"GB-1 Cell:人腦膠質(zhì)母細胞瘤細胞系
細胞形態(tài):上皮細胞樣
細胞生長:貼壁
細胞背景資料:詳見相關(guān)文獻介紹
AHH1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GOTO細胞、DKMG細胞、NCI-HUT-596細胞
L-929細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SN12PM6細胞、HANK-1細胞、Hs.27細胞
SNU886細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Huh 7.5細胞、SNU-719細胞、Hu-P-T3細胞
CMT-167細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCLC21H細胞、Hs-578-T細胞、SU8686細胞
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
GB-1 Cell:人腦膠質(zhì)母細胞瘤細胞系
如何把細胞養(yǎng)的形態(tài)更好更漂亮。1.不同的細胞,喜歡的環(huán)境是不一樣的。這個不僅僅是說培養(yǎng)基的不同,還有就是細胞生長的空間密度問題。有一些細胞是數(shù)量多一點比較好生長,生長狀態(tài)也比較好。這種一般是屬于生長速度慢的細胞。譬如內(nèi)皮細胞。而有一些是細胞是數(shù)量少一點細胞狀態(tài)會生長的比較好,譬如巨噬細胞和某些腫瘤細胞。尤其是巨噬細胞,生長速度非常得快,貼壁速度很快,所以傳代時就應(yīng)該留很少量的細胞,這樣細胞狀態(tài)會比較好。并且巨噬細胞比較喜歡扎堆生長,而堆與堆之間是有空間的。如果長成相連在一起的一滿片的時候,細胞形態(tài)基本上就會差了,老化的會比較多,對后期實驗結(jié)果是不好的。所以在養(yǎng)細胞的時候應(yīng)該摸索該細胞喜歡的生長空間密度問題。2.對于有些人總是會遇到養(yǎng)的細胞形態(tài)怎么都不好的問題。這個其實是有一個方法可以改善的。對于貼壁細胞,如果細胞形態(tài)不好,(或者細胞形態(tài)不清晰,表面似有異物等)可以在傳代的時候進行如下操作:首先,倒掉舊的培養(yǎng)基,加入3ml新的培養(yǎng)基(有無血清的都可)洗滌一次,用滴管吸走,然后再加入3ml的培養(yǎng)基,進行預(yù)吹打,控制吹打力度,輕輕地大概沿著瓶底過一遍,然后吸走。這時侯再開始正式的消化、吹打。(巨噬細胞我們只吹打,不消化的);其次,把吹打下來的細胞懸液加入到新的培養(yǎng)瓶內(nèi),培養(yǎng)瓶事先加入培養(yǎng)基,放入培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng),按時間點觀察細胞貼壁情況。10分鐘觀察一次,20分鐘,30分鐘觀察一次。選擇一個時間點,已經(jīng)有部分細胞貼壁的情況下,重新置于潔凈臺,底面朝上迅速倒出其中的培養(yǎng)基,加入3ml新培養(yǎng)基再輕輕洗一次。然后加入完全培養(yǎng)基培養(yǎng)。后續(xù)觀察細胞生長情況以及形態(tài)。我稱之為“二傳”。呵呵。如果一次效果還不理想,可重復(fù)多次。直到找到細胞完美形態(tài)。其中要注意,結(jié)合細胞喜歡的生長情況。喜歡多一點數(shù)量長得好的細胞你就等貼壁細胞比較多點的時候再傳。反之亦然。3.