"WM266-4 Cell:人黑素瘤細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁
細(xì)胞背景資料：詳見(jiàn)相關(guān)文獻(xiàn)介紹
SNU1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：K-1735細(xì)胞、SNU449細(xì)胞、MM-1S細(xì)胞
DMS-79細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U031細(xì)胞、AM38細(xì)胞、UMUC1細(xì)胞
AR4-2J細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Epithelioma Papulosum Cyprini細(xì)胞、HNEpC細(xì)胞、HS0578T細(xì)胞
NCI-H226細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Doubling time: ~50 hours (ATCC).細(xì)胞、H820細(xì)胞、RA細(xì)胞
細(xì)胞物種來(lái)源：人源或鼠源等其它物種來(lái)源
WM266-4 Cell:人黑素瘤細(xì)胞系
細(xì)胞的凍存：目前，細(xì)胞凍存最常用的技術(shù)是液氮冷凍保存法，主要采用加適量保護(hù)劑的緩慢冷凍法凍存細(xì)胞。主要操作步驟為：(１)選擇處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞，在凍存前一天換液。將多個(gè)培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞培養(yǎng)液去掉，用０.２５%胰蛋白酶消化。適時(shí)去掉胰蛋白酶，加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細(xì)胞，使其成為均勻分散的細(xì)胞懸液。懸浮生產(chǎn)細(xì)胞則不要消化處理。然后將細(xì)胞收集于離心管中離心(１０００r/min，１０分鐘)。(２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培養(yǎng)基，于４℃預(yù)冷１５分鐘后，逐滴加入已無(wú)菌的DMSO或甘油，用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻，細(xì)胞濃度為３×１０(６)～１×１０(７)/mL之間。(３)將上述細(xì)胞分裝于安瓿或?qū)Ｓ美鋬鏊芰瞎苤?，安瓿裝１～１.５mL在火焰噴燈上封口，封口處要完全封閉，圓滑無(wú)勾。冷凍管要將蓋子蓋緊，并標(biāo)記好細(xì)胞名稱和凍存日期，同時(shí)作好登記(日期、細(xì)胞種類及代次、凍存支數(shù))。(４)將裝好細(xì)胞的安瓿或凍存管裝入沙布袋內(nèi);置于液氮容器頸口處存放過(guò)夜，次日轉(zhuǎn)入液氮中。采用控制降溫速度的方法也可采用下列步驟：先將安瓿置入４℃冰箱中２～３小時(shí)，再移至冰箱冷凍室內(nèi)３～４小時(shí)，再吊入液氮容器頸氣態(tài)部分存放２小時(shí)，最后沉入液氮中。細(xì)胞凍存在液氮中可以長(zhǎng)期保存，但為妥善起見(jiàn)，凍存半年后，取出一只安瓿細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng)，觀察生長(zhǎng)情況，然后再繼續(xù)凍存。
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：１：２傳代
培養(yǎng)細(xì)胞真的不難，最關(guān)鍵幾點(diǎn)：１)所有的東西使用，如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進(jìn)口的，真的很難相信你會(huì)把細(xì)胞養(yǎng)壞；２)動(dòng)作要快，胰酶消化，換液什么，細(xì)胞暴露在空氣中的時(shí)間越少越好。另外，要掌握好胰酶消化時(shí)間，所謂的細(xì)胞狀態(tài)差，很多時(shí)候是傳代的原因；３)有時(shí)間的話，需要細(xì)胞計(jì)數(shù)，傳相應(yīng)數(shù)目的細(xì)胞到培養(yǎng)皿中，可以大致清楚細(xì)胞的生長(zhǎng)曲線，不會(huì)臨時(shí)要處理，手足無(wú)措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排時(shí)間，傳代細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)穿插進(jìn)行，可以節(jié)省很多時(shí)間，也不會(huì)耽誤別人的實(shí)驗(yàn)；５)個(gè)人的實(shí)驗(yàn)器具自己收一套，不要和別人混用，最近換了什么新的東西稍微記一下，試劑一旦懷疑污染，馬上丟；６)傳代細(xì)胞不能進(jìn)去太多人，避免相互干擾。每天對(duì)待細(xì)胞比孝敬爹媽還用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丟了，培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)有哪些經(jīng)驗(yàn)教訓(xùn)可以分享呢?１)嚴(yán)格無(wú)菌操作，多噴噴酒精，要是對(duì)滅菌的東西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和別人共用試劑耗材，自己準(zhǔn)備一套；３)有可能的話在拿到新細(xì)胞的時(shí)候做好支原體衣原體檢測(cè)；４)水浴鍋很臟，生化培養(yǎng)箱要是得手動(dòng)加濕的話盤(pán)里的水也會(huì)很臟，勤換(滅菌水加進(jìn)去)；５)晚上離開(kāi)的時(shí)候給傳代細(xì)胞照紫外，超凈臺(tái)是用完就開(kāi)；６)是同一時(shí)間就你一個(gè)人在用傳代細(xì)胞在養(yǎng)細(xì)胞。
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明：細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
HT-1376細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUSM1細(xì)胞、NCI-H716細(xì)胞、KBM7細(xì)胞
