"PLC/PRF/5：人肝癌亞力山大傳代細胞
細胞背景資料：該細胞系分泌乙肝病毒表面抗原（HBsAg）。 此細胞系原先被支原體污染，后用BM-cycline去除支原體
KMB 17細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF10A細胞、COV362細胞、SNU216細胞
MES-23.5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3J.HR1K細胞、TMD-8細胞、RT4細胞
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞生長：貼壁
其實絕大部分細胞消化的時候是只要用胰酶潤洗一遍即可，吸去胰酶后，殘留的那些無法計算體積的附著在細胞表面的微量胰酶在３７度一般不到２min足夠消化細胞(絕大部分１min不到)。對于這些細胞原則上不要用胰酶孵育細胞，連續(xù)這樣傳代，對細胞傷害很大。簡單的程序是PBS潤洗吸去，胰酶潤洗吸去，然后３７度消化；什么算是消化好了呢？不是細胞全部成間隔分布很離散的單個圓形才算消化好了，一般你肉眼觀察貼壁細胞層，只要能移動了，多半呈沙壯移動，其實已經(jīng)可以了，很多人喜歡把細胞消化或者吹打成完全分離細胞，這是沒有必要的。一般能移動了，說明細胞與培養(yǎng)基質(zhì)材料的附著已經(jīng)消失了，細胞之間的附著也已經(jīng)消失了，細胞已經(jīng)獨立分布了(雖然沒有呈現(xiàn)很廣的離散分布)。這個時候應(yīng)該停止消化，不要等到看到鏡下所有細胞都分離得非常好，間隙很大，才停止。細胞就是完全成單個細胞懸液，之后在貼壁的過程中仍然會聚集，這個是貼壁培養(yǎng)的細胞，尤其是腫瘤細胞的一個特性，無論死活的細胞都是如此，你可以嘗試，準備１００%的單個細胞懸液，貼壁后觀察細胞，仍然是幾個幾個細胞聚集在一起。一些懸浮培養(yǎng)細胞也是如此，容易聚集，不要去嘗試過幾個小時就拿出來吹打成單細胞懸液(不要笑，這個是初養(yǎng)懸浮細胞的人常犯的錯誤，以為懸浮培養(yǎng)就是一個一個分開)。細胞只要能從基質(zhì)上脫離下來，這個時候即使是成片的(比如Calu-３細胞)，吹打不超過２０次后(一般１０次即可)，成小規(guī)模聚集(１０個細胞左右)，是正常的，不要試圖再去延長消化時間，或者像有的同學(xué)那樣吹打１h，等待單細胞懸液出現(xiàn)。
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
PLC/PRF/5：人肝癌亞力山大傳代細胞
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
BJA-B1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Me Wo細胞、Granta 519細胞、TR146細胞
HBE135-E6E7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WERIRb1細胞、NFS 60細胞、GalK1細胞
SNU-719細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HcerEpic細胞、P36細胞、Sp2/0-Ag14細胞
細胞傳代方法：１：２傳代
【細胞培養(yǎng)中支原體、黑蛟蟲、真菌的污染情況總結(jié)】支原體：黑色的，好象多為多形，培養(yǎng)液一般培養(yǎng)液一般會渾濁，原體感染，國內(nèi)血清很多都沒有做支原體陰性檢測，而支原體是牛血清中最常見的微生物之一。而且它不能用過濾的辦法除去。支原體感染細胞以后，細胞病變不很明顯，只是慢慢死去。用泰樂菌素，獸用支原體病的藥，但可用于細胞培養(yǎng)，無任何不良反應(yīng)。如果作為常用的抗生素的話, 建議用８ug/ml的濃度；黑蛟蟲：可以穿透濾膜，也可以通過空氣傳播，低倍下為黑色點狀，高倍下可看見黑色的小蟲游來游去，培養(yǎng)液也是不渾的，一般不會太影響，細胞還是可以用的。常常是細胞生長狀態(tài)良好，且觀測到的運動物無明顯增多，且培養(yǎng)液顏色、透明度無明顯變化，可在同一批號的血清養(yǎng)的細胞中發(fā)現(xiàn)類似現(xiàn)象。對細胞生長狀態(tài)不會有明顯影響，在細胞增殖旺盛之后會自然消失，除更換血清外無須特殊處理。建議如果細胞有可能是此種污染的話，可以增加細胞的種板密度，以提高細胞的生存率；真菌：一般培養(yǎng)液清亮，不變色，鏡下有絲狀物，有些真菌開始很像死細胞碎片，只是它很多很多的小塊很清楚，象珊瑚狀，不象細胞碎片分不清，慢慢的會長出很細的黑色絲狀物。真菌生長的比較慢，不象細菌那么容易被發(fā)現(xiàn)，但是一旦發(fā)現(xiàn)有它的存在細胞就被污染了，也很難救活了。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
PLC/PRF/5：人肝癌亞力山大傳代細胞
