"Nb2 Cell:大鼠淋巴瘤細胞系
細胞形態(tài):淋巴母細胞樣
細胞生長:懸浮
細胞背景資料:惡性淋巴瘤;雄性;Nb
Hs.27細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-526細胞、Hs 578Bst細胞、Nb 2細胞
SW 480細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Balb/c 3T3細胞、CAL120細胞、NCI/ADR-RES細胞
Hs940T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A549/ATCC細胞、OCI AML5細胞、SGC-996細胞
RPMI-2650細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BC-021細胞、NHLF細胞、H-1648細胞
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
Nb2 Cell:大鼠淋巴瘤細胞系
細胞消化過程總結(jié):其實絕大部分細胞消化的時候是只要用胰酶潤洗一遍即可,吸去胰酶后,殘留的那些無法計算體積的附著在細胞表面的微量胰酶在37度一般不到2min足夠消化細胞(絕大部分1min不到)。對于這些細胞原則上不要用胰酶孵育細胞,連續(xù)這樣傳代,對細胞傷害很大。簡單的程序是PBS潤洗吸去,胰酶潤洗吸去,然后37度消化。2,什么算是消化好了呢?不是細胞全部成間隔分布很離散的單個圓形才算消化好了,一般你肉眼觀察貼壁細胞層,只要能移動了,多半呈沙壯移動,其實已經(jīng)可以了,很多人喜歡把細胞消化或者吹打成完全分離細胞,這是沒有必要的。一般能移動了,說明細胞與培養(yǎng)基質(zhì)材料的附著已經(jīng)消失了,細胞之間的附著也已經(jīng)消失了,細胞已經(jīng)獨立分布了(雖然沒有呈現(xiàn)很廣的離散分布)。這個時候應(yīng)該停止消化,不要等到看到鏡下所有細胞都分離得非常好,間隙很大,才停止。細胞就是完全成單個細胞懸液,之后在貼壁的過程中仍然會聚集,這個是貼壁培養(yǎng)的細胞,尤其是腫瘤細胞的一個特性,無論死活的細胞都是如此,你可以嘗試,準備100%的單個細胞懸液,貼壁后觀察細胞,仍然是幾個幾個細胞聚集在一起。一些懸浮培養(yǎng)細胞也是如此,容易聚集,不要去嘗試過幾個小時就拿出來吹打成單細胞懸液(不要笑,這個是初養(yǎng)懸浮細胞的人常犯的錯誤,以為懸浮培養(yǎng)就是一個一個分開)。細胞只要能從基質(zhì)上脫離下來,這個時候即使是成片的(比如Calu-3細胞),吹打不超過20次后(一般10次即可),成小規(guī)模聚集(10個細胞左右),是正常的,不要試圖再去延長消化時間,或者像有的同學(xué)那樣吹打1h,等待單細胞懸液出現(xiàn)。比較難消化的細胞(潤洗方法5min還不能消化),比如HCT15, LS411和KM12,這樣的細胞一般需要用少量胰酶孵育,但也不需要很多,一般100mm dish,一次最多加入500ul,就足夠了,一般我加300ul。即使這樣難消化的細胞,一般不超過5min,即可見細胞成片移動,就應(yīng)該停止消化。一些正常細胞也會有難消化的時候,比如tsDC細胞,但也只要用少量胰酶孵育,3min左右即可看到成片沙狀移動。
細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
培養(yǎng)細胞真的不難,最關(guān)鍵幾點:1)所有的東西使用,如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進口的,真的很難相信你會把細胞養(yǎng)壞;2)動作要快,胰酶消化,換液什么,細胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外,要掌握好胰酶消化時間,所謂的細胞狀態(tài)差,很多時候是傳代的原因;3)有時間的話,需要細胞計數(shù),傳相應(yīng)數(shù)目的細胞到培養(yǎng)皿中,可以大致清楚細胞的生長曲線,不會臨時要處理,手足無措;4)要做什么心里要非常清楚,合理安排時間,傳代細胞的實驗穿插進行,可以節(jié)省很多時間,也不會耽誤別人的實驗;5)個人的實驗器具自己收一套,不要和別人混用,最近換了什么新的東西稍微記一下,試劑一旦懷疑污染,馬上丟;6)傳代細胞不能進去太多人,避免相互干擾。每天對待細胞比孝敬爹媽還用心,那真是捧在手里怕碎了,含在嘴里怕化了,看在眼里怕丟了,培養(yǎng)細胞時有哪些經(jīng)驗教訓(xùn)可以分享呢?1)嚴格無菌操作,多噴噴酒精,要是對滅菌的東西不放心,自己包自己送自己烘干;2)不要和別人共用試劑耗材,自己準備一套;3)有可能的話在拿到新細胞的時候做好支原體衣原體檢測;4)水浴鍋很臟,生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟,勤換(滅菌水加進去);5)晚上離開的時候給傳代細胞照紫外,超凈臺是用完就開;6)是同一時間就你一個人在用傳代細胞在養(yǎng)細胞。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
G-292 clone A141B1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EB2細胞、NCIH244細胞、LLC1細胞
GM03190A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-253細胞、Fu97細胞、TEC細胞
SLK細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM-52-PE細胞、SK_N_BE2C細胞、CAMA細胞
H341細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MTEC1細胞、Radiation Effects Research Foundation-Lung Cancer-MS細胞、MDAMB435細胞
COV 504細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HGBEC細胞、NCI-H520細胞、L-132細胞
細胞生長特性:懸浮
Nb2 Cell:大鼠淋巴瘤細胞系
細胞復(fù)蘇相關(guān)注意事項:1.取細胞的過程中注意帶好防凍手套,護目鏡。此項尤為重要,細胞凍存管可能漏入液氮,解凍時凍存管中的氣溫急劇上升,可導(dǎo)致爆炸。2.凍存液的問題:凍存液的配置已是常識,在這里不作詳述,但二甲基亞砜(DMSO )對細胞不是完全無毒副作用,在常溫下,二甲基亞砜對細胞的毒副作較大,因此,必須在1-2min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復(fù)蘇溫度太慢,會造成細胞的損傷,二甲基亞砜(DMSO)選擇進口產(chǎn)品。3.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細胞解凍后二甲基亞砜濃度較高,注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度,以減少對細胞的損傷。4.離心問題:目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng),第二天換液。因為離心的目的是兩個,去除DMSO,去除死細胞,這個是標(biāo)準流程,但對一般人來說,把握不好離心轉(zhuǎn)速和時間,轉(zhuǎn)的不夠活細胞沉底的少,細胞就全被扔掉了,轉(zhuǎn)過了活細胞會受壓過大,死亡。