"NCI-H847 Cell:人肺癌細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞生長：貼壁
細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
H-1618細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PCI:SG-231細(xì)胞、JROECL 33細(xì)胞、BC-019細(xì)胞
RPE-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human Hepatocyte Line 5細(xì)胞、H-1793細(xì)胞、HFLS細(xì)胞
H-711細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM03570細(xì)胞、SNK1細(xì)胞、NIT-1細(xì)胞
MZ-CRC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2030細(xì)胞、KM933細(xì)胞、SUM 102細(xì)胞
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
NCI-H847 Cell:人肺癌細(xì)胞系
細(xì)胞傳代時(shí)消化的問題：可以這樣說，對于需要消化傳代的細(xì)胞，每一次的消化都是對這個(gè)細(xì)胞存活與否，狀態(tài)好與不好最至關(guān)重要的考驗(yàn)。很多同學(xué)都遇到過這個(gè)問題，自己養(yǎng)的細(xì)胞開始的幾代長的還挺好的，可是穿過幾代之后就發(fā)現(xiàn)自己的細(xì)胞，狀態(tài)越來越差勁了。對于這個(gè)問題，可以非?？隙ǖ卣f，你的消化環(huán)節(jié)出問題了。你每一次的消化都讓細(xì)胞受到較大損傷了。所以，越長越差。在消化的過程中，你加入胰酶后，所有細(xì)胞都在被胰酶消化著，但是我們忽視了一個(gè)問題就是，細(xì)胞的生長狀態(tài)是不一樣的，每一個(gè)細(xì)胞的貼壁情況也是不一樣的，有的貼壁牢固，有的貼壁沒有那么牢固的，所以，讓所有的細(xì)胞消化同樣的時(shí)間對細(xì)胞是不公平的，他們受到了差別待遇當(dāng)然會有脾氣啊。我后來對消化的方法進(jìn)行了改良。爭取做到因材施教呵呵。我稱之為“四步消化法”。（以難消化細(xì)胞為例）；具體操作：１)首先不加胰酶，倒掉舊培養(yǎng)基加入少量新培養(yǎng)基洗１-２遍，（這是前奏，即為步，目的是將漂浮著的死細(xì)胞之類盡量洗掉。２)然后再加入少量新培養(yǎng)基直接吹打一遍，這一遍是把貼壁不牢固的細(xì)胞吹打下來。再用培養(yǎng)基洗一遍，兩次所得懸液混合傳入新瓶。即為第二步（你可以將這些傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面胰酶消化過的細(xì)胞對比觀察看誰長的更好一點(diǎn)就知道該細(xì)胞對胰酶的敏感度了。）３)吸干凈瓶內(nèi)剩余液體，加入０.３ml左右的胰酶潤洗一遍，吸掉棄之，再加入１ml左右的胰酶消化。消化的同時(shí)置于顯微鏡下觀察，待細(xì)胞與細(xì)胞之間間隙明顯的時(shí)候立即吸掉胰酶與干凈子彈頭里備用，加入新培養(yǎng)基開始吹打，吹打２-３遍后吸取懸液于試管或新瓶暫存。用２ml左右新培養(yǎng)基洗一遍與前面的混合。（你也可以傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面及前面的做對比。）這是第三步。４)然后把前面剛吸出來的胰酶重新加進(jìn)去瓶里繼續(xù)消化剩余的貼壁牢固的細(xì)胞。當(dāng)然你也可以用新的胰酶，如果你們那比較富裕的話，呵呵。繼續(xù)鏡下觀察，待剩余細(xì)胞間隙明顯，細(xì)胞獨(dú)立開來的時(shí)候，吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基吹打。懸液傳入新瓶培養(yǎng)（根據(jù)實(shí)際情況你自己把握）。這是第四步。其實(shí)還可以有第五步，對于特別難消化的細(xì)胞和對胰酶特別敏感的細(xì)胞的話，你可以繼續(xù)加第五步甚至第六步。為了細(xì)胞更好的狀態(tài)，更漂亮的樣子，沒辦法，你必須分多批多次消化，這樣才能限度地將胰酶對細(xì)胞的損傷降到最低，保證細(xì)胞的狀態(tài)能夠。當(dāng)然了，如果細(xì)胞是屬于那種很容易消化的細(xì)胞，像RAW２６４.７，僅僅第二步就搞定了。就沒必要第三步第四步了。這個(gè)是需要你在實(shí)驗(yàn)中能夠自己用心去體會的。建議你接受一個(gè)新細(xì)胞時(shí)把各步消化的細(xì)胞分別培養(yǎng)起來做比較，去摸索好細(xì)胞對胰酶的要求。便于你后續(xù)實(shí)驗(yàn)的開展。將細(xì)胞消化分成這幾步，除了是為了避免胰酶對細(xì)胞的損傷之外，還有一個(gè)更重要的作用就是，可以程度地把細(xì)胞吹打成單個(gè)單個(gè)的狀態(tài)，不成片不連體。
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中常見問題總結(jié)：１)一般客戶拿到細(xì)胞后，應(yīng)該注意什么？客戶收到細(xì)胞后先不開蓋，放在培養(yǎng)箱靜置若干小時(shí)后(看細(xì)胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況，并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議受收細(xì)胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，顯微鏡下拍細(xì)胞１００X，２００X各一張)，排除細(xì)胞本身污染的情況；收到細(xì)胞未開封，出現(xiàn)污染狀況我們負(fù)責(zé)免費(fèi)發(fā)送一株細(xì)胞。收到細(xì)胞時(shí)如無異常情況，請?jiān)陲@微鏡下觀察細(xì)胞密度，如為貼壁細(xì)胞，未超過８０%匯合度時(shí)，將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出，留下１０ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)；超過８０%匯合度時(shí)，請按細(xì)胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細(xì)胞，吸出培養(yǎng)液、１０００轉(zhuǎn)/分鐘離心２分鐘，吸出上清，管底細(xì)胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細(xì)胞后移回培養(yǎng)瓶。