"JB6 [Mouse] Cell:小鼠表皮細胞系 細胞形態(tài):上皮細胞樣 細胞生長:貼壁 細胞背景資料:表皮;自發(fā)永生;BALB/c H-2110細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RCC 786-O細胞、Hs-729-T細胞、WC00079細胞 SCCVII細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-373MG ATCC細胞、Vx-2細胞、SiHa細胞 TGHAVSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC70細胞、Hs839.T細胞、Raji細胞 BALL1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Wien 133細胞、HEH2細胞、UCLA-SO-M21細胞 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 JB6 [Mouse] Cell:小鼠表皮細胞系 因為細胞生長的時候肯定是要相互聯(lián)系,大部分的細胞都是要成片生長的,尤其是對于貼壁細胞,單個細胞貼壁之后長著長著就長到一片去了。但是如果是成片的細胞抱團的話,傳代后細胞是不能貼壁的,這樣抱團的細胞就會死亡。所以,消化傳代的時候一定要將細胞消化成單個單個的獨立狀態(tài),這個啊是非常考究你的功夫的!細胞一旦脫落入懸液里你很難再將他吹打成單個,因為他沒有受力點了。很難找到受力點讓你對他吹打的力分散開細胞。所以必須要在細胞未脫落之前將其吹打開,受力點就是細胞貼壁的地方。這樣你就必須要嚴格控制好消化的程度啊,這和大師做飯掌握好火候是一樣的道理啊。既要消化到容易吹打下來,又不能太過,一吹就整片脫落,要單個單個地往下掉。所以我才要分批分次地加胰酶消化就是為了保證不同生長狀態(tài)貼壁程度的細胞能夠都維持在好的受力點分散開。這個是很重要的一點。尤其是對于某些細胞這一點就是他活去死的致命點。像Caco-2細胞就是如此。另外關(guān)于傳代很重要一點就是一定不能等到細胞長滿的時候才去消化傳代。要在細胞長到70%左右的時候就要傳代了,一旦發(fā)現(xiàn)細胞生長中已經(jīng)有疊層生長的時候就要立即進行消化傳代。不能再拖了。關(guān)于換液傳代時候洗瓶的問題。對于用DMEM培養(yǎng)基培養(yǎng)的細胞,你在洗的時候如果是用無血清1640去洗細胞在隨即后的幾次中會比用DMEM洗的長的要好。同樣,用1640培養(yǎng)的也有這個現(xiàn)象。如果不嫌麻煩的話,可以用PBS來洗,洗的效果和用無血清培養(yǎng)基洗的效果基本上是一樣的,對于有些細胞會更勝一籌。洗的目的主要是洗去培養(yǎng)瓶里殘留的血清,防止它對胰酶的影響。這樣能夠保證胰酶的消化能力優(yōu)先,是很關(guān)鍵的一點。先補充這么多,還會后續(xù)更新。再補充一點:傳代時PBS洗是很重要的一步,最近發(fā)現(xiàn),用PBS就可以把細胞消化開來。加入PBS放置10-15分鐘,有些需要更長的時間,等到細胞一個個分離開來的時候,就可以直接吹打下來,但是和胰酶消化一樣,要控制好時間,不能時間太過了,要不然損傷細胞,細胞不容易成活,狀態(tài)容易不好。這個方法對于某些細胞是很管用的。有些細胞用胰酶消化不容易消化成單個的時候,或者臨時沒有胰酶了,可以選用此方法。不過一定要試試,看是否適合你的細胞。 細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 細胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程(請嚴格遵照無菌操作):1)吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS緩沖液潤洗細胞兩次,加2-3ml 0.25%胰酶進行消化細胞(注意把握消化時間,通??刂圃冢?2min);2)鏡下觀察消化情況,在細胞邊緣縮小,貼壁松動時(不建議消化到細胞漂浮)去掉胰酶,加6-8ml完全培養(yǎng)基,輕輕吹打細胞層,盡量把細胞層吹落,吹散;3)取部分細胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當?shù)耐耆囵B(yǎng)基,把細胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng);4)注意培養(yǎng)基PH值變化情況,定期換液(每周2-3次),待細胞密度達到80%以后重復1項操作或者凍存;特別注意:(如使用公共實驗室或者初次接觸細胞培養(yǎng),建議添加雙抗培養(yǎng))1)收到細胞后請盡快更換為含15%血清的新鮮培養(yǎng)基,如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶,請在原瓶培養(yǎng)基中額外添加10%的血清,(原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時間最長不宜超過72小時);2)貼壁細胞收到當天切忌立刻消化,請將細胞換液后放置培養(yǎng)箱孵育到第二天再做消化傳代,請優(yōu)先選擇直徑6cm的培養(yǎng)皿進行傳代培養(yǎng);3)如簽收時出現(xiàn)培養(yǎng)瓶壁破裂,漏液等情況請及時做好照片記錄并聯(lián)系實驗室。 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系 EOC20細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COV-434細胞、AgC11x3A細胞、Madin-Darby Canine Kidney細胞 NCI-H510細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1755細胞、BE(2)M17細胞、BI-Mel細胞 HCC70細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1819細胞、KHYG-1細胞、MCF-10 Attached細胞 Bronchial Epithelium transformed with Ad12-SV40 2B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:QBC(939)細胞、JB 6細胞、HIT T15細胞 D-283細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NP69細胞、NCIH2023細胞、Vero-E6細胞 細胞生長特性:貼壁 JB6 [Mouse] Cell:小鼠表皮細胞系 貼壁細胞消化傳代時通常采用兩種方法:一、加入胰酶等細胞脫落后,再加培養(yǎng)基中止胰酶作用,離心傳代;二、加入胰酶后,鏡下觀察待細胞始脫落時,棄胰酶,加培養(yǎng)液分瓶。