"PCI-04B Cell:人喉鱗癌細胞系
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞背景資料：喉鱗癌；淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移；男性
MSTO-211細胞系相關產(chǎn)品：HSC2細胞、TFK1細胞、SK.MEL.2細胞
HEL 92.1.7細胞系相關產(chǎn)品：MA104細胞、MSTO-211 H細胞、T-24細胞
UPCI:SCC90細胞系相關產(chǎn)品：Jurkat (clone E6-1)細胞、NCIH1155細胞、GM00637B細胞
AU 565細胞系相關產(chǎn)品：Det 562細胞、OCM1細胞、WC00097細胞
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
PCI-04B Cell:人喉鱗癌細胞系
細胞消化過程總結(jié)：其實絕大部分細胞消化的時候是只要用胰酶潤洗一遍即可，吸去胰酶后，殘留的那些無法計算體積的附著在細胞表面的微量胰酶在３７度一般不到２min足夠消化細胞（絕大部分１min不到）。對于這些細胞原則上不要用胰酶孵育細胞，連續(xù)這樣傳代，對細胞傷害很大。簡單的程序是PBS潤洗吸去，胰酶潤洗吸去，然后３７度消化。２，什么算是消化好了呢？不是細胞全部成間隔分布很離散的單個圓形才算消化好了，一般你肉眼觀察貼壁細胞層，只要能移動了，多半呈沙壯移動，其實已經(jīng)可以了，很多人喜歡把細胞消化或者吹打成完全分離細胞，這是沒有必要的。一般能移動了，說明細胞與培養(yǎng)基質(zhì)材料的附著已經(jīng)消失了，細胞之間的附著也已經(jīng)消失了，細胞已經(jīng)獨立分布了（雖然沒有呈現(xiàn)很廣的離散分布）。這個時候應該停止消化，不要等到看到鏡下所有細胞都分離得非常好，間隙很大，才停止。細胞就是完全成單個細胞懸液，之后在貼壁的過程中仍然會聚集，這個是貼壁培養(yǎng)的細胞，尤其是腫瘤細胞的一個特性，無論死活的細胞都是如此，你可以嘗試，準備１００%的單個細胞懸液，貼壁后觀察細胞，仍然是幾個幾個細胞聚集在一起。一些懸浮培養(yǎng)細胞也是如此，容易聚集，不要去嘗試過幾個小時就拿出來吹打成單細胞懸液（不要笑，這個是初養(yǎng)懸浮細胞的人常犯的錯誤，以為懸浮培養(yǎng)就是一個一個分開）。細胞只要能從基質(zhì)上脫離下來，這個時候即使是成片的（比如Calu-３細胞），吹打不超過２０次后（一般１０次即可），成小規(guī)模聚集（１０個細胞左右），是正常的，不要試圖再去延長消化時間，或者像有的同學那樣吹打１h，等待單細胞懸液出現(xiàn)。比較難消化的細胞（潤洗方法５min還不能消化），比如HCT１５, LS４１１和KM１２，這樣的細胞一般需要用少量胰酶孵育，但也不需要很多，一般１００mm dish，一次最多加入５００ul，就足夠了，一般我加３００ul。即使這樣難消化的細胞，一般不超過５min，即可見細胞成片移動，就應該停止消化。一些正常細胞也會有難消化的時候，比如tsDC細胞，但也只要用少量胰酶孵育，３min左右即可看到成片沙狀移動。
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
培養(yǎng)細胞真的不難，最關鍵幾點：１)所有的東西使用，如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進口的，真的很難相信你會把細胞養(yǎng)壞；２)動作要快，胰酶消化，換液什么，細胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外，要掌握好胰酶消化時間，所謂的細胞狀態(tài)差，很多時候是傳代的原因；３)有時間的話，需要細胞計數(shù)，傳相應數(shù)目的細胞到培養(yǎng)皿中，可以大致清楚細胞的生長曲線，不會臨時要處理，手足無措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排時間，傳代細胞的實驗穿插進行，可以節(jié)省很多時間，也不會耽誤別人的實驗；５)個人的實驗器具自己收一套，不要和別人混用，最近換了什么新的東西稍微記一下，試劑一旦懷疑污染，馬上丟；６)傳代細胞不能進去太多人，避免相互干擾。