"CCK-81 Cell:人結(jié)腸癌腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁
細(xì)胞背景資料:詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
A.704細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK293-EBNA細(xì)胞、16HBE140細(xì)胞、HSC-2細(xì)胞
COLO 206F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PLA 802細(xì)胞、CCD 966 SK細(xì)胞、Hi-five細(xì)胞
CCRF-CEM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-601細(xì)胞、ZR-75-1細(xì)胞、OCLY8細(xì)胞
KYSE 140細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KU19-19細(xì)胞、SG231細(xì)胞、LC1/Sq細(xì)胞
細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
CCK-81 Cell:人結(jié)腸癌腺癌細(xì)胞系
因?yàn)榧?xì)胞生長(zhǎng)的時(shí)候肯定是要相互聯(lián)系,大部分的細(xì)胞都是要成片生長(zhǎng)的,尤其是對(duì)于貼壁細(xì)胞,單個(gè)細(xì)胞貼壁之后長(zhǎng)著長(zhǎng)著就長(zhǎng)到一片去了。但是如果是成片的細(xì)胞抱團(tuán)的話,傳代后細(xì)胞是不能貼壁的,這樣抱團(tuán)的細(xì)胞就會(huì)死亡。所以,消化傳代的時(shí)候一定要將細(xì)胞消化成單個(gè)單個(gè)的獨(dú)立狀態(tài),這個(gè)啊是非常考究你的功夫的!細(xì)胞一旦脫落入懸液里你很難再將他吹打成單個(gè),因?yàn)樗麤]有受力點(diǎn)了。很難找到受力點(diǎn)讓你對(duì)他吹打的力分散開細(xì)胞。所以必須要在細(xì)胞未脫落之前將其吹打開,受力點(diǎn)就是細(xì)胞貼壁的地方。這樣你就必須要嚴(yán)格控制好消化的程度啊,這和大師做飯掌握好火候是一樣的道理啊。既要消化到容易吹打下來,又不能太過,一吹就整片脫落,要單個(gè)單個(gè)地往下掉。所以我才要分批分次地加胰酶消化就是為了保證不同生長(zhǎng)狀態(tài)貼壁程度的細(xì)胞能夠都維持在好的受力點(diǎn)分散開。這個(gè)是很重要的一點(diǎn)。尤其是對(duì)于某些細(xì)胞這一點(diǎn)就是他活去死的致命點(diǎn)。像Caco-2細(xì)胞就是如此。另外關(guān)于傳代很重要一點(diǎn)就是一定不能等到細(xì)胞長(zhǎng)滿的時(shí)候才去消化傳代。要在細(xì)胞長(zhǎng)到70%左右的時(shí)候就要傳代了,一旦發(fā)現(xiàn)細(xì)胞生長(zhǎng)中已經(jīng)有疊層生長(zhǎng)的時(shí)候就要立即進(jìn)行消化傳代。不能再拖了。關(guān)于換液傳代時(shí)候洗瓶的問題。對(duì)于用DMEM培養(yǎng)基培養(yǎng)的細(xì)胞,你在洗的時(shí)候如果是用無血清1640去洗細(xì)胞在隨即后的幾次中會(huì)比用DMEM洗的長(zhǎng)的要好。同樣,用1640培養(yǎng)的也有這個(gè)現(xiàn)象。如果不嫌麻煩的話,可以用PBS來洗,洗的效果和用無血清培養(yǎng)基洗的效果基本上是一樣的,對(duì)于有些細(xì)胞會(huì)更勝一籌。洗的目的主要是洗去培養(yǎng)瓶里殘留的血清,防止它對(duì)胰酶的影響。這樣能夠保證胰酶的消化能力優(yōu)先,是很關(guān)鍵的一點(diǎn)。先補(bǔ)充這么多,還會(huì)后續(xù)更新。再補(bǔ)充一點(diǎn):傳代時(shí)PBS洗是很重要的一步,最近發(fā)現(xiàn),用PBS就可以把細(xì)胞消化開來。加入PBS放置10-15分鐘,有些需要更長(zhǎng)的時(shí)間,等到細(xì)胞一個(gè)個(gè)分離開來的時(shí)候,就可以直接吹打下來,但是和胰酶消化一樣,要控制好時(shí)間,不能時(shí)間太過了,要不然損傷細(xì)胞,細(xì)胞不容易成活,狀態(tài)容易不好。這個(gè)方法對(duì)于某些細(xì)胞是很管用的。有些細(xì)胞用胰酶消化不容易消化成單個(gè)的時(shí)候,或者臨時(shí)沒有胰酶了,可以選用此方法。不過一定要試試,看是否適合你的細(xì)胞。
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細(xì)胞凍存的步驟:1)選擇處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞,在凍存前一天換液。將多個(gè)培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞培養(yǎng)液去掉,用0.25% 胰蛋白酶消化。適時(shí)去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細(xì)胞,使其成為均勻分散的細(xì)胞懸液。懸浮生產(chǎn)細(xì)胞則不要消化處理。然后將細(xì)胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘);2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預(yù)冷15分鐘后,逐滴加入已無菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻,細(xì)胞濃度為5×106~1×107/mL之間。(凍存培養(yǎng)液的配置是不是一定要用小牛血清呢?答案是不一定的,具體要看培養(yǎng)的細(xì)胞類型來選擇;3)將分裝上述細(xì)胞懸液于2ml凍存管中,每管0.25ml。凍存管要將蓋子蓋緊,并標(biāo)記好細(xì)胞名稱和凍存日期,同時(shí)作好登記(日期、細(xì)胞種類及代次、凍存支數(shù));4)將裝好細(xì)胞的凍存管放到凍存盒中,-80℃冰箱過夜。;如果有程序降溫器(放在-80℃冰箱過夜,放入液氮罐);或者可以在4℃,2h;然后轉(zhuǎn)到-20℃,2h;-80℃,2h;放入液氮罐;5)細(xì)胞凍存在液氮中可以長(zhǎng)期保存,但為妥善起見,凍存半年后,取出一只凍存管細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng),觀察生長(zhǎng)情況,然后再繼續(xù)凍存。
