"RPMI-2650 Cell:人鼻腔上皮細胞系
細胞形態(tài):上皮細胞樣
細胞生長:貼壁
細胞背景資料:頭頸鱗癌;胸腔積液轉(zhuǎn)移;男性
HEK-293FT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:B16F10細胞、Jiyoye(P-2003)細胞、High 5細胞
RS4-11細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1688細胞、H-292細胞、C-643細胞
HCC44細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH358細胞、SF295細胞、ME1細胞
CALU1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LUDLU1細胞、NCI-HUT-69細胞、H1770細胞
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
RPMI-2650 Cell:人鼻腔上皮細胞系
細胞消化過程總結(jié):其實絕大部分細胞消化的時候是只要用胰酶潤洗一遍即可,吸去胰酶后,殘留的那些無法計算體積的附著在細胞表面的微量胰酶在37度一般不到2min足夠消化細胞(絕大部分1min不到)。對于這些細胞原則上不要用胰酶孵育細胞,連續(xù)這樣傳代,對細胞傷害很大。簡單的程序是PBS潤洗吸去,胰酶潤洗吸去,然后37度消化。2,什么算是消化好了呢?不是細胞全部成間隔分布很離散的單個圓形才算消化好了,一般你肉眼觀察貼壁細胞層,只要能移動了,多半呈沙壯移動,其實已經(jīng)可以了,很多人喜歡把細胞消化或者吹打成完全分離細胞,這是沒有必要的。一般能移動了,說明細胞與培養(yǎng)基質(zhì)材料的附著已經(jīng)消失了,細胞之間的附著也已經(jīng)消失了,細胞已經(jīng)獨立分布了(雖然沒有呈現(xiàn)很廣的離散分布)。這個時候應(yīng)該停止消化,不要等到看到鏡下所有細胞都分離得非常好,間隙很大,才停止。細胞就是完全成單個細胞懸液,之后在貼壁的過程中仍然會聚集,這個是貼壁培養(yǎng)的細胞,尤其是腫瘤細胞的一個特性,無論死活的細胞都是如此,你可以嘗試,準(zhǔn)備100%的單個細胞懸液,貼壁后觀察細胞,仍然是幾個幾個細胞聚集在一起。一些懸浮培養(yǎng)細胞也是如此,容易聚集,不要去嘗試過幾個小時就拿出來吹打成單細胞懸液(不要笑,這個是初養(yǎng)懸浮細胞的人常犯的錯誤,以為懸浮培養(yǎng)就是一個一個分開)。細胞只要能從基質(zhì)上脫離下來,這個時候即使是成片的(比如Calu-3細胞),吹打不超過20次后(一般10次即可),成小規(guī)模聚集(10個細胞左右),是正常的,不要試圖再去延長消化時間,或者像有的同學(xué)那樣吹打1h,等待單細胞懸液出現(xiàn)。比較難消化的細胞(潤洗方法5min還不能消化),比如HCT15, LS411和KM12,這樣的細胞一般需要用少量胰酶孵育,但也不需要很多,一般100mm dish,一次最多加入500ul,就足夠了,一般我加300ul。即使這樣難消化的細胞,一般不超過5min,即可見細胞成片移動,就應(yīng)該停止消化。一些正常細胞也會有難消化的時候,比如tsDC細胞,但也只要用少量胰酶孵育,3min左右即可看到成片沙狀移動。
細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
購買的細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因?研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳,原因比較復(fù)雜,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳;血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳;解凍過程錯誤;冷凍細胞解凍后,加以洗滌細胞和離心;懸渾細胞誤認為死細胞;培養(yǎng)溫度使用錯誤;細胞置于-80℃太久等。建議嚴格參照ATCC的標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程進行細胞復(fù)蘇、凍存等工作。欲將一般動物細胞離心下來,其離心速率應(yīng)為多少轉(zhuǎn)速?欲回收動物細胞,其離心速率一般為300×g(約1O(jiān)OOrpm),5-10分鐘,轉(zhuǎn)速過高或離心時間過長都將造成細胞死亡。合適的離心轉(zhuǎn)速是根據(jù)相對離心力決定。RCF=1.119×105×r×(rpm)2,其中r為離心機轉(zhuǎn)軸中心與離心套管底部內(nèi)壁的距離;rpm為離心機每分鐘的轉(zhuǎn)數(shù);RCF(relative centrifugal force)為相對離心力,以重力加速度g(980.66cm/s2)的倍數(shù)來表示單位。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
HMVEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI H226細胞、MCF12A細胞、H4細胞
NCI-H711細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3/X63/Ag8細胞、BEL-7405細胞、EoL-1-cell細胞
D-324MED細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SF 539細胞、A-875細胞、OE-33細胞
NCIH2106細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM03190細胞、RCF細胞、MN 60細胞
HCC-1954細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CMECs細胞、P3-X63Ag8細胞、EST50細胞
細胞生長特性:貼壁
RPMI-2650 Cell:人鼻腔上皮細胞系