每天對待細胞比孝敬爹媽還用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丟了，培養(yǎng)細胞時有哪些經(jīng)驗教訓可以分享呢?１)嚴格無菌操作，多噴噴酒精，要是對滅菌的東西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和別人共用試劑耗材，自己準備一套；３)有可能的話在拿到新細胞的時候做好支原體衣原體檢測；４)水浴鍋很臟，生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟，勤換(滅菌水加進去)；５)晚上離開的時候給傳代細胞照紫外，超凈臺是用完就開；６)是同一時間就你一個人在用傳代細胞在養(yǎng)細胞。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
BNL CL.2細胞系相關產(chǎn)品：TF1細胞、JURKAT E-6.1細胞、Colo-206F細胞
B-104細胞系相關產(chǎn)品：COLO-320DM細胞、SaOS細胞、RMS 13細胞
NMC-G1細胞系相關產(chǎn)品：MB157細胞、HLCL9B10細胞、PanC1細胞
SK UT 1細胞系相關產(chǎn)品：SNU216細胞、HD11細胞、MN60細胞
Sci-1細胞系相關產(chǎn)品：Anip-973細胞、EC-9706細胞、ECC 10細胞
細胞生長特性：貼壁
PCI-04B Cell:人喉鱗癌細胞系
細胞復蘇相關注意事項：１.取細胞的過程中注意帶好防凍手套，護目鏡。此項尤為重要，細胞凍存管可能漏入液氮，解凍時凍存管中的氣溫急劇上升，可導致爆炸。２.凍存液的問題：凍存液的配置已是常識，在這里不作詳述，但二甲基亞砜(DMSO )對細胞不是完全無毒副作用，在常溫下，二甲基亞砜對細胞的毒副作較大，因此，必須在１-２min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復蘇溫度太慢，會造成細胞的損傷，二甲基亞砜(DMSO)選擇進口產(chǎn)品。３.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細胞解凍后二甲基亞砜濃度較高，注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度，以減少對細胞的損傷。４.離心問題：目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng)，第二天換液。因為離心的目的是兩個，去除DMSO，去除死細胞，這個是標準流程，但對一般人來說，把握不好離心轉(zhuǎn)速和時間，轉(zhuǎn)的不夠活細胞沉底的少，細胞就全被扔掉了，轉(zhuǎn)過了活細胞會受壓過大，死亡。此外在操作過程中容易污染，所以不推薦。另一種說法為細胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO)，DMSO對細胞有一定的毒副作用，所以須將離心后的液體前倒凈，且一定倒干凈。我在試驗中按照常規(guī)的離心分裝的方法進行復蘇，結(jié)果無異常。５.細胞貼壁少的問題：教科書中說明凍存細胞解凍時１ml細胞液要加１０ml-１５ml培養(yǎng)液，而在我的試驗中的經(jīng)驗總結(jié)為培養(yǎng)基越少細胞越容易貼附。６.復蘇細胞分裝的問題：試驗中我的經(jīng)驗總結(jié)為復蘇１管細胞一般可分裝到１-２只培養(yǎng)瓶中，分裝過多，細胞濃度過低，不利于細胞的貼壁。７.加培養(yǎng)基的量放入問題：這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度，從如果你加培養(yǎng)基的太少，那么DMSO的濃度就會比較大，就會影響細胞生長，從以前的資料來看，DMSO的濃度在小于０.５%的時候?qū)σ话慵毎麤]有什么影響，還有一個說法是１%。所以如果你的凍存液的濃度是１０%DMSO的話那么加１０ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