細(xì)胞消化液建議使用PBS配制，慎用Hanks液配制；２)快遞細(xì)胞多久能到，是寄凍存的細(xì)胞還是復(fù)蘇好的細(xì)胞？我們采用快遞發(fā)貨，一般外地２--３天，寄細(xì)胞前請確認(rèn)當(dāng)?shù)販囟?，如果氣溫低于４度的，則采用郵寄凍存細(xì)胞；３)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基？不能。每一細(xì)胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細(xì)胞培養(yǎng)基，若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基，細(xì)胞大都無法立即適應(yīng)，造成細(xì)胞無法存活；４)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類？不能。血清是細(xì)胞培養(yǎng)上一個(gè)極為重要的營養(yǎng)來源，所以血清的種類和品質(zhì)對于細(xì)胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清，在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同，血清使用錯(cuò)誤常會造成細(xì)胞無法存活。
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
MC3T3E1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc10.05細(xì)胞、RH7777細(xì)胞、UT7細(xì)胞
U-251_MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKGT4細(xì)胞、MDA-MB-134VI細(xì)胞、A673細(xì)胞
OVCAR 5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Nb-2細(xì)胞、MTC-TT細(xì)胞、SW527細(xì)胞
SNU886細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Huh 7.5細(xì)胞、SNU-719細(xì)胞、Hu-P-T3細(xì)胞
CHG-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW1573細(xì)胞、A375.S2細(xì)胞、CL 1-5細(xì)胞
細(xì)胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細(xì)胞說明書部分
NCI-H847 Cell:人肺癌細(xì)胞系
細(xì)胞復(fù)蘇后貼壁細(xì)胞較少的問題分析：總結(jié)１：復(fù)蘇過程沒有問題，是否是從液氮拿出直接放入溫水，還有培養(yǎng)箱，二氧化碳濃度，培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS １５-２０%，看看能否幫助貼壁，當(dāng)然也需要考慮血清問題，還有確信拿來的細(xì)胞沒問題?？偨Y(jié)２：首先應(yīng)該懷疑凍存，實(shí)際上復(fù)蘇出問題的可能非常小，因?yàn)椴僮骱唵危宜腊?。１、你凍存的時(shí)候是不是消化的時(shí)間過長，這是一般人所注意不到的，即使書上也不講這個(gè)問題，太長的消化時(shí)間會讓細(xì)胞復(fù)蘇時(shí)失去貼壁能力，表現(xiàn)為先貼后死，原因是在你復(fù)蘇的時(shí)候細(xì)胞已進(jìn)入凋亡程序，不可逆轉(zhuǎn)的死亡。２、你的凍存液好不好，是什么，甘油還是DMSO，質(zhì)量非常重要，否則也會死亡。３、你的凍存液的量加的是不是太多，ATCC推薦是不超過７%，大于５%，太多也不好。４、你在凍存的時(shí)候是不是把DMSO混均勻，這個(gè)有一些影響，但不算太大。５、你的凍存是否按部就班，就是所溫度梯度是不是把握嚴(yán)格，很多人容易忘卻這個(gè)事情，因?yàn)檫@個(gè)東西流程長。６、如果你細(xì)胞污染，你是否能很快看到，我比我的導(dǎo)師能早一天看到污染。從這個(gè)角度講建議去除離心這步。７、你的細(xì)胞在凍存前是否過密。還有，不贊成孵箱污染這個(gè)概念的，所有在一個(gè)孵箱里的細(xì)胞都污染一個(gè)細(xì)菌的話，這個(gè)細(xì)菌是源于孵箱的，但這不代表孵箱污染，因?yàn)榉跸錈o論你如何處理都有大量的細(xì)菌，問題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找，以后就不犯同樣的問題，這個(gè)很重要，不能靠猜，否則你就有可能細(xì)胞養(yǎng)絕最后換課題，這個(gè)見得太多了，別不當(dāng)會事。
細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說明書
TOG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human Epidermoid carcinoma #2細(xì)胞、H441細(xì)胞、CCRF-SB細(xì)胞
SGC996細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEI-193細(xì)胞、HDF-a細(xì)胞、SNU-407細(xì)胞
PTK 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 699細(xì)胞、NS1-Ag4/1細(xì)胞、hCMEC/D3細(xì)胞
H1522細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Swiss 3T3細(xì)胞、AML193細(xì)胞、CTLA4Ig-24細(xì)胞
mousepodocyte細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HH [Human lymphoma]細(xì)胞、Menschliche Und Tierische Zellkulture-3細(xì)胞、MCA-38細(xì)胞
NCI-H2081細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H102細(xì)胞、Mouse podocyte細(xì)胞、Evsa-T細(xì)胞