BHT101細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NBL-7細(xì)胞、MB231細(xì)胞、UMUC-3細(xì)胞
NT2/D1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2170細(xì)胞、KYSE0410細(xì)胞、Y79細(xì)胞
NCIH1975細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 480細(xì)胞、Tb 1 Lu細(xì)胞、ME-1 [Human leukemia]細(xì)胞
Vero 76細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-N-BE(1)細(xì)胞、HM細(xì)胞、PG-4 S+L-細(xì)胞
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)
WM266-4 Cell:人黑素瘤細(xì)胞系
細(xì)胞復(fù)蘇相關(guān)注意事項(xiàng)：１.取細(xì)胞的過(guò)程中注意帶好防凍手套，護(hù)目鏡。此項(xiàng)尤為重要，細(xì)胞凍存管可能漏入液氮，解凍時(shí)凍存管中的氣溫急劇上升，可導(dǎo)致爆炸。２.凍存液的問(wèn)題：凍存液的配置已是常識(shí)，在這里不作詳述，但二甲基亞砜(DMSO )對(duì)細(xì)胞不是完全無(wú)毒副作用，在常溫下，二甲基亞砜對(duì)細(xì)胞的毒副作較大，因此，必須在１-２min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復(fù)蘇溫度太慢，會(huì)造成細(xì)胞的損傷，二甲基亞砜(DMSO)選擇進(jìn)口產(chǎn)品。３.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細(xì)胞解凍后二甲基亞砜濃度較高，注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度，以減少對(duì)細(xì)胞的損傷。４.離心問(wèn)題：目前主要有兩種見(jiàn)解。一種是解凍后的細(xì)胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進(jìn)行培養(yǎng)，第二天換液。因?yàn)殡x心的目的是兩個(gè)，去除DMSO，去除死細(xì)胞，這個(gè)是標(biāo)準(zhǔn)流程，但對(duì)一般人來(lái)說(shuō)，把握不好離心轉(zhuǎn)速和時(shí)間，轉(zhuǎn)的不夠活細(xì)胞沉底的少，細(xì)胞就全被扔掉了，轉(zhuǎn)過(guò)了活細(xì)胞會(huì)受壓過(guò)大，死亡。此外在操作過(guò)程中容易污染，所以不推薦。另一種說(shuō)法為細(xì)胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO)，DMSO對(duì)細(xì)胞有一定的毒副作用，所以須將離心后的液體前倒凈，且一定倒干凈。我在試驗(yàn)中按照常規(guī)的離心分裝的方法進(jìn)行復(fù)蘇，結(jié)果無(wú)異常。５.細(xì)胞貼壁少的問(wèn)題：教科書(shū)中說(shuō)明凍存細(xì)胞解凍時(shí)１ml細(xì)胞液要加１０ml-１５ml培養(yǎng)液，而在我的試驗(yàn)中的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)為培養(yǎng)基越少細(xì)胞越容易貼附。６.復(fù)蘇細(xì)胞分裝的問(wèn)題：試驗(yàn)中我的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)為復(fù)蘇１管細(xì)胞一般可分裝到１-２只培養(yǎng)瓶中，分裝過(guò)多，細(xì)胞濃度過(guò)低，不利于細(xì)胞的貼壁。７.加培養(yǎng)基的量放入問(wèn)題：這個(gè)量的多少的把握主要涉及到的問(wèn)題DMSO的濃度，從如果你加培養(yǎng)基的太少，那么DMSO的濃度就會(huì)比較大，就會(huì)影響細(xì)胞生長(zhǎng)，從以前的資料來(lái)看，DMSO的濃度在小于０.５%的時(shí)候?qū)σ话慵?xì)胞沒(méi)有什么影響，還有一個(gè)說(shuō)法是１%。所以如果你的凍存液的濃度是１０%DMSO的話那么加１０ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無(wú)害濃度。
細(xì)胞形態(tài)特性：詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書(shū)
Fox/NY細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ZR751細(xì)胞、HCS-2/8細(xì)胞、SNB-19細(xì)胞
WEHI 3B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tca-8113細(xì)胞、4T1.2細(xì)胞、Nb2-11細(xì)胞
A9 (Hamprecht)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HLF細(xì)胞、CFSC-2G細(xì)胞、HEK293S細(xì)胞
NCI-H1792細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MA 104細(xì)胞、COLO 678細(xì)胞、A-375SM細(xì)胞
KATOIII細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-841細(xì)胞、Z310細(xì)胞、NIH:OVCAR-4細(xì)胞
Karpas-422細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Colon 38細(xì)胞、T.T細(xì)胞、Caco-2/ATCC細(xì)胞
LC-1Sq細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2172細(xì)胞、Hs 281.T細(xì)胞、Ramos G6.C10細(xì)胞