但前者太麻煩,而后者有可能對細胞施加胰酶選擇,因為總是貼壁不牢的細胞先脫落,對腫瘤細胞來說,這部分細胞有可能是惡性程度較高的細胞亞群。一種簡單的消化傳代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(30s),棄之,再加入適量胰酶作用10s-40s(根據(jù)細胞消化的難易程度),棄之,這樣依賴殘余的胰酶就可將細胞消化單細胞。對于較難消化的細胞,可以用2%利多卡因消化5-8分鐘,然后再棄去,加培養(yǎng)基吹打也可以,對細胞的影響不大。不用PBS也不用Hanks洗,只要把舊培養(yǎng)液吸的干凈一點,直接加酶消化應該不會有什么問題。棄培養(yǎng)液后,用0.04%的EDTA沖洗一次,再用1/4v的0.04%的EDTA室溫孵育5min,棄取大部分EDTA,加入與剩余EDTA等量的胰酶(預熱)總體積1/10v。消化到有細胞脫落。不過有人說EDTA對細胞不好,有證據(jù)嗎?培養(yǎng)的BASMC:倒掉舊培養(yǎng)液加入少量胰酶沖一下,倒掉再加入0.125-0.25%胰酶約6-10滴或1ml(25ml bottle)消化再加入適量新培養(yǎng)基中和,并分瓶這種方法簡單、省事;效果很好并且不損失細胞! 細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書 OCI-LY-18細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ROS17/2.8細胞、MCA38細胞、HCC-9724細胞 KLN-205細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RCS細胞、H1437細胞、Centre Antoine Lacassagne-51細胞 HMEL細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Strain V細胞、HEK 293A細胞、H1184細胞 Baby Hamster Kidney-21細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UMC-11細胞、SW527細胞、HCC4006細胞 GM05862細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1404細胞、Hs695T細胞、OVCA-433細胞 Nb2a細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CEM clone 7細胞、PIGI細胞、Kato-III細胞 KATO 3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WTRL1細胞、L929細胞、HCC1438細胞 JB6 [Mouse] Cell:小鼠表皮細胞系 RenCa細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NIE 115細胞、SVOG細胞、MT-2細胞 H548細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Jurkat, Clone E6-1細胞、CCD18Co細胞、TSCCa細胞 KY-270細胞系相關(guān)產(chǎn)品:B78細胞、H1688細胞、COV362細胞 MLO-Y4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HELF細胞、Hs 832(C).T細胞、Jiyoye (P-2003)細胞 D562細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MIA-PaCa-2細胞、HFT8810細胞、SHSY5Y細胞 H524細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MN-60細胞、H1781細胞、GM3569細胞 Okayama University Medical School-27細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EHEB細胞、HT 1080.T細胞、2008細胞 SV-HUC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Neuro 2a細胞、NCI-UMC-11細胞、NCI-SNU-475細胞 GOS-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-837細胞、8305C_1細胞、OV-90細胞 Doubling time: ~50 hours (ATCC).細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OV1/P細胞、HFL細胞、RBSMC細胞 HEC1B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PTK 2細胞、MIMVEC細胞、OE-21細胞 OS-732細胞系相關(guān)產(chǎn)品:6T-CEM細胞、H-EMC-SS細胞、M-1細胞 Y-79細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MBT2細胞、DITNC1細胞、CX-1細胞 Hepatoma-22細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI.H522細胞、Colo320細胞、B-104細胞 GM3190細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RS4-11細胞、C17.2細胞、Hep 3B2.1-7細胞 LS-180細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO678細胞、ABC1細胞、K1735細胞 SUP T1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BT-325細胞、MT-2細胞、SKNF1細胞 VMCUB-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Huh 7.5.1細胞、NB1RGB細胞、NOR10細胞 NCIH1623細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MRC5細胞、PLA801-95D細胞、HRA19細胞 TM-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LS174細胞、3T3-A31細胞、746T細胞 Walker256-TC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM239細胞、SW-954細胞、HN4細胞 