"NCI-H1915 epithelioid cells人非小細胞肺癌細胞系 細胞背景資料:詳見相關文獻介紹 細胞形態(tài):上皮細胞樣 細胞復蘇后貼壁細胞較少的問題分析:總結1:復蘇過程沒有問題,是否是從液氮拿出直接放入溫水,還有培養(yǎng)箱,二氧化碳濃度,培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS 15-20%,看看能否幫助貼壁,當然也需要考慮血清問題,還有確信拿來的細胞沒問題??偨Y2:首先應該懷疑凍存,實際上復蘇出問題的可能非常小,因為操作簡單,而且死板。1、你凍存的時候是不是消化的時間過長,這是一般人所注意不到的,即使書上也不講這個問題,太長的消化時間會讓細胞復蘇時失去貼壁能力,表現(xiàn)為先貼后死,原因是在你復蘇的時候細胞已進入凋亡程序,不可逆轉的死亡。2、你的凍存液好不好,是什么,甘油還是DMSO,質量非常重要,否則也會死亡。3、你的凍存液的量加的是不是太多,ATCC推薦是不超過7%,大于5%,太多也不好。4、你在凍存的時候是不是把DMSO混均勻,這個有一些影響,但不算太大。5、你的凍存是否按部就班,就是所溫度梯度是不是把握嚴格,很多人容易忘卻這個事情,因為這個東西流程長。6、如果你細胞污染,你是否能很快看到,我比我的導師能早一天看到污染。從這個角度講建議去除離心這步。7、你的細胞在凍存前是否過密。還有,不贊成孵箱污染這個概念的,所有在一個孵箱里的細胞都污染一個細菌的話,這個細菌是源于孵箱的,但這不代表孵箱污染,因為孵箱無論你如何處理都有大量的細菌,問題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找,以后就不犯同樣的問題,這個很重要,不能靠猜,否則你就有可能細胞養(yǎng)絕最后換課題,這個見得太多了,別不當會事。 Baby Hamster Kidney from litter No. 21細胞系相關產(chǎn)品:PCI-4B細胞、KATO III細胞、GFP-Olig2細胞 H1869細胞系相關產(chǎn)品:PA12細胞、SW900細胞、H283細胞 GM15452細胞系相關產(chǎn)品:Hs 343.T細胞、Human Hepatocyte Line 5細胞、COLO 320細胞 細胞生長:貼壁 NCI-H1915 epithelioid cells人非小細胞肺癌細胞系 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細胞學在生命科學科中起著至關重要的作用,近年來細胞學蓬勃發(fā)展,并取得了重大的進展,細胞實驗室的構建也是各個院校生物學科必備的實驗室。細胞實驗謹慎復雜,需要的實驗設備種類繁多,下面就一些動物細胞實驗室必備儀器進行簡單介紹:CO2培養(yǎng)箱是細胞培養(yǎng)的必備儀器,它為細胞提供了一個體外培養(yǎng)的舒適環(huán)境,如適宜的溫度、濕度、酸堿度、O2濃度等。細胞在體外培養(yǎng)時很容易受到各種細菌、微生物的感染,因此,CO2培養(yǎng)箱的滅菌和抑菌能力就顯得尤為重要。純水系統(tǒng):細胞培養(yǎng)用水一般要求雙蒸水,實際上普通蒸餾水經(jīng)玻璃器皿中按標準方法蒸餾二次得到的雙蒸水是不能滿足要求的,而且水中的內毒素直接參與細胞凋亡,血清中內毒素含量越低,對細胞毒性越小,越利于細胞的生長和傳代;內毒素含量過高,會直接導致細胞提前老化。因此建議配置正式的水純化系統(tǒng)。超凈工作臺/生物安全柜:細胞培養(yǎng)對無菌環(huán)境要求很高,在細胞操作時,一般需要在100級空氣質量條件下進行,因此超凈工作臺或生物安全柜就必須配備。液氮罐:為了保存細胞,特別是不易獲得的突變型細胞或細胞株,要將細胞凍存。凍存的溫度一般為液氮溫度-196℃,因此,需要液氮罐。在此環(huán)境中,一般細胞可以保存十年具有活性。超低溫冰箱:細胞的凍存過程需要一系列程序降溫,一般4℃下存放30min,轉放-20℃ 1 hour,再轉入-70至-80℃過夜,之后才可以轉移到液氮內(-196℃),這時就必須配備一臺-86℃超低溫冰箱。一般超低溫冰箱保存細胞可達數(shù)月,對于不需要長期凍存的細胞,可暫時放于超低溫冰箱保存。