關(guān)于培養(yǎng)瓶內(nèi)加入培養(yǎng)基的量的問題。這個是要靠自己去摸索你所養(yǎng)的細胞的。并不是小的玻璃方瓶12ml,大方瓶14ml的。有些細胞反而是培養(yǎng)基少一點相反細胞形態(tài)會長得比較好。(可能也是競爭很大,有優(yōu)勝劣汰吧。呵呵。)對于生長速度快的細胞,易生長的細胞加少一點培養(yǎng)基細胞形態(tài)會更好。但是要注意換液掌握。4.關(guān)于選擇培養(yǎng)瓶的問題。個人發(fā)現(xiàn)生長速度快的細胞在玻璃瓶內(nèi)生長的狀態(tài)會比一次性相對好一些。而對于同一種細胞,在其生長旺盛快速的時期在玻璃瓶內(nèi)的生長狀態(tài)也比內(nèi)好。這可能是因為比玻璃瓶更容易貼壁。生長速度快的細胞在這種相對“更安逸”的環(huán)境里反而長得狀態(tài)不如玻璃瓶好。所以對于生長速度慢的細胞如果想要更漂亮的細胞狀態(tài),比玻璃瓶會好,對于生長速度慢的細胞,玻璃瓶則會更好。同樣,對于同一種細胞,在其生長速度慢的時候,會好一點,比如剛剛復(fù)蘇的時候,或者原代培養(yǎng)的時候。而在其生長旺盛的時候,玻璃瓶則相對會好一點。
細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:1:2傳代
造成實驗室細胞污染常見情況總結(jié):細胞培養(yǎng)中最常見污染的是細菌、真菌和支原體污染。細胞一旦污染,大多數(shù)較難處理。那么,哪些情況我們不注意的話就會造成細胞污染呢?我們根據(jù)常見細胞培養(yǎng)實驗分析總結(jié)下。【違規(guī)操作】1)為節(jié)省時間,有人已經(jīng)用超凈臺四個多小時,不開紫外滅菌30min,酒精擦拭后直接開始試驗;2)器材或者溶液很久沒用,未檢測是否污染而直接使用;離心管多次使用,槍頭為了方便交叉使用;3)超凈臺不點酒精燈;點了酒精燈放在右上角,而你在左下角做試驗;4)不帶手套,徒手操作;5)細胞培養(yǎng)間配備槍式移液器、手術(shù)器械、離心機、冰箱等專用儀器設(shè)備以及專用的實驗服和拖鞋,未定期消毒。專用物品被帶出傳代細胞使用。培養(yǎng)細胞過程中使用的所有實驗用具,如移液管、一次性槍頭、一次性塑料離心管、凍存管等未按要求滅菌使用(通常需121°C高壓滅菌20分鐘后37%烤干備用)。超凈臺和桌面,東西太多太亂:超凈臺不是儲物箱,什么培養(yǎng)皿、各種規(guī)格的板子、槍頭就不要堆在超凈臺!這樣就會有許多紫外線顧不到的衛(wèi)生死角。傳代細胞其他的桌面,切忌東西堆積如山,不要將酒精棉球、標(biāo)簽紙、牛皮紙買來后全部堆在傳代細胞!一不小心“飄”進你的細胞培養(yǎng)板里,細胞就會養(yǎng)的不好,啥時候死了都不知道!【培養(yǎng)箱太久沒清潔】細胞污染了,并非直接扔了培養(yǎng)皿就不管了,首先你還得看看這個恒溫培養(yǎng)箱里其他培養(yǎng)皿或孔板里的細胞是否污染,如果有而且好幾個板子都有類似的污染塊,那很可能是培養(yǎng)箱中的水或者空氣污染了,得給培養(yǎng)箱做個大掃除,重新酒精消毒,照紫外;孵箱里的水,水沒了要記得加,還得記得十天半個月的就用酒精擦擦托盤?!緜鞔毎硕嗫陔s,難管理】在傳代細胞這種衛(wèi)生要求高,人多了,不確定因素多了,難以保證試驗在無菌條件下操作。出入試驗室,實驗服當(dāng)風(fēng)衣穿,不扣紐扣,不戴,就容易造成細胞污染;超凈臺做實驗時,喜歡說話聊著做試驗,要是還不帶口罩,里面就有很多細菌等著去攻擊你的細胞呢!