細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
Cattle chondrocytes細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L5178YR細(xì)胞、S37細(xì)胞、P3JHR1細(xì)胞
NCI-H1963細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IMR-90細(xì)胞、MSB1細(xì)胞、OsA-CL細(xì)胞
MPVECs細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM 239A細(xì)胞、PL-9細(xì)胞、Hs819.T細(xì)胞
MiaPaCa-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TW-039細(xì)胞、FET細(xì)胞、Potorous tridactylus Kidney 1細(xì)胞
SUP-B15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NK-92.05細(xì)胞、PC-3M 2B4細(xì)胞、Hs 742.T細(xì)胞
細(xì)胞生長(zhǎng)特性:貼壁或懸浮,詳見細(xì)胞說明書部分
CCK-81 Cell:人結(jié)腸癌腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞傳代培養(yǎng)實(shí)驗(yàn):體外培養(yǎng)的原代細(xì)胞或細(xì)胞株要在體外持續(xù)地培養(yǎng)就必須傳代,以便獲得穩(wěn)定的細(xì)胞株或得到大量的同種細(xì)胞,并維持細(xì)胞種的延續(xù)。培養(yǎng)的細(xì)胞形成單層匯合以后,由于密度過大生存空間不足而引起營(yíng)養(yǎng)枯竭,將培養(yǎng)的細(xì)胞分散,從容器中取出,以1:2或1:3以上的比率轉(zhuǎn)移到另外的容器中進(jìn)行培養(yǎng),即為傳代培養(yǎng);細(xì)胞“一代”指從細(xì)胞接種到分離再培養(yǎng)的一段期間,與細(xì)胞世代或倍增不同。在一代中,細(xì)胞培增3~6次。細(xì)胞傳代后,一般經(jīng)過三個(gè)階段:游離期、指數(shù)增生期和停止期。常用細(xì)胞分裂指數(shù)表示細(xì)胞增殖的旺盛程度,即細(xì)胞群的分裂相數(shù)/100個(gè)細(xì)胞。一般細(xì)胞分裂指數(shù)介于0.2%~0.5%,腫瘤細(xì)胞可達(dá)3~5%;細(xì)胞接種2~3天分裂增殖旺盛,是活力時(shí)期,稱指數(shù)增生期(對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期),適宜進(jìn)行各種試驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)步驟:1.將長(zhǎng)成的培養(yǎng)細(xì)胞從二氧化碳培養(yǎng)箱中取出,在超凈工作臺(tái)中倒掉瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)液,加入少許消化液。(以液面蓋住細(xì)胞為宜),靜置5~10分鐘。2.在倒置鏡下觀察被消化的細(xì)胞,如果細(xì)胞變圓,相互之間不再連接成片,這時(shí)應(yīng)立即在超凈臺(tái)中將消化液倒掉,加入3~5ml新鮮培養(yǎng)液,吹打,制成細(xì)胞懸液。3.將細(xì)胞懸液吸出2ml左右,加到另一個(gè)培養(yǎng)瓶中并向每個(gè)瓶中分別加3ml左右培養(yǎng)液,蓋好瓶塞,送回二氧化碳培養(yǎng)箱中,繼續(xù)進(jìn)行培養(yǎng)。一般情況,傳代后的細(xì)胞在2小時(shí)左右就能附著在培養(yǎng)瓶壁上,2~4天就可在瓶?jī)?nèi)形成單層,需要再次進(jìn)行傳代。
細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書
CNE2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WEHI 3細(xì)胞、HuPT3細(xì)胞、ECV細(xì)胞
UCH1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HBZY1細(xì)胞、H-650細(xì)胞、P3J HR1-K細(xì)胞
CA 46細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:D283 Med細(xì)胞、WERI-Rb 1細(xì)胞、Colo741細(xì)胞
NIH:OVCAR-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HTori:3細(xì)胞、HLE-B3細(xì)胞、ECC-1細(xì)胞
STO細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1092細(xì)胞、WEHI3B細(xì)胞、H-146細(xì)胞
Colon38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H125細(xì)胞、RC13細(xì)胞、JF305細(xì)胞
RPMI-6666細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKG3A細(xì)胞、MC-116細(xì)胞、Madin-Darby Bovine Kidney細(xì)胞
CCK-81 Cell:人結(jié)腸癌腺癌細(xì)胞系
OCILY19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:hFOB 1.19細(xì)胞、NCIH2029細(xì)胞、Walker-256細(xì)胞