此外在操作過程中容易污染,所以不推薦。另一種說法為細胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO),DMSO對細胞有一定的毒副作用,所以須將離心后的液體前倒凈,且一定倒干凈。我在試驗中按照常規(guī)的離心分裝的方法進行復(fù)蘇,結(jié)果無異常。5.細胞貼壁少的問題:教科書中說明凍存細胞解凍時1ml細胞液要加10ml-15ml培養(yǎng)液,而在我的試驗中的經(jīng)驗總結(jié)為培養(yǎng)基越少細胞越容易貼附。6.復(fù)蘇細胞分裝的問題:試驗中我的經(jīng)驗總結(jié)為復(fù)蘇1管細胞一般可分裝到1-2只培養(yǎng)瓶中,分裝過多,細胞濃度過低,不利于細胞的貼壁。7.加培養(yǎng)基的量放入問題:這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度,從如果你加培養(yǎng)基的太少,那么DMSO的濃度就會比較大,就會影響細胞生長,從以前的資料來看,DMSO的濃度在小于0.5%的時候?qū)σ话慵毎麤]有什么影響,還有一個說法是1%。所以如果你的凍存液的濃度是10%DMSO的話那么加10ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
OVCAR-8/ADR細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Psi2 DAP細胞、MDAMB134VI細胞、X63-Ag8-653細胞
HDLM2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT-115細胞、HIC細胞、Duke University 4475細胞
Hs839.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCC154細胞、VMM39細胞、Becker細胞
RIN-14B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Uhth-74細胞、TE11細胞、TE10細胞
SK HEP-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK-293-H細胞、HTR8細胞、HTori 3細胞
HCC 94細胞系相關(guān)產(chǎn)品:624mel細胞、SK-MEL 28細胞、hTERT RPE-1細胞
NCI-446細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RM1細胞、H1522細胞、Intestinal Porcine Epithelial Cell line-1細胞
Nb2 Cell:大鼠淋巴瘤細胞系
MDAMB436細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-1990細胞、UMR-106細胞、SJRH-30細胞
MLA-144細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1963細胞、WEHI 231細胞、P3X63Ag8653細胞
H498細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MES-23.5細胞、NCI-H676細胞、Mel-MeWo細胞
SCC 4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JTC-39細胞、RSC96細胞、Z-138細胞
JeKo-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UM2細胞、BCP-1細胞、H1734細胞
VMRCRCZ細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BE(2)-C細胞、SL1細胞、NU-GC-3細胞
UPCISCC090細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LA-4 [Mouse lung adenoma]細胞、2PK-3細胞、3T3F442A細胞
Vx2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:697細胞、NCIH2196細胞、Psi-2 DAP細胞
COLO 206細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1650細胞、MC-3T3-E1細胞、HEC-1-A細胞
COLO 206細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1650細胞、MC-3T3-E1細胞、HEC-1-A細胞
COLO679細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EPC細胞、Hs-940細胞、SCH細胞
QGY7703細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Jurkat77細胞、PK-15細胞、SuDHL 5細胞
Madison 109細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-BL2141細胞、SK RC 52細胞、H510細胞
NCI-H1184細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H748細胞、L363細胞、Hs 870.T細胞
P30-OHK細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA468細胞、KU812-F細胞、H441細胞
P-36細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCT_116細胞、Chinese Hamster Ovary細胞、VM-CUB-1細胞
Ku812F細胞系相關(guān)產(chǎn)品:159PT細胞、GC-2細胞、CD-18細胞
Central Adrenergic TH-expressing a細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MPC-11細胞、H-128細胞、LAPC4細胞
H-2009細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NTera 2細胞、SJSA-1細胞、Caco2-BBE細胞
Centre Antoine Lacassagne-62細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MESSA細胞、IHC-ST1細胞、CEM-CCRF (CAMR)細胞
BRL3A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WEHI-164細胞、NTera-2D1細胞、COLO-205細胞
HOC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2073細胞、293S細胞、H1648細胞
TE8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RASMC細胞、NKM-1細胞、PLA-801D細胞
TOV112D細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MKN7細胞、EB1細胞、HIC細胞
