"RASMC Cell:大鼠主動脈平滑肌細胞系
細胞形態(tài):成纖維細胞樣
細胞生長:貼壁
細胞背景資料:主動脈;平滑肌細胞
Ramos細胞系相關產品:CAL51細胞、PC-9細胞、C32 mel細胞
HFLS細胞系相關產品:MPC11細胞、HCC-9204細胞、HEM細胞
HFT8810細胞系相關產品:MV 3細胞、Bac12F5細胞、CCD1095Sk細胞
HCC-1171細胞系相關產品:MCF-10A細胞、LNCaP.FGC細胞、FDC-P1細胞
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
RASMC Cell:大鼠主動脈平滑肌細胞系
因為細胞生長的時候肯定是要相互聯系,大部分的細胞都是要成片生長的,尤其是對于貼壁細胞,單個細胞貼壁之后長著長著就長到一片去了。但是如果是成片的細胞抱團的話,傳代后細胞是不能貼壁的,這樣抱團的細胞就會死亡。所以,消化傳代的時候一定要將細胞消化成單個單個的獨立狀態(tài),這個啊是非??季磕愕墓Ψ虻模〖毎坏┟撀淙霊乙豪锬愫茈y再將他吹打成單個,因為他沒有受力點了。很難找到受力點讓你對他吹打的力分散開細胞。所以必須要在細胞未脫落之前將其吹打開,受力點就是細胞貼壁的地方。這樣你就必須要嚴格控制好消化的程度啊,這和大師做飯掌握好火候是一樣的道理啊。既要消化到容易吹打下來,又不能太過,一吹就整片脫落,要單個單個地往下掉。所以我才要分批分次地加胰酶消化就是為了保證不同生長狀態(tài)貼壁程度的細胞能夠都維持在好的受力點分散開。這個是很重要的一點。尤其是對于某些細胞這一點就是他活去死的致命點。像Caco-2細胞就是如此。另外關于傳代很重要一點就是一定不能等到細胞長滿的時候才去消化傳代。要在細胞長到70%左右的時候就要傳代了,一旦發(fā)現細胞生長中已經有疊層生長的時候就要立即進行消化傳代。不能再拖了。關于換液傳代時候洗瓶的問題。對于用DMEM培養(yǎng)基培養(yǎng)的細胞,你在洗的時候如果是用無血清1640去洗細胞在隨即后的幾次中會比用DMEM洗的長的要好。同樣,用1640培養(yǎng)的也有這個現象。如果不嫌麻煩的話,可以用PBS來洗,洗的效果和用無血清培養(yǎng)基洗的效果基本上是一樣的,對于有些細胞會更勝一籌。洗的目的主要是洗去培養(yǎng)瓶里殘留的血清,防止它對胰酶的影響。這樣能夠保證胰酶的消化能力優(yōu)先,是很關鍵的一點。先補充這么多,還會后續(xù)更新。再補充一點:傳代時PBS洗是很重要的一步,最近發(fā)現,用PBS就可以把細胞消化開來。加入PBS放置10-15分鐘,有些需要更長的時間,等到細胞一個個分離開來的時候,就可以直接吹打下來,但是和胰酶消化一樣,要控制好時間,不能時間太過了,要不然損傷細胞,細胞不容易成活,狀態(tài)容易不好。這個方法對于某些細胞是很管用的。有些細胞用胰酶消化不容易消化成單個的時候,或者臨時沒有胰酶了,可以選用此方法。不過一定要試試,看是否適合你的細胞。
細胞產品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程(請嚴格遵照無菌操作):1)吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS緩沖液潤洗細胞兩次,加2-3ml 0.25%胰酶進行消化細胞(注意把握消化時間,通??刂圃冢?2min);2)鏡下觀察消化情況,在細胞邊緣縮小,貼壁松動時(不建議消化到細胞漂浮)去掉胰酶,加6-8ml完全培養(yǎng)基,輕輕吹打細胞層,盡量把細胞層吹落,吹散;3)取部分細胞懸液轉移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當的完全培養(yǎng)基,把細胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng);4)注意培養(yǎng)基PH值變化情況,定期換液(每周2-3次),待細胞密度達到80%以后重復1項操作或者凍存;特別注意:(如使用公共實驗室或者初次接觸細胞培養(yǎng),建議添加雙抗培養(yǎng))1)收到細胞后請盡快更換為含15%血清的新鮮培養(yǎng)基,如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶,請在原瓶培養(yǎng)基中額外添加10%的血清,(原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時間最長不宜超過72小時);2)貼壁細胞收到當天切忌立刻消化,請將細胞換液后放置培養(yǎng)箱孵育到第二天再做消化傳代,請優(yōu)先選擇直徑6cm的培養(yǎng)皿進行傳代培養(yǎng);3)如簽收時出現培養(yǎng)瓶壁破裂,漏液等情況請及時做好照片記錄并聯系實驗室。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數國外著名大學建系