恒溫水浴:從液氮或超低溫冰箱中取出細胞凍存管需要立即放于37℃水浴中快速復蘇之后才傳代培養(yǎng),因此,恒溫水浴也是細胞實驗室必備儀器。離心機:細胞培養(yǎng)需要離心收集傳代細胞,所以需要配置低速的常溫離心機,對于后期細胞內容物的分離則需要高速冷凍離心機。移液器和細胞培養(yǎng)的大量耗材:細胞實驗中有大量頻繁的移液操作,因此各種微量移液器、瓶口分配器、移液管控制器是必不可少的。各類細胞培養(yǎng)板、細胞培養(yǎng)瓶、移液管等耗材更是不可或缺的,而且一次性,用量極大。除上述儀器外,高壓滅菌鍋、倒置顯微鏡也是細胞培養(yǎng)的必備儀器,發(fā)酵罐、轉瓶機等也常常見于細胞培養(yǎng)實驗室。 細胞傳代方法:每周換液2—3次 Panc4.03細胞系相關產(chǎn)品:RMG-1細胞、EB2細胞、Melanoma 14細胞 bEnd3細胞系相關產(chǎn)品:OCI-LY-7細胞、T 98 G細胞、HEL9217細胞 GM02219C細胞系相關產(chǎn)品:MCF 10A細胞、Lec1細胞、RD 2細胞 P3X63 AG8-653細胞系相關產(chǎn)品:T-CAM2細胞、HMEC細胞、HELF細胞 Hs27F細胞系相關產(chǎn)品:LWnt3A細胞、IPLB-Sf21-AE細胞、HLEpiC細胞 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系 NCI-H1915 epithelioid cells人非小細胞肺癌細胞系 細胞生長特性:貼壁生長 細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書 細胞培養(yǎng)實驗中常見問題總結:1)一般客戶拿到細胞后,應該注意什么?客戶收到細胞后先不開蓋,放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議受收細胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,顯微鏡下拍細胞100X,200X各一張),排除細胞本身污染的情況;收到細胞未開封,出現(xiàn)污染狀況我們負責免費發(fā)送一株細胞。收到細胞時如無異常情況,請在顯微鏡下觀察細胞密度,如為貼壁細胞,未超過80%匯合度時,將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出,留下10ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng);超過80%匯合度時,請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞,吸出培養(yǎng)液、1000轉/分鐘離心2分鐘,吸出上清,管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。細胞消化液建議使用PBS配制,慎用Hanks液配制;2)快遞細胞多久能到,是寄凍存的細胞還是復蘇好的細胞?我們采用快遞發(fā)貨,一般外地2--3天,寄細胞前請確認當?shù)販囟龋绻麣鉁氐陀冢炊鹊?,則采用郵寄凍存細胞;3)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基?不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應之細胞培養(yǎng)基,若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基,細胞大都無法立即適應,造成細胞無法存活;4)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類?不能。血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的種類和品質對于細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清,在一些物質或分子的量或內容物上都有所不同,血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。 