"BxPC-3 epithelioid cells人原位胰腺腺癌細(xì)胞系 細(xì)胞背景資料:這個(gè)細(xì)胞株不表達(dá)囊腫性纖維化跨膜電導(dǎo)調(diào)節(jié)子(CFTR)。CFTR陽(yáng)性的細(xì)胞株是Capan-1(ATCCHTB-79)。 細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣 貼壁消化難題:1,先用PBS 把細(xì)胞洗兩遍,使瓶?jī)?nèi)沒(méi)有血清了,減少對(duì)胰酶的中和,然后用新配的0.25%的胰酶加入3ml左右,放在37度,然后可以在細(xì)胞有些消化下來(lái)時(shí),拿著瓶口,運(yùn)用手腕的力量輕輕震蕩瓶?jī)?nèi)液體,這樣細(xì)胞很快就下來(lái)了,還不需要吹打,分散也均勻;2,成團(tuán)、絮狀:消化液里加入edta可以減少細(xì)胞成團(tuán)的現(xiàn)象,血清可以終止胰酶的作用,如果是進(jìn)口血清的話也能終止edta的作用。用胰酶消化后胰酶可以倒掉,也可以不倒,直接加血清終止,如果消化液中加入了edta的話,就要將消化液倒干凈,如果細(xì)胞貼壁要求不是很嚴(yán)格的話,一般不需要進(jìn)行離心。鼻咽癌細(xì)胞的貼壁能力很強(qiáng),用0.5%胰酶(含0.1%EDTA)一般要消化12~15min。用PBS洗滌時(shí)要洗凈殘余的培養(yǎng)基,加入胰酶后在培養(yǎng)箱中消化(避免細(xì)胞室溫下受損以及在此溫度時(shí)胰酶活性最強(qiáng))至細(xì)胞收縮變圓(可顯微鏡下觀察)且有少許細(xì)胞脫落(有流下來(lái)的趨勢(shì)),隨后立即棄去胰酶(如果脫落的細(xì)胞很多且需要大量細(xì)胞實(shí)驗(yàn),則不能棄去胰酶),加入培養(yǎng)基仔細(xì)吹打(不能用無(wú)血清培養(yǎng)基或者PBS替代,否則細(xì)胞聚集成團(tuán)塊或絮狀)。一般我都離心一次棄去上清(去除殘留的胰酶及漂浮的死細(xì)胞或細(xì)胞碎片);消化過(guò)度:馬上用培養(yǎng)基中和,用吸管吹打細(xì)胞,收集全部的細(xì)胞到以無(wú)菌的離心管中800RPM 3分鐘。棄上清,用全培重懸,換新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng),狀態(tài)不好的細(xì)胞在培養(yǎng)的過(guò)程中會(huì)死亡脫落,在換液的時(shí)候可以清除掉! IM-95細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-204細(xì)胞、AMJ2-C8細(xì)胞、JB6 Cl 30-7b細(xì)胞 MHCC97L細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MESSADX5細(xì)胞、COLO 741細(xì)胞、CEM-C7細(xì)胞 RKO_AS45細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCL-H548細(xì)胞、X63-Ag8.653細(xì)胞、Saos2細(xì)胞 細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁 BxPC-3 epithelioid cells人原位胰腺腺癌細(xì)胞系 細(xì)胞物種來(lái)源:人源或鼠源等其它物種來(lái)源 細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 最近在培養(yǎng)細(xì)胞時(shí),發(fā)現(xiàn)其狀態(tài)不是很好,很容易扎堆生長(zhǎng),用胰酶消化的時(shí)候也是一團(tuán)一團(tuán)地被消化下來(lái),很難把它們吹散成一個(gè)一個(gè)細(xì)胞。而且長(zhǎng)得也挺快也挺不均勻的,傳代的第二天,有些地方就長(zhǎng)得滿滿的了。想請(qǐng)教一下這是為什么呢?你好,我養(yǎng)的細(xì)胞和你一樣,消化下來(lái)也是一團(tuán)的,但吹打以后就沒(méi)有這樣的情況了。建議你分皿前還是要吹勻,分皿后在鏡下看一看,移動(dòng)培養(yǎng)皿的時(shí)候盡量動(dòng)作輕,避免晃動(dòng)。細(xì)胞生長(zhǎng)挺快,那么細(xì)胞的增殖能力應(yīng)該較強(qiáng)。胰酶消化成團(tuán)的問(wèn)題我覺(jué)得有以下幾種可能:一、細(xì)胞消化后吹打不均勻,造成細(xì)胞成團(tuán)生長(zhǎng):二、細(xì)胞細(xì)化太過(guò),細(xì)胞成片脫落,吹打時(shí)沒(méi)有受力點(diǎn),細(xì)胞聚團(tuán)生長(zhǎng)。解決辦法:根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)的情況進(jìn)行多次消化,將同次消化下來(lái)的細(xì)胞放在一個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)。貼壁細(xì)胞傳代培養(yǎng):一般步驟為:真空泵吸走培養(yǎng)基,1XPBS漂洗兩次,加入1mlEDTA-Tripsin(100mm皿為例),37度放置數(shù)分鐘,輕拍培養(yǎng)瓶使細(xì)胞自瓶壁脫落,加入適量血清,以吸管上下吸放數(shù)次以打散細(xì)胞團(tuán)塊,離心后加入新鮮培養(yǎng)基,按比例轉(zhuǎn)移至新皿。細(xì)胞的傳代最重要的是胰酶處理時(shí)間,若胰酶處理太久,容易造成細(xì)胞貼壁不緊,顯微鏡下觀察立體感不強(qiáng),嚴(yán)重的時(shí)候甚至?xí)斐杉?xì)胞死亡。我談?wù)剛€(gè)人經(jīng)驗(yàn):HepG-2、A549、Hela、SGC-7901幾種癌細(xì)胞處理時(shí)間可適當(dāng)放長(zhǎng),一般處理5-6min,C2C12、COS-7、NIH-3T3比較容易脫落,2min足矣,P19Cl6和293細(xì)胞貼壁不緊,可在PBS漂洗后,直接換新鮮培養(yǎng)基打散。 