HEK-293 c18細胞系相關產品:brain-derived Endothelial cells.3細胞、Caki2細胞、GES-1細胞
2PK3細胞系相關產品:NIH 3T6細胞、Lewis-Lung細胞、NTERA2D1細胞
BSC40細胞系相關產品:J 82細胞、HCC-1599細胞、751-NA細胞
HCC1599細胞系相關產品:ARO 81-1細胞、ChaGo-K-1細胞、HCC95細胞
HSAS4細胞系相關產品:A 2058細胞、C8166細胞、MDA-MB-134VI細胞
細胞生長特性:貼壁
RASMC Cell:大鼠主動脈平滑肌細胞系
貼壁細胞消化傳代時通常采用兩種方法:一、加入胰酶等細胞脫落后,再加培養(yǎng)基中止胰酶作用,離心傳代;二、加入胰酶后,鏡下觀察待細胞始脫落時,棄胰酶,加培養(yǎng)液分瓶。但前者太麻煩,而后者有可能對細胞施加胰酶選擇,因為總是貼壁不牢的細胞先脫落,對腫瘤細胞來說,這部分細胞有可能是惡性程度較高的細胞亞群。一種簡單的消化傳代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(30s),棄之,再加入適量胰酶作用10s-40s(根據細胞消化的難易程度),棄之,這樣依賴殘余的胰酶就可將細胞消化單細胞。對于較難消化的細胞,可以用2%利多卡因消化5-8分鐘,然后再棄去,加培養(yǎng)基吹打也可以,對細胞的影響不大。不用PBS也不用Hanks洗,只要把舊培養(yǎng)液吸的干凈一點,直接加酶消化應該不會有什么問題。棄培養(yǎng)液后,用0.04%的EDTA沖洗一次,再用1/4v的0.04%的EDTA室溫孵育5min,棄取大部分EDTA,加入與剩余EDTA等量的胰酶(預熱)總體積1/10v。消化到有細胞脫落。不過有人說EDTA對細胞不好,有證據嗎?培養(yǎng)的BASMC:倒掉舊培養(yǎng)液加入少量胰酶沖一下,倒掉再加入0.125-0.25%胰酶約6-10滴或1ml(25ml bottle)消化再加入適量新培養(yǎng)基中和,并分瓶這種方法簡單、省事;效果很好并且不損失細胞!
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
GM03671細胞系相關產品:TE-3A細胞、NCI-H295R細胞、E304細胞
MFD-1細胞系相關產品:LAPC-4細胞、JHH-7細胞、MC3T3-E1 Subclone 24細胞
FL-83B細胞系相關產品:SW954細胞、Hi-5細胞、MDA175細胞
HCC-1954BL細胞系相關產品:Walker256-TC細胞、WSUDLCL2細胞、MEF細胞
HLEC-SRA 01/04細胞系相關產品:Hs675細胞、Asian Medical Center-Head and Neck cancer-8細胞、Hs940.T細胞
WM115F細胞系相關產品:WIL2S細胞、KPL-1細胞、LLC PK1細胞
LUDLU1細胞系相關產品:OCILY3細胞、CT-26 WT細胞、K562細胞
RASMC Cell:大鼠主動脈平滑肌細胞系
HBL-100細胞系相關產品:NS-I/1細胞、SKMel-28細胞、Hs27細胞
HCET細胞系相關產品:NCI H295R細胞、FM88細胞、EA.hy 926細胞
Renal Carcinoma細胞系相關產品:LNCaP subline C4-2細胞、H9c2細胞、Hs 888.T細胞
NCIH1930細胞系相關產品:Hs888Lu細胞、LLC1細胞、NCI-H676細胞
Panc2.03細胞系相關產品:AMJ2-C8細胞、U266BL細胞、C 6細胞
CWR22R-V1細胞系相關產品:HLE-SRA-01/04細胞、NG-108-15細胞、CAL12T細胞
EoL-1 cell細胞系相關產品:Hs746-T細胞、NGP細胞、143BTK-細胞
H2227細胞系相關產品:ARPE19細胞、TW01細胞、COLO 741細胞
Human podocyte細胞系相關產品:L(TK-)細胞、ECC12細胞、Daoy細胞
Human podocyte細胞系相關產品:L(TK-)細胞、ECC12細胞、Daoy細胞
SNK-6細胞系相關產品:Turbot Embryonic Cell line細胞、HepaRG細胞、HL1細胞
Sf-21細胞系相關產品:KAT5細胞、MiaPaca.2細胞、PC10細胞
KG1細胞系相關產品:BE2M17細胞、U-87MG ATCC細胞、Hs 766T細胞
OE-21細胞系相關產品:Colon26細胞、Jurkat E6.1細胞、H250細胞
SK MEL-28細胞系相關產品:Mv 1 Lu細胞、SK-ChA1細胞、RGCs細胞