NCI-H2135細胞系相關產(chǎn)品：DV90細胞、TGBC11T細胞、ISHI細胞
Leukemia L1210細胞系相關產(chǎn)品：Normal Rat, August 3, 1983細胞、NCI.H226細胞、HCGC細胞
NCIH841細胞系相關產(chǎn)品：C33-A細胞、HARAB細胞、NCI-SNU-761細胞
KLN-205細胞系相關產(chǎn)品：RCS細胞、H1437細胞、Centre Antoine Lacassagne-51細胞
RPMI8226/S細胞系相關產(chǎn)品：HFL-1細胞、SMA-560細胞、BEL7404細胞
DI-TNC1細胞系相關產(chǎn)品：SN12CPM6細胞、Baby Hamster Kidney from litter No. 21細胞、hEM15A細胞
HEP-3B2細胞系相關產(chǎn)品：CNE-2Z細胞、OCLY8細胞、KMM-1細胞
PCI-04B Cell:人喉鱗癌細胞系
Hi-5細胞系相關產(chǎn)品：HCC1438細胞、SNU-C2A細胞、As-PC1細胞
293EBNA細胞系相關產(chǎn)品：GM-3573細胞、A375-MEL細胞、Hs-281-T細胞
HEK-293H細胞系相關產(chǎn)品：SGC7901/DDP細胞、H1650_CO細胞、10T1/2細胞
Panc 10.05細胞系相關產(chǎn)品：U373-MG細胞、CMT-93細胞、SNUC2A細胞
NCIH187細胞系相關產(chǎn)品：J774.A1細胞、CMT.64細胞、HMEC1細胞
PAEC細胞系相關產(chǎn)品：HCT-8/V細胞、293/EBNA-1細胞、2B4-L細胞
RPMI no 8226細胞系相關產(chǎn)品：NCIH82細胞、KYSE-450細胞、ARH77細胞
KM.12細胞系相關產(chǎn)品：HFLS細胞、GM02131細胞、SK HEP 01細胞
143TK-細胞系相關產(chǎn)品：BE(2)C細胞、SK Hep1細胞、WRL-68細胞
143TK-細胞系相關產(chǎn)品：BE(2)C細胞、SK Hep1細胞、WRL-68細胞
G-402細胞系相關產(chǎn)品：FU-MMT-1細胞、NCI-H2141細胞、MGH-U1 (EJ)細胞
118 MG細胞系相關產(chǎn)品：HNE3細胞、LK-2細胞、B16/F10細胞
WI 38細胞系相關產(chǎn)品：GM-346細胞、MOLT-4細胞、Okayama University Medical School-27細胞
QGP 1細胞系相關產(chǎn)品：H-35細胞、LTEPsm細胞、CATH.a細胞
SUSM-1細胞系相關產(chǎn)品：NCIH2073細胞、Hs604T細胞、MKN45細胞
BSC1細胞系相關產(chǎn)品：Granta-519細胞、SNU-119細胞、H69/P細胞
PC3細胞系相關產(chǎn)品：MDCK-2細胞、NCI-H1770細胞、NUGC3細胞
SEG-1細胞系相關產(chǎn)品：H-1522細胞、CNLMG-B5537SKIN細胞、AR4-2J細胞
NKT細胞系相關產(chǎn)品：MASMC細胞、Tca8113細胞、SKMEL5細胞
NCI-H1417細胞系相關產(chǎn)品：KTCTL-140細胞、SNU-620細胞、HuT78細胞
U-343細胞系相關產(chǎn)品：P3HR1-BL細胞、HCCC9810細胞、786-0細胞
OV2008細胞系相關產(chǎn)品：NS1-Ag4/1細胞、HRC-99細胞、NCI-H727細胞
H929細胞系相關產(chǎn)品：639 V細胞、VK-2/E6E7細胞、NOK細胞
CHO細胞系相關產(chǎn)品：MT-2細胞、EVSAT細胞、HECCL-1細胞
UCLA-RO 81細胞系相關產(chǎn)品：M-14細胞、HTori:3細胞、MDA.MB.231細胞
EC-GI細胞系相關產(chǎn)品：MV-3細胞、PK13細胞、293-GP細胞