細胞株(系)的使用,為醫(yī)學(xué)研究和測試工作帶來了極大的方便。但細胞的傳代是有限制的,長期連續(xù)傳代的細胞,不僅消耗大量的人力和物力,而且細胞的生長與形態(tài)等會有一定退變或轉(zhuǎn)化,因而細胞失去原有的遺傳特性,有時還會由于細胞污染而造成傳代中斷,種子丟失。因此,在實際工作中常需凍存一定數(shù)量的細胞,以備替換使用。細胞冷凍與復(fù)蘇是細胞培養(yǎng) 室的常規(guī)工作和通用技術(shù)。目前,細胞凍存最常用的技術(shù)是液氮冷凍保存法,主要采用加適量保護劑的緩慢冷凍法凍存細胞。細胞在不加任何保護劑的情況下直接冷凍,細胞內(nèi)外的水分會很快形成冰晶,從而引起一系列不良反應(yīng)。如細胞脫水使局部電解質(zhì)濃度增高,pH值改變,部分蛋白質(zhì)由于上述原因而變性,引起細胞內(nèi)部空間結(jié)構(gòu)紊亂,溶酶體膜由此遭到損傷而釋放出溶酶體酶,使細胞內(nèi)結(jié)構(gòu)成分造成破壞,線粒體腫脹,功能丟失,并造成能量代謝障礙。胞膜上的類脂蛋白復(fù)合體也易破壞引起細胞膜通透性的改變,使細胞內(nèi)容物丟失。如果細胞內(nèi)冰晶形成較多,隨冷凍溫度的降低,冰晶體積膨脹造成細胞核DNA空間構(gòu)型發(fā)生不可逆的損傷,而致細胞死亡。因此,細胞冷凍技術(shù)的關(guān)鍵是盡可能地減少細胞內(nèi)水分,減少細胞內(nèi)冰晶的形成。采用甘油或二甲基亞砜作保護劑,這兩種物質(zhì)分子量小,溶解度大,易穿透細胞,可以使冰點下降,提高細胞膜對水的通透性,且對細胞無明顯毒性。慢速冷凍方法又可使細胞內(nèi)的水分滲出細胞外,減少胞內(nèi)形成冰結(jié)晶的機會,從而減少冰晶對細胞的損傷。
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
OVCAR 433細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO394細胞、SMMC7721細胞、RPMI 8226細胞
UM-RC-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PNEC30細胞、B95.8細胞、Hs832T細胞
MRAEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LNCaP C4-2B細胞、LS-123細胞、RAMSCs細胞
HA1800細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HUSMC細胞、SUDHL-10細胞、K7M2-WT細胞
U266BL細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HP615細胞、RMG1細胞、NOZ細胞
ATDC-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KMST-6細胞、OVCAR-3細胞、MBMEC細胞
MDA-MB-175VII細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2108細胞、SF767細胞、BNL-HCC細胞
RPMI-2650 Cell:人鼻腔上皮細胞系
COLO 829細胞系相關(guān)產(chǎn)品:F81細胞、Swiss3T3細胞、SK-UT-1細胞
BIU-87細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HUT 28細胞、COLO320DM細胞、MDA-MB-468-RED細胞
U266 B1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH727細胞、NHA細胞、H920細胞
HCC-1395細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCaBER細胞、MOLP8細胞、HO1-N1細胞
H-1672細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC3M細胞、Calu-3細胞、SK MEL 28細胞
HOS(TE85)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HAVSMC細胞、NCI-841細胞、NCIH2347細胞
MGSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM 115細胞、Hs675細胞、16HBE14o-細胞
COLO-394細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H810細胞、T2 (174 x CEM.T2)細胞、NBL-12細胞
SUM190PT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PLA-801C細胞、MLE 12細胞、NOMO1細胞
SUM190PT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PLA-801C細胞、MLE 12細胞、NOMO1細胞
Panc_04_03細胞系相關(guān)產(chǎn)品:YD38細胞、J 111細胞、SNU-739細胞
MOLT.4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H295細胞、A2780S細胞、DCS細胞
32D/cl3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H4-II-E-C3細胞、Hs746-T細胞、EM-3細胞
BLO-11細胞系相關(guān)產(chǎn)品:3T3-Swiss細胞、MCF 7B細胞、16HBE細胞
NCI-H841細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BNL.1ME A.7R.1細胞、NOZAWA細胞、Colo16細胞
Caco-2/ATCC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1944細胞、R D細胞、SUD4細胞
BCaP 37細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LA-N-1細胞、PC615.3細胞、AG06814-N細胞
G361mel細胞系相關(guān)產(chǎn)品:VP 267細胞、HCC-202細胞、HPB/ALL細胞
HIEC6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JeKo-1細胞、Ramos-RA1細胞、LNCaP FGC細胞
N87細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HDSMC細胞、Th17細胞、L-M(TK-)細胞
H211細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UCLA-SO-M21細胞、HCa/16A3-F細胞、HGE細胞
OE-33細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MEC1細胞、Hs 934.T細胞、KM12 SM細胞
RT4P細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hep 3B2細胞、DMS153細胞、FRhK-4細胞