細(xì)胞傳代方法:消化5-10分鐘。1:2。3天內(nèi)可長(zhǎng)滿。 Simpson細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RERFLCMS細(xì)胞、TE-9細(xì)胞、UMRC-2細(xì)胞 U251-MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Leukemia L1210細(xì)胞、DMS-153細(xì)胞、CCD33Co細(xì)胞 COLO_320DM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HANK-1細(xì)胞、SUDHL-8細(xì)胞、H22細(xì)胞 OCI-Ly 19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-HEP-1細(xì)胞、UCLA RO-81-A-1細(xì)胞、J 82細(xì)胞 RL-95-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-ES-1細(xì)胞、Y3-Ag123細(xì)胞、SUDHL2細(xì)胞 細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明:細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系 BxPC-3 epithelioid cells人原位胰腺腺癌細(xì)胞系 細(xì)胞生長(zhǎng)特性:貼壁生長(zhǎng) 細(xì)胞形態(tài)特性:上皮樣 細(xì)胞接收后的操作流程與注意事項(xiàng):1)如果細(xì)胞為貼壁細(xì)胞,而收到時(shí)呈懸浮或者部分懸浮的狀態(tài),請(qǐng)將懸浮的細(xì)胞即時(shí)離心,加15%血清的完全培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)3天;同時(shí)原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細(xì)胞更換為15%血清的完全培養(yǎng)基培養(yǎng)3天。3天后若原瓶或者新瓶中的細(xì)胞都沒(méi)有出現(xiàn)增值而是繼續(xù)脫落死亡,請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系實(shí)驗(yàn)室技術(shù)人員會(huì)跟進(jìn)解決;2)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢;適當(dāng)提高血清濃度(最高不能超過(guò)20%),或可根據(jù)該細(xì)胞生長(zhǎng)密度,考慮胰酶消化后,轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng);3)生長(zhǎng)不均:貼壁細(xì)胞若出現(xiàn)分布不均,成島狀生長(zhǎng),可將細(xì)胞進(jìn)行消化,重懸打散細(xì)胞,加入新鮮培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)。 CAL 39細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MM1S細(xì)胞、NCI-H1522細(xì)胞、MMAc.SF細(xì)胞 MM1.S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TKB1細(xì)胞、LM8細(xì)胞、V-79細(xì)胞 Mv1.Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB-361細(xì)胞、H1975細(xì)胞、P3X63細(xì)胞 Jeko1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mel-RM細(xì)胞、MMVECs細(xì)胞、ChaGo-K1細(xì)胞 NB.4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FHL 124細(xì)胞、OV-90細(xì)胞、FDCP1細(xì)胞 HDQP1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tissue Culture-1細(xì)胞、HuP-T4細(xì)胞、Ect1/E6E7細(xì)胞 LICR-LON-HN6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NW-38細(xì)胞、HOP-62細(xì)胞、H2023細(xì)胞 DMS-53細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPDEC細(xì)胞、Hs 695.T細(xì)胞、HL-7702細(xì)胞 NCI-522細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SR細(xì)胞、He La細(xì)胞、TE14細(xì)胞 HFL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HeLaS3細(xì)胞、hTERT RPE-1細(xì)胞、SKLU-1細(xì)胞 BxPC-3 epithelioid cells人原位胰腺腺癌細(xì)胞系 DMS273細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CF PAC-1細(xì)胞、CC-LP-I細(xì)胞、P-815細(xì)胞 C3H/10T1/2-clone8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MSF細(xì)胞、SW-962細(xì)胞、NSC-34細(xì)胞 T-98細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKml2細(xì)胞、MKN-28細(xì)胞、MDCK Type II細(xì)胞 TOV112D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MKN7細(xì)胞、EB1細(xì)胞、HIC細(xì)胞 Hs 281.