"Psi2 DAP Cell:小鼠胚胎成纖維細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)：成纖維細(xì)胞樣
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁
細(xì)胞背景資料：詳見(jiàn)相關(guān)文獻(xiàn)介紹
NCIH209細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LA-N-5細(xì)胞、Capan 1細(xì)胞、VE細(xì)胞
H865細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK 293FT細(xì)胞、B16F0細(xì)胞、R-1059-D細(xì)胞
HCC0038細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-373MG細(xì)胞、Hs688(A)T細(xì)胞、J-774細(xì)胞
CHO cell clone K1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-95細(xì)胞、SKNSH細(xì)胞、HCC9724細(xì)胞
細(xì)胞物種來(lái)源：人源或鼠源等其它物種來(lái)源
Psi2 DAP Cell:小鼠胚胎成纖維細(xì)胞系
細(xì)胞傳代時(shí)消化的問(wèn)題：可以這樣說(shuō)，對(duì)于需要消化傳代的細(xì)胞，每一次的消化都是對(duì)這個(gè)細(xì)胞存活與否，狀態(tài)好與不好最至關(guān)重要的考驗(yàn)。很多同學(xué)都遇到過(guò)這個(gè)問(wèn)題，自己養(yǎng)的細(xì)胞開(kāi)始的幾代長(zhǎng)的還挺好的，可是穿過(guò)幾代之后就發(fā)現(xiàn)自己的細(xì)胞，狀態(tài)越來(lái)越差勁了。對(duì)于這個(gè)問(wèn)題，可以非?？隙ǖ卣f(shuō)，你的消化環(huán)節(jié)出問(wèn)題了。你每一次的消化都讓細(xì)胞受到較大損傷了。所以，越長(zhǎng)越差。在消化的過(guò)程中，你加入胰酶后，所有細(xì)胞都在被胰酶消化著，但是我們忽視了一個(gè)問(wèn)題就是，細(xì)胞的生長(zhǎng)狀態(tài)是不一樣的，每一個(gè)細(xì)胞的貼壁情況也是不一樣的，有的貼壁牢固，有的貼壁沒(méi)有那么牢固的，所以，讓所有的細(xì)胞消化同樣的時(shí)間對(duì)細(xì)胞是不公平的，他們受到了差別待遇當(dāng)然會(huì)有脾氣啊。我后來(lái)對(duì)消化的方法進(jìn)行了改良。爭(zhēng)取做到因材施教呵呵。我稱(chēng)之為“四步消化法”。（以難消化細(xì)胞為例）；具體操作：１)首先不加胰酶，倒掉舊培養(yǎng)基加入少量新培養(yǎng)基洗１-２遍，（這是前奏，即為步，目的是將漂浮著的死細(xì)胞之類(lèi)盡量洗掉。２)然后再加入少量新培養(yǎng)基直接吹打一遍，這一遍是把貼壁不牢固的細(xì)胞吹打下來(lái)。再用培養(yǎng)基洗一遍，兩次所得懸液混合傳入新瓶。即為第二步（你可以將這些傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面胰酶消化過(guò)的細(xì)胞對(duì)比觀(guān)察看誰(shuí)長(zhǎng)的更好一點(diǎn)就知道該細(xì)胞對(duì)胰酶的敏感度了。）３)吸干凈瓶?jī)?nèi)剩余液體，加入０.３ml左右的胰酶潤(rùn)洗一遍，吸掉棄之，再加入１ml左右的胰酶消化。消化的同時(shí)置于顯微鏡下觀(guān)察，待細(xì)胞與細(xì)胞之間間隙明顯的時(shí)候立即吸掉胰酶與干凈子彈頭里備用，加入新培養(yǎng)基開(kāi)始吹打，吹打２-３遍后吸取懸液于試管或新瓶暫存。用２ml左右新培養(yǎng)基洗一遍與前面的混合。（你也可以傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面及前面的做對(duì)比。）這是第三步。４)然后把前面剛吸出來(lái)的胰酶重新加進(jìn)去瓶里繼續(xù)消化剩余的貼壁牢固的細(xì)胞。當(dāng)然你也可以用新的胰酶，如果你們那比較富裕的話(huà)，呵呵。繼續(xù)鏡下觀(guān)察，待剩余細(xì)胞間隙明顯，細(xì)胞獨(dú)立開(kāi)來(lái)的時(shí)候，吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基吹打。懸液傳入新瓶培養(yǎng)（根據(jù)實(shí)際情況你自己把握）。這是第四步。其實(shí)還可以有第五步，對(duì)于特別難消化的細(xì)胞和對(duì)胰酶特別敏感的細(xì)胞的話(huà)，你可以繼續(xù)加第五步甚至第六步。為了細(xì)胞更好的狀態(tài)，更漂亮的樣子，沒(méi)辦法，你必須分多批多次消化，這樣才能限度地將胰酶對(duì)細(xì)胞的損傷降到最低，保證細(xì)胞的狀態(tài)能夠。當(dāng)然了，如果細(xì)胞是屬于那種很容易消化的細(xì)胞，像RAW２６４.７，僅僅第二步就搞定了。就沒(méi)必要第三步第四步了。這個(gè)是需要你在實(shí)驗(yàn)中能夠自己用心去體會(huì)的。建議你接受一個(gè)新細(xì)胞時(shí)把各步消化的細(xì)胞分別培養(yǎng)起來(lái)做比較，去摸索好細(xì)胞對(duì)胰酶的要求。便于你后續(xù)實(shí)驗(yàn)的開(kāi)展。將細(xì)胞消化分成這幾步，除了是為了避免胰酶對(duì)細(xì)胞的損傷之外，還有一個(gè)更重要的作用就是，可以程度地把細(xì)胞吹打成單個(gè)單個(gè)的狀態(tài)，不成片不連體。