PK-136細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1876細(xì)胞、NCI-H295細(xì)胞、DHL-8細(xì)胞
NCI-H847 Cell:人肺癌細(xì)胞系
PANC-03-27細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：hTERT-HME-1細(xì)胞、G 401細(xì)胞、HEK.EBNA細(xì)胞
H748細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MJ細(xì)胞、H-2009細(xì)胞、CAL 27細(xì)胞
GEO細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1373細(xì)胞、BSC-40細(xì)胞、OCI-LY-7細(xì)胞
DAKIKI Clone 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A-431細(xì)胞、766T細(xì)胞、LLC-MK-2細(xì)胞
B 95-8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DHL-4細(xì)胞、HR8348細(xì)胞、OCI-Ly 8細(xì)胞
JB6 Cl 30-7b細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：T-ALL-1細(xì)胞、Jurkat-77細(xì)胞、NCI-H2030細(xì)胞
NCI-H1184細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H748細(xì)胞、L363細(xì)胞、Hs 870.T細(xì)胞
HeLa S3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H82細(xì)胞、H676B細(xì)胞、Mink細(xì)胞
Madin Darby Bovine Kidney細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LU65細(xì)胞、JB6 [Mouse]細(xì)胞、H1623細(xì)胞
Madin Darby Bovine Kidney細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LU65細(xì)胞、JB6 [Mouse]細(xì)胞、H1623細(xì)胞
GLC-15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LLCMK2細(xì)胞、INS-1E細(xì)胞、He-La細(xì)胞
SK-GT-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：D-407細(xì)胞、KP-N-RT-BM-1細(xì)胞、H-774細(xì)胞
HNE2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKN-AS細(xì)胞、Panc-05.04細(xì)胞、HPAEC細(xì)胞
RS 4;11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MPC5細(xì)胞、H-1404細(xì)胞、D-341 Med細(xì)胞
LS-123細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 739.T細(xì)胞、HEK293-F細(xì)胞、H2330細(xì)胞
CCD33Co細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：T-47D細(xì)胞、U118-MG細(xì)胞、Leukemia L1210細(xì)胞
MFE 280細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C57 Mouse Tumor 64細(xì)胞、SK ES 01細(xì)胞、HCC-1833細(xì)胞
GS9L細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mouse INsulinoma 6細(xì)胞、RAMOS2G64C10細(xì)胞、RGE細(xì)胞
MA-c細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H69/P細(xì)胞、UMUC-3細(xì)胞、Alexander cells細(xì)胞
NCI-H1693細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MARC 145細(xì)胞、RCK8細(xì)胞、Hs888Lu細(xì)胞
ARH77細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-9細(xì)胞、SNU407細(xì)胞、P19細(xì)胞
OVCA 433細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Japanese Tissue Culture-28細(xì)胞、HPAF-II細(xì)胞、H-1944細(xì)胞
JB-6 Cl 30細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-343 MG細(xì)胞、EC-109細(xì)胞、V79細(xì)胞
HepG2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Centre Antoine Lacassagne-148細(xì)胞、Primary Liver Carcinoma/Poliomyelitis Research Foundation/5細(xì)胞、JKT1細(xì)胞
M-20細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCCC9810細(xì)胞、CAL148細(xì)胞、MUVEC細(xì)胞
YD-38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H64細(xì)胞、293-FT細(xì)胞、MS 751細(xì)胞
SK Mel 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：VK2細(xì)胞、H.Ep. No. 2細(xì)胞、GH3細(xì)胞
RPMI-7951細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HDQP1細(xì)胞、SBC-3細(xì)胞、TC-1 [Mouse lung]細(xì)胞