LS174細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HIBEC細(xì)胞、33604細(xì)胞、H1838細(xì)胞
Colon 26細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Jiyoye (P-2003)細(xì)胞、Ramos細(xì)胞、MHCC97細(xì)胞
PC-9/GR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC 61-5-3細(xì)胞、NCI-H2172細(xì)胞、MDA MB 134VI細(xì)胞
HCA-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:VP267細(xì)胞、Hep G2-Luc細(xì)胞、PBL細(xì)胞
Colon38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H125細(xì)胞、RC13細(xì)胞、JF305細(xì)胞
MAntle cell VERona-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CORL88細(xì)胞、PASMCS細(xì)胞、Tu686細(xì)胞
Mouse Bladder Tumor line-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NPA87-1細(xì)胞、Porcine Kidney-15細(xì)胞、IPLB-SF-21細(xì)胞
Los Angeles Prostate Cancer-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SF295細(xì)胞、HKBML細(xì)胞、HRVEC細(xì)胞
Los Angeles Prostate Cancer-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SF295細(xì)胞、HKBML細(xì)胞、HRVEC細(xì)胞
NCI-H2291細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1299細(xì)胞、OCI-LY-19細(xì)胞、H1435細(xì)胞
MALME 3M細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A204細(xì)胞、HaCaT細(xì)胞、MDCK II細(xì)胞
CAKI 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI Ly10細(xì)胞、MILE SVEN1細(xì)胞、RC-4B/C細(xì)胞
C2BBe 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE-510細(xì)胞、Hepa-RG細(xì)胞、130T細(xì)胞
WERI-Rb1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GCT細(xì)胞、Human Intestinal Epithelial Cell-6細(xì)胞、CAOV3細(xì)胞
H-1048細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:3T3-442A細(xì)胞、C 6細(xì)胞、OC316細(xì)胞
SCI1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HC11 Mammary Epithelium細(xì)胞、SK-NSH細(xì)胞、PIGI細(xì)胞
Granta 519細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HET-1A細(xì)胞、J 774A.1細(xì)胞、Central Adrenergic TH-expressing a細(xì)胞
GM02132C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HR-8348細(xì)胞、GLC82細(xì)胞、MC57G細(xì)胞
Jurkat-FHCRC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNK-1細(xì)胞、SKLMS1細(xì)胞、H-508細(xì)胞
GES1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK293FT細(xì)胞、Hs832.Tc細(xì)胞、MG-HU-3細(xì)胞
HD-LM-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EOC 20細(xì)胞、GM04679細(xì)胞、FU-MMT-1細(xì)胞
MDA-330細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SPC-A-1細(xì)胞、H87細(xì)胞、10RGB細(xì)胞
Microbiological Associates-104細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HR1K細(xì)胞、KG-1a細(xì)胞、LN 382細(xì)胞
Hs281T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HBdSMC細(xì)胞、T9細(xì)胞、MC3T3-E1 Subclone 4細(xì)胞
LA-N-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1781細(xì)胞、HLEC-SRA 01/04細(xì)胞、KLN 205細(xì)胞
Functional Liver Cell-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OK-WT細(xì)胞、BC-3H-1細(xì)胞、CAMA1細(xì)胞
U266 Bl細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1651細(xì)胞、TM4細(xì)胞、SU.86.86細(xì)胞
