瓶內(nèi)剩余液體,加入0.3ml左右的胰酶潤洗一遍,吸掉棄之,再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同時(shí)置于顯微鏡下觀察,待細(xì)胞與細(xì)胞之間間隙明顯的時(shí)候立即吸掉胰酶與干凈子彈頭里備用,加入新培養(yǎng)基開始吹打,吹打2-3遍后吸取懸液于試管或新瓶暫存。用2ml左右新培養(yǎng)基洗一遍與前面的混合。(你也可以傳入新瓶培養(yǎng),以與后面及前面的做對(duì)比。)這是第三步。4)然后把前面剛吸出來的胰酶重新加進(jìn)去瓶里繼續(xù)消化剩余的貼壁牢固的細(xì)胞。當(dāng)然你也可以用新的胰酶,如果你們那比較富裕的話,呵呵。繼續(xù)鏡下觀察,待剩余細(xì)胞間隙明顯,細(xì)胞獨(dú)立開來的時(shí)候,吸掉胰酶,加入新培養(yǎng)基吹打。懸液傳入新瓶培養(yǎng)(根據(jù)實(shí)際情況你自己把握)。這是第四步。其實(shí)還可以有第五步,對(duì)于特別難消化的細(xì)胞和對(duì)胰酶特別敏感的細(xì)胞的話,你可以繼續(xù)加第五步甚至第六步。為了細(xì)胞更好的狀態(tài),更漂亮的樣子,沒辦法,你必須分多批多次消化,這樣才能限度地將胰酶對(duì)細(xì)胞的損傷降到最低,保證細(xì)胞的狀態(tài)能夠。當(dāng)然了,如果細(xì)胞是屬于那種很容易消化的細(xì)胞,像RAW264.7,僅僅第二步就搞定了。就沒必要第三步第四步了。這個(gè)是需要你在實(shí)驗(yàn)中能夠自己用心去體會(huì)的。建議你接受一個(gè)新細(xì)胞時(shí)把各步消化的細(xì)胞分別培養(yǎng)起來做比較,去摸索好細(xì)胞對(duì)胰酶的要求。便于你后續(xù)實(shí)驗(yàn)的開展。將細(xì)胞消化分成這幾步,除了是為了避免胰酶對(duì)細(xì)胞的損傷之外,還有一個(gè)更重要的作用就是,可以程度地把細(xì)胞吹打成單個(gè)單個(gè)的狀態(tài),不成片不連體。
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法:1:2傳代
培養(yǎng)細(xì)胞真的不難,最關(guān)鍵幾點(diǎn):1)所有的東西使用,如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進(jìn)口的,真的很難相信你會(huì)把細(xì)胞養(yǎng)壞;2)動(dòng)作要快,胰酶消化,換液什么,細(xì)胞暴露在空氣中的時(shí)間越少越好。另外,要掌握好胰酶消化時(shí)間,所謂的細(xì)胞狀態(tài)差,很多時(shí)候是傳代的原因;3)有時(shí)間的話,需要細(xì)胞計(jì)數(shù),傳相應(yīng)數(shù)目的細(xì)胞到培養(yǎng)皿中,可以大致清楚細(xì)胞的生長曲線,不會(huì)臨時(shí)要處理,手足無措;4)要做什么心里要非常清楚,合理安排時(shí)間,傳代細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)穿插進(jìn)行,可以節(jié)省很多時(shí)間,也不會(huì)耽誤別人的實(shí)驗(yàn);5)個(gè)人的實(shí)驗(yàn)器具自己收一套,不要和別人混用,最近換了什么新的東西稍微記一下,試劑一旦懷疑污染,馬上丟;6)傳代細(xì)胞不能進(jìn)去太多人,避免相互干擾。每天對(duì)待細(xì)胞比孝敬爹媽還用心,那真是捧在手里怕碎了,含在嘴里怕化了,看在眼里怕丟了,培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)有哪些經(jīng)驗(yàn)教訓(xùn)可以分享呢?1)嚴(yán)格無菌操作,多噴噴酒精,要是對(duì)滅菌的東西不放心,自己包自己送自己烘干;2)不要和別人共用試劑耗材,自己準(zhǔn)備一套;3)有可能的話在拿到新細(xì)胞的時(shí)候做好支原體衣原體檢測(cè);4)水浴鍋很臟,生化培養(yǎng)箱要是得手動(dòng)加濕的話盤里的水也會(huì)很臟,勤換(滅菌水加進(jìn)去);5)晚上離開的時(shí)候給傳代細(xì)胞照紫外,超凈臺(tái)是用完就開;6)是同一時(shí)間就你一個(gè)人在用傳代細(xì)胞在養(yǎng)細(xì)胞。
細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
COLO 16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EFM192C細(xì)胞、MSTO-211H細(xì)胞、MES23.5細(xì)胞
16-HBEo細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Normal Rat Kidney-49F細(xì)胞、OSC-19細(xì)胞、NCIH1915細(xì)胞
NIE 115細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:B16-F10-BL6細(xì)胞、Bac1 2F5細(xì)胞、NCIH1395細(xì)胞
MSTO211H細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NFS-60細(xì)胞、SUM-159PT細(xì)胞、CATH-a細(xì)胞
UM-UC3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEC1A細(xì)胞、H1299細(xì)胞、HD-LM-2細(xì)胞
細(xì)胞生長特性:貼壁生長
P388 Cell:小鼠白血病細(xì)胞系