HCFB(HCF)細胞系相關產(chǎn)品:WEHI-231細胞、MG63細胞、OVCAR 420細胞 LSC-1細胞系相關產(chǎn)品:NCIH1703細胞、NIH 3T3細胞、CF-1 MEF細胞 A10細胞系相關產(chǎn)品:SK-MEL2細胞、alphaTC clone 6細胞、OV90細胞 PANC 1005細胞系相關產(chǎn)品:BEP2D細胞、Psi-2-DAP細胞、JVM-3細胞 FU-MMT-1細胞系相關產(chǎn)品:KG-1a細胞、H-522細胞、SK-Mel 2細胞 SK-MEL2細胞系相關產(chǎn)品:COLO824細胞、NCIH2286細胞、NBL-2細胞 PANC-02-03細胞系相關產(chǎn)品:HEK-293-EBNA細胞、MSTO211H細胞、MeWo細胞 BT549細胞系相關產(chǎn)品:HEC1-A細胞、U343MG細胞、DMS79細胞 M-1 myeloid leukemia細胞系相關產(chǎn)品:NCI H69細胞、H69/P細胞、RAT2細胞 HF-91細胞系相關產(chǎn)品:TE-7細胞、10T1/2細胞、Ramos-RA1細胞 NCI-H1915 epithelioid cells人非小細胞肺癌細胞系 TE14細胞系相關產(chǎn)品:C3H/10T1/2 clone 8細胞、OVCAR10細胞、7404細胞 Mono-Mac-6細胞系相關產(chǎn)品:KP-N-NS細胞、OSA細胞、P 815細胞 Hs27細胞系相關產(chǎn)品:K299細胞、OS-732細胞、HCC-44細胞 MDA-436細胞系相關產(chǎn)品:RKOAS451細胞、BNL-CL.2細胞、HUT28細胞 PLC-8024細胞系相關產(chǎn)品:aTC1-6細胞、BT-B細胞、AMC-HN8細胞 3LL細胞系相關產(chǎn)品:HT-22細胞、PA-TU S細胞、SH-SY5Y Parental細胞 3LL細胞系相關產(chǎn)品:HT-22細胞、PA-TU S細胞、SH-SY5Y Parental細胞 MV522細胞系相關產(chǎn)品:PANC-28細胞、MCF-10A細胞、JROECL 33細胞 143 B細胞系相關產(chǎn)品:NCI-SNU-407細胞、ARO-81細胞、SKM-1細胞 SNU886細胞系相關產(chǎn)品:Huh 7.5細胞、SNU-719細胞、Hu-P-T3細胞 LM8細胞系相關產(chǎn)品:ECV 304細胞、PK-13細胞、Centre Antoine Lacassagne-62細胞 UMNSAH/DF-1細胞系相關產(chǎn)品:NCM-460細胞、NCIH1666細胞、H-1993細胞 NCI-H446細胞系相關產(chǎn)品:WM 451-Lu細胞、TALL1細胞、H-226細胞 BMSC/hBMSCs細胞系相關產(chǎn)品:NCI-SNU-398細胞、H-820細胞、251MG細胞 HPDLF細胞系相關產(chǎn)品:HCC2935細胞、MLO-Y4細胞、J774 A.1細胞 HO1-N1細胞系相關產(chǎn)品:SU-DHL-8細胞、Dakiki細胞、YH-13細胞 TM3細胞系相關產(chǎn)品:HRCEC細胞、NS653細胞、HSC-1細胞 HT22細胞系相關產(chǎn)品:Ramos細胞、Kato-III細胞、MDA-MB453細胞 210RCY3-Ag1.2.3細胞系相關產(chǎn)品:C32 [Human melanoma]細胞、QSG-7701細胞、NCIH650細胞 NCI-SNU-1040細胞系相關產(chǎn)品:DHL-2細胞、NIE 115細胞、H-1417細胞 HEC-151細胞系相關產(chǎn)品:HepG2-luc細胞、H358細胞、T2 (174 x CEM.T2)細胞 U118MG細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H2141細胞、TCCSUP細胞、SNU-878細胞 