WM266-4 Cell:人黑素瘤細(xì)胞系
NCIH524細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SDBMSC細(xì)胞、MDA-415細(xì)胞、Kit225細(xì)胞
NUGC-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-735細(xì)胞、MOLT 16細(xì)胞、HTR-8/SV neo細(xì)胞
Oregon J-111細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RGC6細(xì)胞、hTERT-HME1細(xì)胞、ARIP細(xì)胞
MHCC-LM3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C-28I2細(xì)胞、JROECL19細(xì)胞、Hs934T細(xì)胞
OCILY3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Madison細(xì)胞、mouse Inner Medullary Collecting Duct-3細(xì)胞、HEK AD293細(xì)胞
OCI/AML2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BrCL18細(xì)胞、CORL26細(xì)胞、MDA415細(xì)胞
MDA134細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RBL 1細(xì)胞、H-1993細(xì)胞、MDCK細(xì)胞
CCLP-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NPC-TW-039細(xì)胞、CORL51細(xì)胞、A20細(xì)胞
HeLa-229細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK 293T/17細(xì)胞、HSC-5 [Human skin squamous cell carcinoma]細(xì)胞、SP2/0 Ag-14細(xì)胞
HeLa-229細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK 293T/17細(xì)胞、HSC-5 [Human skin squamous cell carcinoma]細(xì)胞、SP2/0 Ag-14細(xì)胞
H-EMC-SS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BSC-40細(xì)胞、HS 683T細(xì)胞、U-373 MG細(xì)胞
NCI-H87細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：7404細(xì)胞、RH-35細(xì)胞、COLO824細(xì)胞
NP69細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2023細(xì)胞、LM(TK-)細(xì)胞、NCI-H1573細(xì)胞
Dysplastic Oral Keratinocyte細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ACC2細(xì)胞、SK-RC-42細(xì)胞、SKMEL1細(xì)胞
MDBK (NBL-1)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H378細(xì)胞、RIN-m細(xì)胞、COR-L23/P細(xì)胞
OS-RC-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NUGC2細(xì)胞、SF-767細(xì)胞、3T6細(xì)胞
HFL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HeLaS3細(xì)胞、hTERT RPE-1細(xì)胞、SKLU-1細(xì)胞
Hs_578t細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NOZC-1細(xì)胞、MILE SVEN 1細(xì)胞、NCIH1876細(xì)胞
Transformed Human Liver Epithelial-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NRCC細(xì)胞、TE-1細(xì)胞、S.B.細(xì)胞
HEYA8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs675T細(xì)胞、SJRH30細(xì)胞、FET細(xì)胞
AtT 20細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HN13細(xì)胞、A549/ATCC細(xì)胞、MCF7/WT細(xì)胞
Hs675T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A2780/CP70細(xì)胞、Tu-177細(xì)胞、624 MEL細(xì)胞
HONE1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：T2 (174 x CEM.T2)細(xì)胞、TR-146細(xì)胞、Rin-M-5F細(xì)胞
HTR8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JHH2細(xì)胞、Farage OL細(xì)胞、HDQP1細(xì)胞
NCI-H2342細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：174xCEM.T2細(xì)胞、NCIH889細(xì)胞、hEEC細(xì)胞
KG1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BE2M17細(xì)胞、U-87MG ATCC細(xì)胞、Hs 766T細(xì)胞
ONS76細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TCam 2細(xì)胞、He-La細(xì)胞、MG63細(xì)胞