細(xì)胞復(fù)蘇相關(guān)注意事項(xiàng):1.取細(xì)胞的過程中注意帶好防凍手套,護(hù)目鏡。此項(xiàng)尤為重要,細(xì)胞凍存管可能漏入液氮,解凍時(shí)凍存管中的氣溫急劇上升,可導(dǎo)致爆炸。2.凍存液的問題:凍存液的配置已是常識(shí),在這里不作詳述,但二甲基亞砜(DMSO )對(duì)細(xì)胞不是完全無毒副作用,在常溫下,二甲基亞砜對(duì)細(xì)胞的毒副作較大,因此,必須在1-2min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復(fù)蘇溫度太慢,會(huì)造成細(xì)胞的損傷,二甲基亞砜(DMSO)選擇進(jìn)口產(chǎn)品。3.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細(xì)胞解凍后二甲基亞砜濃度較高,注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度,以減少對(duì)細(xì)胞的損傷。4.離心問題:目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細(xì)胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進(jìn)行培養(yǎng),第二天換液。因?yàn)殡x心的目的是兩個(gè),去除DMSO,去除死細(xì)胞,這個(gè)是標(biāo)準(zhǔn)流程,但對(duì)一般人來說,把握不好離心轉(zhuǎn)速和時(shí)間,轉(zhuǎn)的不夠活細(xì)胞沉底的少,細(xì)胞就全被扔掉了,轉(zhuǎn)過了活細(xì)胞會(huì)受壓過大,死亡。此外在操作過程中容易污染,所以不推薦。另一種說法為細(xì)胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO),DMSO對(duì)細(xì)胞有一定的毒副作用,所以須將離心后的液體前倒凈,且一定倒干凈。我在試驗(yàn)中按照常規(guī)的離心分裝的方法進(jìn)行復(fù)蘇,結(jié)果無異常。5.細(xì)胞貼壁少的問題:教科書中說明凍存細(xì)胞解凍時(shí)1ml細(xì)胞液要加10ml-15ml培養(yǎng)液,而在我的試驗(yàn)中的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)為培養(yǎng)基越少細(xì)胞越容易貼附。6.復(fù)蘇細(xì)胞分裝的問題:試驗(yàn)中我的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)為復(fù)蘇1管細(xì)胞一般可分裝到1-2只培養(yǎng)瓶中,分裝過多,細(xì)胞濃度過低,不利于細(xì)胞的貼壁。7.加培養(yǎng)基的量放入問題:這個(gè)量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度,從如果你加培養(yǎng)基的太少,那么DMSO的濃度就會(huì)比較大,就會(huì)影響細(xì)胞生長,從以前的資料來看,DMSO的濃度在小于0.5%的時(shí)候?qū)σ话慵?xì)胞沒有什么影響,還有一個(gè)說法是1%。所以如果你的凍存液的濃度是10%DMSO的話那么加10ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書
SNU-407細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-44細(xì)胞、SK UT 1細(xì)胞、TE-1細(xì)胞
NU-GC-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-460細(xì)胞、Human Melanoma Cell Bowes細(xì)胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-10細(xì)胞
Jurkat77細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCEC細(xì)胞、P3.times.63 Ag8.653細(xì)胞、H766T細(xì)胞
16HBE140細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-SNU-475細(xì)胞、LCLC-103H細(xì)胞、BTI-TN5B1-4細(xì)胞
NCI-SNU-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HRMC細(xì)胞、RIN-14B細(xì)胞、THC-8307細(xì)胞
M1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:VM-CUB-1細(xì)胞、COLO-320細(xì)胞、MDA-MB-435S細(xì)胞
FLC-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:B16 F10細(xì)胞、B95-8細(xì)胞、Menschliche Und Tierische Zellkulture-1細(xì)胞
P388 Cell:小鼠白血病細(xì)胞系
HFT 8810細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL-85-1細(xì)胞、MPC 11細(xì)胞、HEC-151細(xì)胞
SK-RC-52細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SC細(xì)胞、H4IIE細(xì)胞、HT 1080.T細(xì)胞
P3 88 D1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UM-UC-14細(xì)胞、SF-539 BT細(xì)胞、MES13細(xì)胞
Tissue Culture-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CA-46細(xì)胞、HCC1419細(xì)胞、WC00059細(xì)胞
HNSC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCASMC細(xì)胞、MDAMB435S細(xì)胞、HEL細(xì)胞
Tokyo Medical and Dental university 8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CEK細(xì)胞、HB 611細(xì)胞、FLC-7細(xì)胞