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
AN-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U373MG細胞、COLO 320細胞、HCM細胞
Tb1.Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CPA47細胞、H-1869細胞、L363細胞
beta-TC6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BCPAP細胞、TE3細胞、Normal Rat Kidney-52E細胞
293/EBNA-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK_N_FI細胞、Ly3細胞、U2-OS細胞
SKMES1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MG63細胞、NU-GC-4細胞、SW-982細胞
細胞生長特性:貼壁生長
GB-1 Cell:人腦膠質(zhì)母細胞瘤細胞系
貼壁細胞的消化方法介紹:1、胰酶。這是用得最多的。一般濃度在0.25-0.5%。作用時間根據(jù)細胞種類、作用溫度等因素而變化很大,從幾分鐘到幾十分鐘不等。0.25%的胰酶作用于單層貼壁的細胞,在37度條件下,一般消化1-5分鐘就足夠了。終止是用血清。主要作用于細胞間。配制時不能用含、鎂的平衡液,否則影響活性。保存于-20度。2、膠原酶。這種方法比較少,一般是用原代培養(yǎng)時,從組織消化下細胞。這種方法作用溫和,對細胞損傷較小,但是,價格也較貴。中止同樣是用血清。3、EDTA。用得也是非常多。一般濃度在0.02%左右。作用于細胞與間質(zhì),對細胞間也有一定作用。注意,它能顯著影響pH值,而且在弱堿性條件下才易溶。因此,配制時應(yīng)調(diào)節(jié)好酸堿度。它不能被終和。因此,消化下來的細胞要洗一遍。4、商品化的無酶消化液。個人的使用經(jīng)常覺得對細胞的損傷比較大,但是分離成單細胞懸液的能力確實比較強。5、物理法。直接吹打或用細胞刮子將細胞刮下來。6、冷凍法。此方法僅能用于細胞傳代時。無法使組織上的細胞脫落下來。本方法的原理,我想是因細胞冷凍后收縮,從而從培養(yǎng)瓶上脫落下來。優(yōu)點是:對細胞損傷小,不需要中止或洗細胞,方便,不需要另外配制消化液。特別適用那些貼壁不是特別緊,又特別嬌氣的細胞。不足是細胞常成小片脫落。此種方法曾用于因用其它方法傳代導(dǎo)致大量細胞死亡操作的間充質(zhì)干細胞、DC細胞的培養(yǎng),效果非常滿意。具體過程是:1、用較多的4度的PBS 洗滌一遍細胞(以6孔板為例,加1.5ml/孔),2、再加0.5毫升4度的PBS,靜置操作臺上,很快細胞就小片脫落,3、輕輕吹打,細胞即完全脫落,4、按一定比例傳代。
細胞形態(tài)特性:上皮細胞
TN5B14細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MV4;11細胞、SKES-1細胞、F56 [Human neoplasm]細胞
Hs281T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HBdSMC細胞、T9細胞、MC3T3-E1 Subclone 4細胞
EJ細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hepa-RG細胞、SNT8細胞、CORL105細胞
NCM460細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Metastatic Variant 522細胞、Panc-02細胞、NCI-H774細胞
H-1703細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Porcine Kidney-13細胞、IOSE 80細胞、U343MG細胞
BE(2)C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM 149PT細胞、NT2/D1細胞、BALB/c 3T3 clone A31細胞
Jiyoye(P-2003)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Cloudman S91 melanoma clone M-3細胞、ECC1細胞、Tb 1 Lu (NBL-12)細胞
GB-1 Cell:人腦膠質(zhì)母細胞瘤細胞系
H-1105細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UWB1289細胞、Pt K2 (NBL-5)細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-330細胞
2V6.11細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IPLB-Sf21AE細胞、NCIH1299細胞、WC00044細胞
NOR-10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ROS-17/2.8細胞、H146細胞、SKNFI細胞
H-69細胞系相關(guān)產(chǎn)品:VK2 (E6/E7)細胞、E304細胞、NCI-H1048細胞
MHCC 97-H細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NIT-1細胞、SW-626細胞、16HBEo-細胞
H-2126細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A253細胞、VCaP細胞、Be Wo細胞
SU.86細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TCam-2細胞、IGROV1細胞、HPAF-I細胞
RM-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ChaGo K-1細胞、HOP-92細胞、159PT細胞
Hi-five細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HTh-74細胞、CAL851細胞、NCIH211細胞
Hi-five細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HTh-74細胞、CAL851細胞、NCIH211細胞
NCL-H548細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MOLM13細胞、HH [Human lymphoma]細胞、BEAS 2B細胞
P3X63細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM3570細胞、L6565細胞、TE 354.T細胞
MSTO211H細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NFS-60細胞、SUM-159PT細胞、CATH-a細胞
Fetal Rhesus Kidney-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IGR-OV1細胞、HOS TE85細胞、LAN-6細胞
Tokyo Medical and Dental university 8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CEK細胞、HB 611細胞、FLC-7細胞
PLC-8024細胞系相關(guān)產(chǎn)品:aTC1-6細胞、BT-B細胞、AMC-HN8細胞
NB4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hep G2細胞、H524細胞、COR-L105細胞