NU-GC-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-460細(xì)胞、Human Melanoma Cell Bowes細(xì)胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-10細(xì)胞
A-673細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2085細(xì)胞、Biopsy xenograft of Pancreatic Carcinoma line-3細(xì)胞、KG-1a細(xì)胞
NRK 52E細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR8細(xì)胞、Human Fetal Thymocyte-8810細(xì)胞、GC-1細(xì)胞
MPC11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GalK 1細(xì)胞、H1238細(xì)胞、CF-PAC1細(xì)胞
Kasumi-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1623細(xì)胞、HL-60 Clone 15細(xì)胞、NCI-H1155細(xì)胞
NCI-H2286細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SBC-5細(xì)胞、OVCAR.4細(xì)胞、NTera2/D1細(xì)胞
NCIH820細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HBE細(xì)胞、SNU-668細(xì)胞、SKBr3細(xì)胞
KP-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ES-2細(xì)胞、IR983F細(xì)胞、P-19細(xì)胞
DMS-53細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPDEC細(xì)胞、Hs 695.T細(xì)胞、HL-7702細(xì)胞
H1563細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM00346細(xì)胞、T98細(xì)胞、MT2細(xì)胞
293細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NPA87細(xì)胞、HT-144細(xì)胞、A875細(xì)胞
SKMES-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PCI-04B細(xì)胞、MDBK細(xì)胞、GES1細(xì)胞
HMSC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A2780CP細(xì)胞、SNU-387細(xì)胞、KU.812細(xì)胞
M-O7e細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCE-T細(xì)胞、EFO27細(xì)胞、NCIH548細(xì)胞
Hs27細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：K299細(xì)胞、OS-732細(xì)胞、HCC-44細(xì)胞
NCI-H847 Cell:人肺癌細(xì)胞系
SNK-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD 966SK細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-453細(xì)胞、H-2085細(xì)胞
SW1990細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU1040細(xì)胞、CACO2細(xì)胞、C-4I細(xì)胞
MCF-7/AdrR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI no 8226細(xì)胞、NCIH28細(xì)胞、HBE135-E6E7細(xì)胞
THC-8307細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS 123細(xì)胞、SW-403細(xì)胞、Medical Research Council cell strain-9細(xì)胞
ETCC007細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：VP303細(xì)胞、Panc 08.13細(xì)胞、RCS細(xì)胞
H-220細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Cor L51細(xì)胞、SV-HUC-1細(xì)胞、PK 15細(xì)胞
PNT1/A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-1599細(xì)胞、Hs729T細(xì)胞、NRK-49F細(xì)胞
U343細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK AD293細(xì)胞、FO [Mouse myeloma]細(xì)胞、SKNBE(2)細(xì)胞
MUS-M1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KE-37細(xì)胞、PCI-4M細(xì)胞、BNCL2細(xì)胞
NOMO1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Keio University-19-19細(xì)胞、Evsa T細(xì)胞、Kit 225 K6細(xì)胞
alphaTC1 Clone 6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCRF.CEM細(xì)胞、HBE135-E6E7細(xì)胞、ZR-75-1細(xì)胞
HBE 135-E6/E7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FHL-124細(xì)胞、CEM T4細(xì)胞、NTERA-2 cl.D1細(xì)胞
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