NTC-200細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc-05.04細(xì)胞、MDAMB-231細(xì)胞、K7M2 wt細(xì)胞
NCIH2023細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHP 100細(xì)胞、COLO 206細(xì)胞、Glioma-261細(xì)胞
TC-1[JHU-1]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI/AML5細(xì)胞、BEL/FU細(xì)胞、MLA 144細(xì)胞
NCIH1341細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L5178-R細(xì)胞、WRL68細(xì)胞、HCC-827細(xì)胞
NS20-Y細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:F442-A細(xì)胞、HeLa229細(xì)胞、FM-88細(xì)胞
HEK.EBNA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2196細(xì)胞、WM115F細(xì)胞、NCIH226細(xì)胞
HBEpiC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RWPE-2細(xì)胞、SKO3細(xì)胞、GM03571細(xì)胞
SNK-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD 966SK細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-453細(xì)胞、H-2085細(xì)胞
HECV細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD 19Lu細(xì)胞、NCTC 3960細(xì)胞、PANC-28細(xì)胞
MDAPCa2b細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE3細(xì)胞、JM1細(xì)胞、Lieming Xu-2細(xì)胞
RPE-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human Hepatocyte Line 5細(xì)胞、H-1793細(xì)胞、HFLS細(xì)胞
SCC-9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ls-174-T細(xì)胞、TU 686細(xì)胞、A2780/CP70細(xì)胞
HIC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:hA549細(xì)胞、GP2d細(xì)胞、SF 763細(xì)胞
PCI-SG231細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT1376細(xì)胞、DU-145細(xì)胞、DF1細(xì)胞
PBL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H35細(xì)胞、RAW 264.7細(xì)胞、MA-782細(xì)胞
ARO-81細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CT-26細(xì)胞、RCC4細(xì)胞、SK-N-BE(1)細(xì)胞
D407 RPE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI H508細(xì)胞、SuDHL 10細(xì)胞、GM05384細(xì)胞
P3HR1-BL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Pan02細(xì)胞、MCA-205細(xì)胞、SK-ES-1細(xì)胞
LICR-LON-HN6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NW-38細(xì)胞、HOP-62細(xì)胞、H2023細(xì)胞
T/G HA-VSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR-433細(xì)胞、PLC/PRF5細(xì)胞、NCI-H1563細(xì)胞
CAL148細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs895T細(xì)胞、QG-56細(xì)胞、SKOV-433細(xì)胞
CMT 64細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TGBC11T細(xì)胞、M20 [Human melanoma]細(xì)胞、NEC8細(xì)胞
COLO 394細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HRPEpiC細(xì)胞、NPC-TW-039細(xì)胞、MHCC 97-L細(xì)胞
Laboratory of Allergic Diseases 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SU-DHL-1細(xì)胞、Hep 3B2_1-7細(xì)胞、GM-215細(xì)胞
NALM-6-M1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-15細(xì)胞、KRCY細(xì)胞、LAD 2細(xì)胞
KYSE-410細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE1細(xì)胞、SKMEL-1細(xì)胞、BTT739細(xì)胞
MCF-12F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO-741細(xì)胞、FHL 124細(xì)胞、GRSL細(xì)胞
Rat Basophilic Leukemia-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Sp2/O-Ag14細(xì)胞、PG-LH7細(xì)胞、CAL-27細(xì)胞