SUM 159PT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM02132細(xì)胞、TE-5細(xì)胞、P3-X63Ag8.653細(xì)胞
EAC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-373 MG細(xì)胞、Acanthosis Nigricans 3rd attempt-CArcinoma細(xì)胞、Swiss-3T3細(xì)胞
NRK52E細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-1500細(xì)胞、SK-MEL-2細(xì)胞、SKNEP1細(xì)胞
HAVSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC95細(xì)胞、P3/NS1/1-Ag4-1細(xì)胞、Colon-38細(xì)胞
H-1417細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CFPAC1細(xì)胞、NCIH1581細(xì)胞、KOSC-2 cl3-43細(xì)胞
LL/2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-436細(xì)胞、TCCPAN2細(xì)胞、BEP2D細(xì)胞
Wien-133細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-322細(xì)胞、NL20細(xì)胞、NCIH2030細(xì)胞
H1882細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HONE1細(xì)胞、L cell細(xì)胞、LY細(xì)胞
AML-12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEL 299細(xì)胞、H1672細(xì)胞、CEF細(xì)胞
Hs 940.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CoC1細(xì)胞、TE10細(xì)胞、MEF (CF-1)細(xì)胞
BC3H1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：T9細(xì)胞、OC 316細(xì)胞、NS-20Y細(xì)胞
Eca109細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H283細(xì)胞、B104 [Rat neuroblastoma]細(xì)胞、H1341細(xì)胞
hOMF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Nthy ori 3.1細(xì)胞、JM-1細(xì)胞、OV 2008細(xì)胞
P3X63 Ag8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2291細(xì)胞、FCCH1024細(xì)胞、SU-DHL6細(xì)胞
SNU-119細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HL7702細(xì)胞、IBRS2細(xì)胞、PaCa2細(xì)胞
C166細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MD Anderson-Metastatic Breast-175-VIII細(xì)胞、NCI-SNU-601細(xì)胞、NCI-H847細(xì)胞
WM266-4 Cell:人黑素瘤細(xì)胞系
NOR10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-SNU-387細(xì)胞、SL-29細(xì)胞、UM-UC14細(xì)胞
OCM1A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：686LN-M4e細(xì)胞、C-Lu-65細(xì)胞、HUT 226細(xì)胞
UMUC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HLE細(xì)胞、HFL-1細(xì)胞、H-2029細(xì)胞
OVCAR-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：R 1610細(xì)胞、Lieming Xu-2細(xì)胞、VSC4.1細(xì)胞
MASMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-468-RED細(xì)胞、K562/ADR細(xì)胞、RPMI8226細(xì)胞
2PK3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NIH 3T6細(xì)胞、Lewis-Lung細(xì)胞、NTERA2D1細(xì)胞
TR-146細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-231細(xì)胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-3細(xì)胞、CHO細(xì)胞
OSK-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：REC-1細(xì)胞、Pro-5 Lec1.3c細(xì)胞、A-549細(xì)胞
Rin-M-5F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuP-T3細(xì)胞、HCC-1806細(xì)胞、EOC-20細(xì)胞
SU8686細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BRL3A細(xì)胞、PANC-28細(xì)胞、LuCL4細(xì)胞
143B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JVM2細(xì)胞、Hs-695-T細(xì)胞、V 79-4細(xì)胞
MDCK (NBL-2)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KMS-26細(xì)胞、EL 4細(xì)胞、SW 1222細(xì)胞
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