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程(請(qǐng)嚴(yán)格遵照無(wú)菌操作)：１)吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS緩沖液潤(rùn)洗細(xì)胞兩次，加２-３ml ０.２５%胰酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意把握消化時(shí)間，通常控制在１-２min)；２)鏡下觀(guān)察消化情況，在細(xì)胞邊緣縮小，貼壁松動(dòng)時(shí)(不建議消化到細(xì)胞漂浮)去掉胰酶，加６-８ml完全培養(yǎng)基，輕輕吹打細(xì)胞層，盡量把細(xì)胞層吹落，吹散；３)取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中，添加適當(dāng)?shù)耐耆囵B(yǎng)基，把細(xì)胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；４)注意培養(yǎng)基PH值變化情況，定期換液(每周２-３次)，待細(xì)胞密度達(dá)到８０%以后重復(fù)１項(xiàng)操作或者凍存；特別注意：(如使用公共實(shí)驗(yàn)室或者初次接觸細(xì)胞培養(yǎng)，建議添加雙抗培養(yǎng))１)收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快更換為含１５%血清的新鮮培養(yǎng)基，如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶，請(qǐng)?jiān)谠颗囵B(yǎng)基中額外添加１０%的血清，(原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時(shí)間最長(zhǎng)不宜超過(guò)７２小時(shí))；２)貼壁細(xì)胞收到當(dāng)天切忌立刻消化，請(qǐng)將細(xì)胞換液后放置培養(yǎng)箱孵育到第二天再做消化傳代，請(qǐng)優(yōu)先選擇直徑６cm的培養(yǎng)皿進(jìn)行傳代培養(yǎng)；３)如簽收時(shí)出現(xiàn)培養(yǎng)瓶壁破裂，漏液等情況請(qǐng)及時(shí)做好照片記錄并聯(lián)系實(shí)驗(yàn)室。
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明：細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
R2C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Y3-Ag1,2,3細(xì)胞、SW-620細(xì)胞、HOP-92細(xì)胞
NCI-H920細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HLEC-B3細(xì)胞、Gingival carcinoma Neck Metastasis細(xì)胞、CORL279細(xì)胞
mRMEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A375mel細(xì)胞、SCL-II細(xì)胞、SK-GT-2細(xì)胞
HuPT4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC-38細(xì)胞、Loucy細(xì)胞、SJSA1細(xì)胞
PLB 985細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SHI1細(xì)胞、OEC33細(xì)胞、FRH-0201細(xì)胞
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁或懸浮，詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書(shū)部分
Psi2 DAP Cell:小鼠胚胎成纖維細(xì)胞系
貼壁細(xì)胞消化傳代時(shí)通常采用兩種方法：一、加入胰酶等細(xì)胞脫落后，再加培養(yǎng)基中止胰酶作用，離心傳代；二、加入胰酶后，鏡下觀(guān)察待細(xì)胞始脫落時(shí)，棄胰酶，加培養(yǎng)液分瓶。但前者太麻煩，而后者有可能對(duì)細(xì)胞施加胰酶選擇，因?yàn)榭偸琴N壁不牢的細(xì)胞先脫落，對(duì)腫瘤細(xì)胞來(lái)說(shuō)，這部分細(xì)胞有可能是惡性程度較高的細(xì)胞亞群。一種簡(jiǎn)單的消化傳代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(３０s)，棄之，再加入適量胰酶作用１０s-４０s(根據(jù)細(xì)胞消化的難易程度)，棄之，這樣依賴(lài)殘余的胰酶就可將細(xì)胞消化單細(xì)胞。對(duì)于較難消化的細(xì)胞，可以用２%利多卡因消化５-８分鐘，然后再棄去，加培養(yǎng)基吹打也可以，對(duì)細(xì)胞的影響不大。不用PBS也不用Hanks洗，只要把舊培養(yǎng)液吸的干凈一點(diǎn)，直接加酶消化應(yīng)該不會(huì)有什么問(wèn)題。棄培養(yǎng)液后，用０.０４%的EDTA沖洗一次，再用１/４v的０.０４%的EDTA室溫孵育５min，棄取大部分EDTA，加入與剩余EDTA等量的胰酶(預(yù)熱)總體積１/１０v。消化到有細(xì)胞脫落。不過(guò)有人說(shuō)EDTA對(duì)細(xì)胞不好，有證據(jù)嗎？培養(yǎng)的BASMC：倒掉舊培養(yǎng)液加入少量胰酶沖一下，倒掉再加入０.１２５-０.２５%胰酶約６-１０滴或１ml(２５ml bottle)消化再加入適量新培養(yǎng)基中和，并分瓶這種方法簡(jiǎn)單、省事；效果很好并且不損失細(xì)胞！
細(xì)胞形態(tài)特性：詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書(shū)
hTERTHME1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-MEL-3細(xì)胞、PaCa2細(xì)胞、LY-R細(xì)胞
Lu99A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16-F1細(xì)胞、Renal Carcinoma細(xì)胞、MBT2細(xì)胞
P3/NS-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：3LL細(xì)胞、SUM-102PT細(xì)胞、IPLB-Sf21細(xì)胞
SNB.19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LLC-MK2細(xì)胞、Alpha Mouse Liver 12細(xì)胞、KYSE-180細(xì)胞
Hs 934.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MV4-11細(xì)胞、NCIH2030細(xì)胞、G 401細(xì)胞
A.704細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK293-EBNA細(xì)胞、16HBE140細(xì)胞、HSC-2細(xì)胞
FD-LSC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DI-TNC1細(xì)胞、DK-MG細(xì)胞、C127細(xì)胞