MPC-11細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U2OS細胞、SJSA細胞、HIT.T15細胞
hTERT-HPNE細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR-8/ADR細胞、LUDLU1細胞、Lewis lung carcinoma細胞
SKMEL24細胞系相關(guān)產(chǎn)品:32D clone 3細胞、UMNSAH/DF-1細胞、RGC6細胞
LUDLU 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC9204細胞、CCD841CoTr細胞、NPC-TW-039細胞
JB-6 Cl 30細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-343 MG細胞、EC-109細胞、V79細胞
Tca-83細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Centre Antoine Lacassagne-33細胞、NCI-H1648細胞、NCI-H1355細胞
OsACL細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Instituto Biologico-Rim Suino-2細胞、LU65細胞、SUM-159-PT細胞
RPTC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MES13細胞、293A細胞、M.D. Anderson-Prostate Cancer-2b細胞
SV-HUC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Neuro 2a細胞、NCI-UMC-11細胞、NCI-SNU-475細胞
HOP92細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF.7細胞、OCI-Ly03細胞、KYSE-270細胞
L-cell細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC116細胞、TW-039細胞、NCI-H1755細胞
NCI-H711細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3/X63/Ag8細胞、BEL-7405細胞、EoL-1-cell細胞
HCC-1419細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Adeno 293細胞、MCFs細胞、INS-1E細胞
3T6-Swiss albino細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC-9/S1細胞、STC-1細胞、G361細胞
Y-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-2細胞、Panc4.03細胞、HEC251細胞
MCA 38細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MeSoTheliOma-211H細胞、NSI/1-Ag4-1細胞、GC-1spg細胞
OVCA-420細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RIN-m5F細胞、Fetal Rhesus Kidney-4細胞、Pa14C細胞
OVCA-420細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RIN-m5F細胞、Fetal Rhesus Kidney-4細胞、Pa14C細胞
BNL 1MEA.7R.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHO K1細胞、SF17細胞、NCTC 1469細胞
HR-8348細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MV(4;11)細胞、NCI-H441細胞、PLC/PRF5細胞
RPMI-2650 Cell:人鼻腔上皮細胞系
D10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HDLM2細胞、ACC-2細胞、AAV293細胞
MT-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPAC細胞、PANC0813細胞、BBE細胞
THPI細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-N-BE(2C)細胞、NBL-12細胞、HS940細胞
SRA 01/04細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HN4細胞、CEM-0細胞、MC38細胞
MB157細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-1細胞、18G3.cl 1細胞、SK-ChA-1細胞
H1734細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-250細胞、211H細胞、BE2C細胞
AMC-HN-8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BEL7405細胞、HMSC細胞、SKMES-1細胞
NPA細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Rabbit Kidney 13細胞、JB-6細胞、GM16136細胞
MDAPCa2b細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE3細胞、JM1細胞、Lieming Xu-2細胞
A-375.S2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LN-229細胞、H35細胞、HCT 15細胞
U2OS細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hela-Ap-1細胞、BIU-87細胞、KLN-205細胞
HPMEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hela-mock細胞、V79-1細胞、Normal Rat Kidney-52E細胞
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