Murine Leydig Tumor Cell line-1細胞系相關產品:GH3細胞、DrG細胞、Hs 819.T細胞
3T6細胞系相關產品:L cells細胞、alpha TC1-6細胞、OV 1063細胞
GM-637細胞系相關產品:BL1339細胞、CHAGOK1細胞、AsPC-1細胞
SNU216細胞系相關產品:MyLa 2059細胞、DI-TNC1細胞、HeLa細胞
UACC-812細胞系相關產品:HT144-mel細胞、CL 1-5細胞、H69C細胞
Z-138細胞系相關產品:H838細胞、LNCaP-FGC細胞、D283 Med細胞
NALM-6細胞系相關產品:RCCJF細胞、NIH:OVCAR3細胞、MCF.7細胞
CAL 33細胞系相關產品:HO1-N1細胞、HOP 92細胞、KM932細胞
L 363細胞系相關產品:WEHI 3B細胞、MDCK.2細胞、LU451細胞
OVCAR-4細胞系相關產品:WML2細胞、MBT2細胞、H-2591細胞
SW-626細胞系相關產品:Malme-3 M細胞、TALL 1細胞、SK-N-BE(2)細胞
3T3-J2細胞系相關產品:Potorous tridactylus Kidney 1細胞、C-127細胞、VK2細胞
HNTEC細胞系相關產品:MES-SA細胞、NRK clone 52E細胞、MCM細胞
THP1細胞系相關產品:HBVP細胞、WM115-mel細胞、MUTZ3細胞
OS-RC-2細胞系相關產品:NUGC2細胞、SF-767細胞、3T6細胞
CT-26細胞系相關產品:Immortal Pig Intestinal-2I細胞、Hs-606-T細胞、A2780/Taxol細胞
SuDHL 10細胞系相關產品:Madin-Darby Canine Kidney細胞、CATHa細胞、SK-MEL 28細胞
PG [Human lung carcinoma]細胞系相關產品:NCIH2009細胞、LWnt3A細胞、CL11細胞
MLA144細胞系相關產品:HCA7細胞、LA-4 [Mouse lung adenoma]細胞、Scott and White No. 13細胞
SEM細胞系相關產品:LTEP-a2細胞、OC-3-VGH細胞、WM115細胞
C-33A細胞系相關產品:NCIH740細胞、CEM-T4細胞、PC3M-IE8細胞
SK-RC-52細胞系相關產品:SC細胞、H4IIE細胞、HT 1080.T細胞
IR983F細胞系相關產品:NK-92細胞、32D clone 3細胞、EL-4細胞
SHEP1細胞系相關產品:SKRC-39細胞、Panc-08.13細胞、Hs940T細胞
T-HEECs細胞系相關產品:QBI-HEK 293A細胞、MV4;11細胞、MDA134細胞
QG56細胞系相關產品:EVSA/T細胞、U-343MG細胞、Neuro2a細胞
SUP T1細胞系相關產品:BT-325細胞、MT-2細胞、SKNF1細胞
HDSMC細胞系相關產品:LTEPsm細胞、MHH-CALL-2細胞、Kit 225-K6細胞
RASMC Cell:大鼠主動脈平滑肌細胞系
SK-MEL-31細胞系相關產品:CHO cell clone K1細胞、Centre Antoine Lacassagne-39細胞、PC 61.5.3細胞
3-LL細胞系相關產品:CCD 966 SK細胞、SRS-82細胞、SW-954細胞
PFSK-1細胞系相關產品:GT38細胞、Tu-212細胞、Roswell Park Memorial Institute 8402細胞
Okayama University Medical School-23細胞系相關產品:OC-316細胞、H-2108細胞、ELD-1細胞
L-428細胞系相關產品:NBLS細胞、SKGIIIA細胞、SNU-638細胞
BGC823細胞系相關產品:KM12SM細胞、Hep G2/C3A細胞、MLMA細胞
LS-174T細胞系相關產品:H4-II-EC3細胞、NCIH1869細胞、SKCol1細胞
Jeko1細胞系相關產品:Mel-RM細胞、MMVECs細胞、ChaGo-K1細胞
HFL細胞系相關產品:HeLaS3細胞、hTERT RPE-1細胞、SKLU-1細胞
PIG1細胞系相關產品:L78細胞、FTC133細胞、SKMEL24細胞
Hs675T細胞系相關產品:A2780/CP70細胞、Tu-177細胞、624 MEL細胞
COS-1細胞系相關產品:OACP4C細胞、FLC7細胞、HuO9細胞
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關鍵字: RASMC Cell:大鼠主動脈平滑肌細胞系
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