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO-320-DM細(xì)胞、NCM460細(xì)胞、ARH-77細(xì)胞 NCI-H2085細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L-6細(xì)胞、H-7721細(xì)胞、HT55細(xì)胞 NCI-H2085細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L-6細(xì)胞、H-7721細(xì)胞、HT55細(xì)胞 P3/X63/Ag8.653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE-5細(xì)胞、CTLL2細(xì)胞、CD18/HPAF細(xì)胞 hEM15A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2591細(xì)胞、U-251_MG細(xì)胞、M-14細(xì)胞 M-O7e細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCE-T細(xì)胞、EFO27細(xì)胞、NCIH548細(xì)胞 DV-90細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Eca-109細(xì)胞、Wayne State University-Head and Neck 13細(xì)胞、Duck embryo細(xì)胞 Hep 3B2_1-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SMMC 7721細(xì)胞、QGP 1細(xì)胞、HEH2細(xì)胞 NCIH650細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:K7M2 wt細(xì)胞、T 24細(xì)胞、MDA-361細(xì)胞 TK-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TM3細(xì)胞、PC-3M細(xì)胞、GLC-15細(xì)胞 Intestinal Porcine Epithelial Cell line-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR-5細(xì)胞、A-101D細(xì)胞、FCCH1018細(xì)胞 FHs74 Int細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HRC-99細(xì)胞、Med 283細(xì)胞、LO2細(xì)胞 Panc 3.27細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:J774細(xì)胞、P3JHR-1細(xì)胞、HS852.T細(xì)胞 Glioma-261細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BHP 10-3細(xì)胞、H2141細(xì)胞、COLO 205細(xì)胞 Hs 821.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RH-35細(xì)胞、SK Mel 24細(xì)胞、Lilly Laboratories Cell-Porcine Kidney 1細(xì)胞 MLE12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KATO 3細(xì)胞、Hs 606.T細(xì)胞、SK-ES1細(xì)胞 M-NFS-60細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ACC-2細(xì)胞、EOL1細(xì)胞、Caco-2 BBe細(xì)胞 CCRFCEM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MM-1S細(xì)胞、SR786細(xì)胞、HTori:3細(xì)胞 RPMI8226/S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HFL-1細(xì)胞、SMA-560細(xì)胞、BEL7404細(xì)胞 SCCVII細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-373MG ATCC細(xì)胞、Vx-2細(xì)胞、SiHa細(xì)胞 MDA-436細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RKOAS451細(xì)胞、BNL-CL.2細(xì)胞、HUT28細(xì)胞 EB-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 1783細(xì)胞、SK-NM-C細(xì)胞、Y3-Ag 1.2.3細(xì)胞 NCI-SNU-119細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NRK clone 49F細(xì)胞、MDAMB134細(xì)胞、H-2172細(xì)胞 ZR75-30細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1522細(xì)胞、SCC VII細(xì)胞、HEC1-B細(xì)胞 SPCA-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs-688A-T細(xì)胞、BC-020細(xì)胞、CAL62細(xì)胞 