Psi2 DAP Cell:小鼠胚胎成纖維細(xì)胞系
Hs 821.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RH-35細(xì)胞、SK Mel 24細(xì)胞、Lilly Laboratories Cell-Porcine Kidney 1細(xì)胞
RKOE6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM 190PT細(xì)胞、BCECs細(xì)胞、BC-3-H-I細(xì)胞
UCH-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RCC10RGB細(xì)胞、LA-N-5細(xì)胞、H1944細(xì)胞
Alexander cells細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK 293 c18細(xì)胞、M2-10B4細(xì)胞、CAL 85-1細(xì)胞
MV411細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCC7細(xì)胞、Transformed C3H Mouse Kidney-1細(xì)胞、PFSK細(xì)胞
PBL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H35細(xì)胞、RAW 264.7細(xì)胞、MA-782細(xì)胞
ZR75-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MSB-1細(xì)胞、SF126細(xì)胞、Large Cell Lung Cancer-103H細(xì)胞
NCIH889細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS180細(xì)胞、SK-HEP-1細(xì)胞、FHL 124細(xì)胞
Hep 3B2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JKT-1細(xì)胞、CCD-841-CoN細(xì)胞、769-P細(xì)胞
Hep 3B2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JKT-1細(xì)胞、CCD-841-CoN細(xì)胞、769-P細(xì)胞
HMEC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LICCF細(xì)胞、5637細(xì)胞、APRE-19細(xì)胞
H1404細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：He-La細(xì)胞、Hs-343-T細(xì)胞、PT-67細(xì)胞
H-209細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：253J-BV細(xì)胞、UCLA RO-81A-1細(xì)胞、KS-1 [Human glioblastoma]細(xì)胞
MDAMB231細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MUTZ-1細(xì)胞、PANC-08-13細(xì)胞、H128細(xì)胞
RAW2647細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P30/OHK細(xì)胞、0V-1063細(xì)胞、SNU520細(xì)胞
FTC133細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC1395細(xì)胞、HSAS1細(xì)胞、HCA 7細(xì)胞
KYSE-150細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BJA-B細(xì)胞、74Int細(xì)胞、Ly1細(xì)胞
LA-N-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Merwin Plasma Cell tumor-11細(xì)胞、NIH:OVCAR-8細(xì)胞、LAD-2細(xì)胞
NCI-A549細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：M14-MEL細(xì)胞、AdHek細(xì)胞、U266 Bl細(xì)胞
H-526細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HMEC-1細(xì)胞、GM05384細(xì)胞、Mono-Mac-1細(xì)胞
Michigan Cancer Foundation-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM-239細(xì)胞、Hs 888Lu細(xì)胞、SW-13細(xì)胞
MDA157細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mink Lung細(xì)胞、T-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1細(xì)胞、UCLA NPA-87-1細(xì)胞
686LN-M4e細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSC-2細(xì)胞、Dx5細(xì)胞、786-O RCC細(xì)胞
Vero-E6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS-513細(xì)胞、KMH-2細(xì)胞、PSN1細(xì)胞
KMM1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RMS1598細(xì)胞、SACCLM細(xì)胞、Hs-578T細(xì)胞
Meat Animal Research Center-145細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hu-P-T3細(xì)胞、CWR22R細(xì)胞、CCD-841-CoN細(xì)胞
JAR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SkChA-1細(xì)胞、BL1339細(xì)胞、HEL-92.1.7細(xì)胞
PANC-03-27細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：hTERT-HME-1細(xì)胞、G 401細(xì)胞、HEK.EBNA細(xì)胞