624mel細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO206細胞、K-562細胞、HUT-28細胞
HCC1806細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCA420細胞、GM03569細胞、COV-434細胞
AD293細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T-T細胞、MV4:11細胞、ID8/MOSEC細胞
C17.2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U 138 MG細胞、Eca109細胞、U266S細胞
Panc-1-P細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H460細胞、GM03570E細胞、PLA801-95D細胞
BEL-7402細胞系相關(guān)產(chǎn)品:5-8F細胞、P-36細胞、Epithelioma Papulosum Cyprini細胞
LOU-NH91細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL-33細胞、MDA-MB-468細胞、RINm-5F細胞
D-341Med細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MT2細胞、hTERT-HPNE細胞、RPMI #8226細胞
HPAEpiC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Colon-38細胞、IMR-90細胞、hRPTC細胞
CORL23細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DoTc2細胞、Madin Darby Bovine Kidney細胞、RF/6A細胞
MDA-MB-134-VI細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB436細胞、TGW-nu細胞、RAOEC細胞
HCC-78細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H358細胞、RPMC細胞、L-Wnt-3A細胞
Human Epithelioma-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-1171細胞、SNK6細胞、TEV-1細胞
NCI-H358細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI Ly3細胞、3T3F442A細胞、WPMY1細胞
OVCA-433細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOS細胞、NCC-IT細胞、Bowes melanoma cells細胞
C 643細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NPC-TW 01細胞、HTh74細胞、MDA-453細胞
HCEpiC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C2BBe1細胞、Meat Animal Research Center-145細胞、RFL-6細胞
HeLa/S3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Lilly Laboratories Cell-Porcine Kidney 1細胞、NCTC1469細胞、GP-293細胞
H1568細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MSTO-211細胞、NCIH1694細胞、H-676細胞
Panc-3_27細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WiDr細胞、SUIT 2細胞、PC3M-2B4細胞
HL 60細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 948細胞、B-104細胞、RERFLCMS細胞
MM1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MV 4;11細胞、Tregs細胞、NIH-3T3細胞
Panc_04_03細胞系相關(guān)產(chǎn)品:YD38細胞、J 111細胞、SNU-739細胞
OLN 93細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Co320細胞、NCI-H2452細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-16細胞
AdHek細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BHT101細胞、WPE-int細胞、Hs 766細胞
U87 MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:F56 [Human neoplasm]細胞、Chinese Hamster Lung細胞、NCI-H929細胞
GB-1 Cell:人腦膠質(zhì)母細胞瘤細胞系
SUNE-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:D10G41細胞、SCC 15細胞、Hs822T細胞
NIH/3T3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDAPC2B細胞、MDA-MB 468細胞、MX-1細胞
NCIH1618細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CFSC-2G細胞、LAN1細胞、KP-N-YN細胞
SNU761細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1694細胞、H1755細胞、Bac 1.2F5細胞
LL2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UMNSAH-DF 1細胞、HL-60細胞、SW 1116細胞
Hs 600.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:B 95.8細胞、SuDHL 1細胞、H1963細胞
SKCO-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FAT細胞、EU-3細胞、293GP細胞
SP2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD1095Sk細胞、SW 13細胞、HPB-ALL細胞
Hs 739.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U138-MG細胞、HUVSMC細胞、OVCA 432細胞
3T3L1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CATHa細胞、RKOAS451細胞、HCC-2185細胞
GB1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO 680N細胞、HL1細胞、rUCMSCs細胞
NCI-BL6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEC251細胞、Panc4.03細胞、WI-38細胞
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