McG-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Y3.AG.1.2.3細(xì)胞、HPDEC細(xì)胞、ECV-304細(xì)胞 MRC9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HLEB-3細(xì)胞、NCI-H226細(xì)胞、NCIH510細(xì)胞 LIM 1215細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-87細(xì)胞、DF1細(xì)胞、H1573細(xì)胞 KYSE-270細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCA 38細(xì)胞、NCI-H2108細(xì)胞、GM02132C細(xì)胞 MCF-7ADR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Walker-Ca.256細(xì)胞、KASUMI1細(xì)胞、EJ 138細(xì)胞 SL-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C22 (Clara)細(xì)胞、H-2342細(xì)胞、HBL100細(xì)胞 H920細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HG2855細(xì)胞、SPCA-1細(xì)胞、MA-c細(xì)胞 HCC0070細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1395細(xì)胞、TO 175.T細(xì)胞、DHL-16細(xì)胞 NCI-H2108細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO 684細(xì)胞、D6P2T細(xì)胞、University of Arizona Cell Culture-893細(xì)胞 Tn 5B1-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2029細(xì)胞、OV1/P細(xì)胞、Centre Antoine Lacassagne-78細(xì)胞 ZR7530細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Caco2-BBE細(xì)胞、293-F細(xì)胞、H-1092細(xì)胞 VA-ES-BJ細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-Col-1細(xì)胞、SW480細(xì)胞、H.Ep. No. 2細(xì)胞 MOLM-16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:McA-RH8994細(xì)胞、Hs 766T細(xì)胞、L-428細(xì)胞 N-Tera-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RBL-2H3細(xì)胞、IEC 18細(xì)胞、PC-3M IE8細(xì)胞 NCIH1436細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RD-ES細(xì)胞、NR8383細(xì)胞、HLEC細(xì)胞 Becker細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WI38細(xì)胞、L cell line細(xì)胞、PCI:SG231細(xì)胞 SKHEP1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Rat 1細(xì)胞、Human Liver-7702細(xì)胞、KHYG1細(xì)胞 GM-3573細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD18細(xì)胞、COLO-394細(xì)胞、CCRF-CEM C7細(xì)胞 IOSE29細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C32r細(xì)胞、SCC7細(xì)胞、CORL26細(xì)胞 Transformed C3H Mouse Kidney-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-1088細(xì)胞、NK92-MI細(xì)胞、HAEC細(xì)胞 TGW-I-nu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NOK細(xì)胞、N1E-115細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-157細(xì)胞 RBMEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:mRTEC細(xì)胞、Hs 729細(xì)胞、Ramos(RA1)細(xì)胞 BxPC-3 epithelioid cells人原位胰腺腺癌細(xì)胞系 LUDLU1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCILY3細(xì)胞、CT-26 WT細(xì)胞、K562細(xì)胞 TO175T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CMT167細(xì)胞、CLONE M3細(xì)胞、HEK-293-FT細(xì)胞 V79-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MM96L細(xì)胞、BNL.CL2細(xì)胞、MMAc.SF細(xì)胞 Mv1.Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB-361細(xì)胞、SV40-MES13細(xì)胞、CX-1細(xì)胞 "
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