GM00637B細胞系相關產(chǎn)品：Neukoplast細胞、L-M(TK-)細胞、alphaTC1 Clone 6細胞
TGW-I-nu細胞系相關產(chǎn)品：NOK細胞、N1E-115細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-157細胞
HEM細胞系相關產(chǎn)品：SW 1116細胞、KASUMI6細胞、NCI-446細胞
JHH-2細胞系相關產(chǎn)品：MRC-9細胞、LP1細胞、IM95細胞
C518細胞系相關產(chǎn)品：MES-SA/Dx-5細胞、SV40 MES 13細胞、HLE-SRA-01/04細胞
PE/CA-PJ34 (clone C12)細胞系相關產(chǎn)品：MOLT 4細胞、Swiss-3T3細胞、H-2087細胞
LOU-NH-91細胞系相關產(chǎn)品：MCF-7/AdrR細胞、SUP-M2細胞、C-33-A細胞
NCTC-3960細胞系相關產(chǎn)品：JVM-2細胞、HuT102細胞、TPC-1細胞
SW-403細胞系相關產(chǎn)品：TF-1a細胞、HSC5細胞、Lewis-Lung細胞
MGHU3細胞系相關產(chǎn)品：MOLT.4細胞、WM-115細胞、NCIH1963細胞
Ect1/E6E7細胞系相關產(chǎn)品：NIH-3T3-L1細胞、H-676B細胞、End1/E6E7細胞
K562/ADP細胞系相關產(chǎn)品：SJRH-30細胞、TE-85 clone 5細胞、Renal Proximal Tubule Epithelial Cells/TERT-immortalized 1細胞
Anip 973細胞系相關產(chǎn)品：OE21細胞、CCD-966SK細胞、Co 115細胞
TF-1a細胞系相關產(chǎn)品：Karpas299細胞、KYSE-140細胞、S37細胞
Anip[973]細胞系相關產(chǎn)品：B16BL6細胞、WTRL1細胞、293-EBNA細胞
PA I細胞系相關產(chǎn)品：GM00637H細胞、P3J.HR1K細胞、EU-2細胞
OVCA432細胞系相關產(chǎn)品：KU 19-19細胞、REC-1細胞、H-838細胞
PCI-04B Cell:人喉鱗癌細胞系
WEHI 3細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H292細胞、Hs27F細胞、Clone 15 HL-60細胞
BT-20細胞系相關產(chǎn)品：Ramos (RA 1)細胞、H-1694細胞、MC-4細胞
SR786細胞系相關產(chǎn)品：NOR-10細胞、NCIH1944細胞、639-V細胞
Pro-Lec1.3C細胞系相關產(chǎn)品：3T3 clone A31細胞、UACC 812細胞、NCI-H1770細胞
HCC1954 BL細胞系相關產(chǎn)品：Sun Yat-sen university Ophtalmic center-Retinoblastoma 50細胞、HPC-Y5細胞、SW 900細胞
no-11細胞系相關產(chǎn)品：MiaPaca.2細胞、KMB-17細胞、HRIF細胞
Panc-327細胞系相關產(chǎn)品：HCEC-12細胞、SN12C細胞、SNU-C2B細胞
Mac-1細胞系相關產(chǎn)品：U87細胞、SNU761細胞、3396細胞
BS-C-1細胞系相關產(chǎn)品：U87-MG細胞、RCC-4細胞、H-1693細胞
MCF-12F細胞系相關產(chǎn)品：COLO-741細胞、FHL 124細胞、GRSL細胞
MRC-V細胞系相關產(chǎn)品：Human Pancreatic Duct Epithelial細胞、HSC 3細胞、HO8910細胞
A875細胞系相關產(chǎn)品：SNU182細胞、REC細胞、HPASMC細胞
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關鍵字： PCI-04B Cell:人喉鱗癌細胞系
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