MCA205細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JB-6細(xì)胞、COLO 320DM細(xì)胞、293c18細(xì)胞
Toledo細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:G-361細(xì)胞、H-295細(xì)胞、KP4細(xì)胞
KB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:T-ALL1細(xì)胞、H-2171細(xì)胞、SUM-159PT細(xì)胞
TC7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KMBC細(xì)胞、LC2/Ad細(xì)胞、A-72細(xì)胞
KLM-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPE1細(xì)胞、KALS1細(xì)胞、MEL細(xì)胞
HFT-8810細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1155細(xì)胞、TJ905細(xì)胞、Capan2細(xì)胞
WPMY-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:8226細(xì)胞、K7M2-WT細(xì)胞、VM Cub 1細(xì)胞
UM-RC-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PNEC30細(xì)胞、B95.8細(xì)胞、Hs832T細(xì)胞
KMY1022細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCILY-19細(xì)胞、CT26.CL25細(xì)胞、HCC0095細(xì)胞
SKMEL1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HL-60 Clone 15細(xì)胞、HCC1954BL細(xì)胞、CHO-Lec1細(xì)胞
NCI-H2452細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKMEL28細(xì)胞、L1210細(xì)胞、SCC-4細(xì)胞
NCI-441細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SGC-996細(xì)胞、HCC-1569細(xì)胞、A 253細(xì)胞
IHH4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCTC929細(xì)胞、NCI-H1836細(xì)胞、VP267細(xì)胞
RPMI2650細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H747細(xì)胞、HEC-1-A細(xì)胞、HS688AT細(xì)胞
DHL-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Normal Rat Kidney細(xì)胞、PL11細(xì)胞、Fu97細(xì)胞
CCK-81 Cell:人結(jié)腸癌腺癌細(xì)胞系
EAhy926細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs.27細(xì)胞、C-33 A細(xì)胞、NCI-322細(xì)胞
SW620細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Granta 519細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-436細(xì)胞、Vero-76細(xì)胞
293 c18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-SNU-668細(xì)胞、HPAF-I細(xì)胞、A431/P細(xì)胞
MDAMB231細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MUTZ-1細(xì)胞、PANC-08-13細(xì)胞、H128細(xì)胞
Kit225 K6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:2780細(xì)胞、PA12細(xì)胞、NCI-H508細(xì)胞
JAR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SkChA-1細(xì)胞、BL1339細(xì)胞、HEL-92.1.7細(xì)胞
RBVEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI AML2細(xì)胞、HDLM2細(xì)胞、HBZY 1細(xì)胞
NR 8383細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RH-30細(xì)胞、SF 539細(xì)胞、PLC8024細(xì)胞
XWLC-05細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1770細(xì)胞、V79-1細(xì)胞、Hela-mock細(xì)胞
A 72細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AC29細(xì)胞、SW-579細(xì)胞、UPCISCC154細(xì)胞
EFM192C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C3H/10T1/2-clone8細(xì)胞、LS411N細(xì)胞、H3255_DA細(xì)胞
HCC-1937細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RBMEC細(xì)胞、TF1細(xì)胞、Ramos 2G6.4C10細(xì)胞
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