RPMI8226細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TERT-RPE1細胞、PLA801-95C細胞、LIPF178C細胞
Hs 742.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:High5細胞、H-1435細胞、B16 subline B78細胞
HEK293F細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUDHL-2細胞、P3 NS1 Ag4/1細胞、SupT1細胞
SUPT-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RIN14B細胞、Hs852T細胞、Cates 1B細胞
U-87MG ATCC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BJ [Human fibroblast]細胞、SW 1222細胞、HT-1376細胞
T-47-D細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BTI-TN5B1-4細胞、Panc_08_13細胞、KMST6細胞
Roswell Park Memorial Institute 1846細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PLC PRF 5細胞、HuT-102細胞、GM02219細胞
BJAB細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO 320 DM細胞、SK-N-BE(2)-M17細胞、tdott細胞
LS 123細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LS1034細胞、GRSL細胞、YTMLC-90細胞
MeSoTheliOma-211H細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BIU-87細胞、Instituto Biologico-Rim Suino-2細胞、SU-DHL-1細胞
HEM-L細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Z310細胞、SU.86.86細胞、ECC-12細胞
SNU1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:K-1735細胞、SNU449細胞、MM-1S細胞
HFE-145細胞系相關(guān)產(chǎn)品:VSMC細胞、H1876細胞、T 84細胞
SHI1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RAG細胞、U266 Bl細胞、LIM1215細胞
7404細胞系相關(guān)產(chǎn)品:4-1st細胞、Hs 706.T細胞、Hs 821.T細胞
Tu 177細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KP-4細胞、NCI-SNU-1細胞、H-82細胞
SHSY-5Y細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEL-1細胞、SKLMS-1細胞、Human Corneal Epithelial cells-Transformed細胞
GTL16細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1184細胞、H-1341細胞、MBVP細胞
L-cells細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UPCI-SCC-090細胞、HCT 116細胞、Hopkins-92細胞
Nb2 Cell:大鼠淋巴瘤細胞系
G-Olig2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C3H10T1-2細胞、SNUC1細胞、Calu 6細胞
CTV1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Intestinal Epithelioid Cell line No. 6細胞、NEC細胞、PANC.1細胞
SK-N-BE(2)-M17細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MAntle cell VERona-1細胞、Mono-Mac-1細胞、J111細胞
IHC-ST1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Be-Wo細胞、H-3255細胞、HPC-Y5細胞
TGW-nu-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hep2細胞、SW 626細胞、SF-539 BT細胞
EFM192B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO-394細胞、NCI-H2227細胞、Helacyton gartleri細胞
Hs888T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C4 I細胞、LPC-H12細胞、GOS3細胞
NCI-H2286細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SBC-5細胞、OVCAR.4細胞、NTera2/D1細胞
MBVP細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO-16細胞、Human Corneal Endothelial Cells-12細胞、SK-N-DZ細胞
MDA-436細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RKOAS451細胞、BNL-CL.2細胞、HUT28細胞
P-388D1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OV1063細胞、L-Wnt3A細胞、Neuro 2a細胞
TOV-112細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-626細胞、143B細胞、MyLa2059細胞
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上海賓穗生物科技有限公司 是一家集研發(fā)、生產(chǎn)、銷售與服務(wù)于一體的專業(yè)生物制品和化學(xué)品供應(yīng)商。公司總部位于上海市莘莊工業(yè)區(qū),擁有現(xiàn)代化辦公大樓、標(biāo)準實驗室與生產(chǎn)廠房。上海賓穗生物科技有限公司擁有一支由教授和博士為核心的技術(shù)團隊,提供超過100000的生物、化學(xué)產(chǎn)品,產(chǎn)品涵蓋化學(xué)、醫(yī)藥、材料、能源、生物等科研領(lǐng)域。公司秉承“客戶至上、服務(wù)一流”的發(fā)展理念,致力于將優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品和服務(wù)提供給客戶。上海賓穗生物科技有限公司整合眾多的優(yōu)勢市場資源,以匠心服務(wù)廣大客戶,我們可以為客戶提供Binsui、TCI等國內(nèi)外各種品牌的高品質(zhì)試劑產(chǎn)品,充分滿足客戶的試劑需求。