Human Hepatocyte Line 5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO206F細(xì)胞、NB.4細(xì)胞、Huh7.5細(xì)胞
HPBALL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HBL100細(xì)胞、FDCP1細(xì)胞、3T3-F442A細(xì)胞
HO-8910細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2081細(xì)胞、LA-795細(xì)胞、SUM159PT細(xì)胞
MRC5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKNBE-1細(xì)胞、DSL6A/C1細(xì)胞、PCI-4B細(xì)胞
MIA-Pa-Ca-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:451-LU細(xì)胞、JEG-3細(xì)胞、Panc 08.13細(xì)胞
HEL-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCC 4細(xì)胞、Adeno-293細(xì)胞、H2052細(xì)胞
NBL-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RL952細(xì)胞、H-2085細(xì)胞、WSUDLCL2細(xì)胞
JEKO細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-520細(xì)胞、NCIH1975細(xì)胞、33604細(xì)胞
FOXNY細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:B16/F1細(xì)胞、P815細(xì)胞、251 MG細(xì)胞
P388 Cell:小鼠白血病細(xì)胞系
HUSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-847細(xì)胞、Hep G2細(xì)胞、COLO 320F細(xì)胞
TM4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UC-3細(xì)胞、CWR22R-V1細(xì)胞、TE-11細(xì)胞
CFSC-8B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L-6 myoblast細(xì)胞、HCAEC細(xì)胞、M20 [Human melanoma]細(xì)胞
PTK1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UPCISCC154細(xì)胞、CHP 100細(xì)胞、GLRK 13細(xì)胞
Ca759細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:130T細(xì)胞、C3H10T1/2CL8細(xì)胞、OAC-P4C細(xì)胞
OCI-Ly18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC9724細(xì)胞、C-643細(xì)胞、LoVo細(xì)胞
HuTu-80細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Alpha Mouse Liver 12細(xì)胞、3T3-L1 ad細(xì)胞、Vero from pool #76細(xì)胞
MF2059細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM266mel細(xì)胞、HBL 100細(xì)胞、SU.86細(xì)胞
CTLL-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:M14細(xì)胞、CemT4細(xì)胞、KLM-1細(xì)胞
SNU-16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:2E8細(xì)胞、JurkatE6-1細(xì)胞、X63-Ag8.653細(xì)胞
NCI-H1299細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COR-L23細(xì)胞、Madison 109細(xì)胞、C643細(xì)胞
SKml2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3/X63-Ag8細(xì)胞、Ra #1細(xì)胞、P3-NS1/1Ag 4.1細(xì)胞
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關(guān)鍵字: P388 Cell:小鼠白血病細(xì)胞系
上海賓穗生物科技有限公司 是一家集研發(fā)、生產(chǎn)、銷售與服務(wù)于一體的專業(yè)生物制品和化學(xué)品供應(yīng)商。公司總部位于上海市莘莊工業(yè)區(qū),擁有現(xiàn)代化辦公大樓、標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)室與生產(chǎn)廠房。上海賓穗生物科技有限公司擁有一支由教授和博士為核心的技術(shù)團(tuán)隊(duì),提供超過100000的生物、化學(xué)產(chǎn)品,產(chǎn)品涵蓋化學(xué)、醫(yī)藥、材料、能源、生物等科研領(lǐng)域。公司秉承“客戶至上、服務(wù)一流”的發(fā)展理念,致力于將優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品和服務(wù)提供給客戶。上海賓穗生物科技有限公司整合眾多的優(yōu)勢(shì)市場(chǎng)資源,以匠心服務(wù)廣大客戶,我們可以為客戶提供Binsui、TCI等國內(nèi)外各種品牌的高品質(zhì)試劑產(chǎn)品,充分滿足客戶的試劑需求。