MDAMB175細胞系相關產(chǎn)品:FCCH1018細胞、Reuber H-35細胞、H292細胞 CNE2細胞系相關產(chǎn)品:WEHI 3細胞、HuPT3細胞、ECV細胞 SUPT-1細胞系相關產(chǎn)品:RIN14B細胞、Hs852T細胞、Cates 1B細胞 KMS26細胞系相關產(chǎn)品:Kuramochi細胞、NCI-441細胞、3T3 Swiss Albino細胞 P30/Ohkubo細胞系相關產(chǎn)品:OVCAR 433細胞、SUM 149細胞、CEM T4細胞 PTK2細胞系相關產(chǎn)品:JIII細胞、OVCAR3細胞、MDA-MB-435 S細胞 EAC-E2G8細胞系相關產(chǎn)品:OVCAR3細胞、TM-3細胞、A9 (Hamprecht)細胞 Hs 600.T細胞系相關產(chǎn)品:B 95.8細胞、SuDHL 1細胞、H1963細胞 LAN5細胞系相關產(chǎn)品:SW 1463細胞、293GP細胞、H295細胞 AZ521細胞系相關產(chǎn)品:3T6 Swiss Albino細胞、X63Ag8-653細胞、Uhth-74細胞 Jeko1細胞系相關產(chǎn)品:Mel-RM細胞、MMVECs細胞、ChaGo-K1細胞 NCI-SNU-1細胞系相關產(chǎn)品:HCC-78細胞、MGSMC細胞、MH7A細胞 SBC-5細胞系相關產(chǎn)品:SACC-LM細胞、Soleus clone 8細胞、253J-Bladder-V細胞 T241細胞系相關產(chǎn)品:JeKo 1細胞、VMCUB1細胞、MRC5細胞 NCIH1184細胞系相關產(chǎn)品:AU-565細胞、H498細胞、H-847細胞 KYSE410細胞系相關產(chǎn)品:PTK-1細胞、HOS (TE85, Clone F5)細胞、WPE-int細胞 Glioma-261細胞系相關產(chǎn)品:BHP 10-3細胞、H2141細胞、COLO 205細胞 U-937細胞系相關產(chǎn)品:MPC 11細胞、JM細胞、Epstein-Barr-2細胞 RKOE6細胞系相關產(chǎn)品:SUM 190PT細胞、BCECs細胞、BC-3-H-I細胞 LNCaP-Clone-FGC細胞系相關產(chǎn)品:H1954細胞、3T6 Swiss Albino細胞、Tj-905細胞 COLO 684細胞系相關產(chǎn)品:NCI-SNU-620細胞、AtT-20細胞、SKMEL2細胞 MOLM-14細胞系相關產(chǎn)品:C-643細胞、OCI-Ly07細胞、PANC0203細胞 HKBML細胞系相關產(chǎn)品:HL-1細胞、8226細胞、SW 962細胞 COLO 678細胞系相關產(chǎn)品:OVCA-432細胞、NCIH295R細胞、Panc-1-P細胞 H-II-E-C3細胞系相關產(chǎn)品:beta-TC6細胞、MDCK-2細胞、NE1細胞 HCC1954 BL細胞系相關產(chǎn)品:Sun Yat-sen university Ophtalmic center-Retinoblastoma 50細胞、HPC-Y5細胞、SW 900細胞 C-Lu-65細胞系相關產(chǎn)品:CMT-167細胞、AU565細胞、RH7777細胞 KASUMI1細胞系相關產(chǎn)品:9L細胞、Tca-8113細胞、NCI-H295R細胞 NOZC-1細胞系相關產(chǎn)品:F442A細胞、MFE-280細胞、Hs 636.T細胞 NCI-H1915 epithelioid cells人非小細胞肺癌細胞系 HRVEC細胞系相關產(chǎn)品:CCK-81細胞、COLO_320DM細胞、L-6細胞 HUCEC細胞系相關產(chǎn)品:RKO細胞、SW 1088細胞、MGHU1細胞 SU 86.86細胞系相關產(chǎn)品:UWB1.289細胞、Hs683T細胞、HUT28細胞 A10細胞系相關產(chǎn)品:SK-MEL2細胞、526-mel細胞、GFP-Olig2細胞 "
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