Panc10.05細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MUGCHOR1細(xì)胞、MLE-12細(xì)胞、Japanese Tissue Culture-28細(xì)胞
Tj-905細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GH 3細(xì)胞、COLO678細(xì)胞、mousepodocyte細(xì)胞
526mel細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC3T3-E1(C4)細(xì)胞、RPMI7951細(xì)胞、HD11細(xì)胞
JEG-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-295R細(xì)胞、GM02131A細(xì)胞、Shadyside Hospital Pittsburgh-77細(xì)胞
GM02219D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RMa-bm細(xì)胞、WSU-DLCL2細(xì)胞、HFT8810細(xì)胞
SW13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1436細(xì)胞、WERI-Rb1細(xì)胞、hTERT-HME-1細(xì)胞
NCI-SNU-182細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HIC細(xì)胞、WEHI-231細(xì)胞、PNT1/A細(xì)胞
SK-MEL-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU638細(xì)胞、Mouse Bladder Tumor line-2細(xì)胞、CCD 841 CoN細(xì)胞
MH7A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOK細(xì)胞、BHP-10細(xì)胞、H1793細(xì)胞
C-Li-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-780細(xì)胞、SJSA1細(xì)胞、KU 812F細(xì)胞
SUDHL10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CV-1 in Origin Simian-7細(xì)胞、B16 BL6細(xì)胞、SW1271細(xì)胞
P3 NS1 Ag4/1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OLN93細(xì)胞、Panc 2.03細(xì)胞、H-740細(xì)胞
TE671/RD細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WB-F344細(xì)胞、NCIH345細(xì)胞、SNU739細(xì)胞
HTori-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LM6細(xì)胞、Hs 746T細(xì)胞、MUG-Chor1細(xì)胞
H838細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：E.G7-OVA細(xì)胞、Hs 600.T細(xì)胞、AML-2細(xì)胞
Psi2 DAP Cell:小鼠胚胎成纖維細(xì)胞系
KLM-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPE1細(xì)胞、KALS1細(xì)胞、MEL細(xì)胞
NCI-H226細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Doubling time: ~50 hours (ATCC).細(xì)胞、H820細(xì)胞、RA細(xì)胞
NCIH2347細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-48細(xì)胞、MFE296細(xì)胞、KOPN8細(xì)胞
NCI-H1435細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Rat-1細(xì)胞、MHCC97L細(xì)胞、NCI-H1668細(xì)胞
Caco-2 BBe細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI 6666細(xì)胞、Human Lung Microvascular Endothelial Cell line-5a細(xì)胞、Colo-678細(xì)胞
BC3 H1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs-27細(xì)胞、Los Angeles Prostate Cancer-4細(xì)胞、LAC細(xì)胞
SK-N-BE2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNT8細(xì)胞、NCI-H676B細(xì)胞、SUM159細(xì)胞
EC-GI細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MV-3細(xì)胞、PK13細(xì)胞、293-GP細(xì)胞
LS-411N細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：N-87細(xì)胞、H1648細(xì)胞、MESSA細(xì)胞
Roswell Park Memorial Institute 2650細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LPC-H12細(xì)胞、NCI-H1417細(xì)胞、Duke University 145細(xì)胞
Hs445細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-RC-39細(xì)胞、CAL85-1細(xì)胞、CEM-C1細(xì)胞
JOSK-M細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKNO-1細(xì)胞、CCRF/CEM/0細(xì)胞、HEK293A細(xì)胞
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