Walker256-TC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM239細胞、SW-954細胞、HN4細胞 PC3M-1E8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CEMx721.174.T2細胞、MC3T3-E1 Subclone 4細胞、Hs839.T細胞 C-32細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EST81細胞、Cloudman M3細胞、UK Pan-1細胞 MHH-CALL2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:D-283MED細胞、W133細胞、BE(2)-C細胞 GM00215細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OS-RC-2細胞、NCIH524細胞、OCI AML2細胞 P3-Jiyoye細胞系相關(guān)產(chǎn)品:M-NFS-60細胞、SHZ-88細胞、SK-RC-39細胞 C6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1975細胞、GNM細胞、MUTZ-3細胞 LNCaP.FGC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NB-19細胞、B10BR細胞、SW-1417細胞 LOUNH91細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD-112 CoN細胞、HSC-T6細胞、Vx-2細胞 SW1088細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3X63NS1細胞、SUDHL-2細胞、SW-1573細胞 HCe-8693細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MOLM-16細胞、UACC893細胞、OCIAML5細胞 HBE 135-E6E7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SaOS細胞、HPAEpiC細胞、Clone 929細胞 IALM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DMS273細胞、COS7細胞、C28/I2細胞 NEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U14細胞、H1355細胞、Clone M-3細胞 HCC2108細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BNCL2細胞、MXI細胞、SW1783細胞 T_T_細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BN-CL2細胞、NCIH82細胞、LP1細胞 697細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NUGC3細胞、CCD 841 CoN細胞、NCI-H841細胞 OVCAR 4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TSCC1細胞、HIEC細胞、NPA-87細胞 Moorfields/Institute of Ophthalmology-Muller 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC 12細胞、NCI-H810細胞、Hs 578.T細胞 Moorfields/Institute of Ophthalmology-Muller 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC 12細胞、NCI-H810細胞、Hs 578.T細胞 SW-839細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCILY19細胞、H-87細胞、Hi5細胞 H-2052細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM149-PT細胞、SCL II細胞、Hs 863.T細胞 JB6 [Mouse] Cell:小鼠表皮細胞系 H1915細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MNNG/HOS細胞、AD293細胞、SCC 25細胞 C4-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BC-024細胞、NCI-H1693細胞、MDAMB453細胞 Ketr3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HRA19細胞、VE細胞、RPMI7666細胞 Rat Skin 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UCLA SO M21細胞、B16BL-6細胞、CAL39細胞 SCC4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO 201細胞、SMA 560細胞、Pt K2細胞 Tn5 B1-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CORL51細胞、UCLA-RO 81細胞、B-3細胞 253J-Bladder-V細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LA 4細胞、KMST-6細胞、PAI細胞 MGC803細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A2780-CP細胞、SK-GT-4細胞、CEM細胞 SKRC-42細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1618細胞、Ra No. 1細胞、NK-92MI細胞 MES-SA/Dx-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RS1細胞、HEK 293T/17細胞、HSCT6細胞 PC-9S1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TK 10細胞、MDA-MB436細胞、RMG-I細胞 Mel RM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MFC細胞、RS(4;11)細胞、H647ell細胞 "
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