細胞生長特性：貼壁生長
C28/I2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHO/dhFr-細胞、Hos TE-85細胞、526 mel細胞
HCC-366細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2591細胞、A 549細胞、LC-1細胞
Bac1 2F5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：X63Ag8.653細胞、PanC1細胞、Hu-P-T4細胞
LCLC103H細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHO-S細胞、OAC-P4C細胞、MDA-MB-134細胞
細胞培養(yǎng)時分布不均勻，通常操作步驟：做細胞生物學(xué)實驗，細胞鋪板大概是我們最常見的一個實驗。但有時候鋪得不是很均勻：要么中間密周圍稀，要么周圍密中間禿頂。下面為大家分享幾點經(jīng)驗。盡量消化細胞分散成單細胞懸液。對于易于消化的細胞，我一般DPBS清洗一遍，加0.5ml胰酶潤洗一遍（25cm2培養(yǎng)瓶或6孔板），棄掉胰酶，37度消化2-3分鐘或室溫消化5min左右，鏡下觀察是否細胞消化較為分散。如果不夠，延長消化時間。96孔板一般以100微升每孔接種，直接用100微升移液器吸取細胞懸液，沿孔壁（稍離開一點孔底即可，不要離底太高）直接接入，移液器不需完全打到，輕輕按下即可，每鋪完一行換一次槍頭同時輕輕混勻細胞懸液。都加完后蓋上蓋子，左手輕輕扶住板的左邊，右手輕輕敲擊板的右邊緣，注意把握力度（我一般輕巧敲三下），太強或次數(shù)太多會導(dǎo)致細胞集中成堆，將板順時針旋轉(zhuǎn)（逆時針效果不好），依次敲擊剩余三個邊，靜置約5分鐘，放入37度培養(yǎng)箱。6孔板、12孔板或24孔板，可采用將每個孔加入少量無血清培養(yǎng)基，晃動浸潤整個孔底，然后用移液槍吸至第二孔，同樣方法浸潤孔底，其它孔依此類推，這樣整個孔底都是濕潤的，細胞懸液會平鋪在整個孔底，注意加完細胞懸液后要放工作臺靜置一下。這個方法就是有點慢，但操作熟練了也不慢。也可以采用輕拍的方式，但力度沒有96孔板好掌握，效果沒有96孔板好。培養(yǎng)瓶里面加好細胞以后(比如傳代好/分好細胞以后)，先順時針搖晃3次，馬上逆時針搖晃3次。然后延X軸Y軸分別水平搖動3次。放入CO2培養(yǎng)箱后,平放著培養(yǎng)瓶重復(fù)延X軸Y軸分別水平搖動3次。
HRVEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCK-81細胞、COLO_320DM細胞、L-6細胞
RIN Cl-5F細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNB19細胞、HCC9204細胞、GM15452細胞
CAL12T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L6細胞、SEG1細胞、NCI H747細胞
TC-1 [Mouse lung]細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 274細胞、HuH-28細胞、NCIH2023細胞
C-4 I細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Wills Eye Research Institute-Retinoblastoma-1細胞、THP-1(ATCC)細胞、CCRF/CEM細胞
GL261細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM02131細胞、SK-N-MC細胞、HuH-1細胞
LSECs細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H295細胞、QGY7701細胞、DHL10細胞
NL20細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RIN m5F細胞、MLFC細胞、LTEP-sm 1細胞
FLS細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs68細胞、PC10細胞、SNU484細胞
EBC-1/original細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Caki-2細胞、ACC-3細胞、AN-3細胞
OCM-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BV-173細胞、GM03320D細胞、Mv1.Lu細胞
JCA1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-Hut 125細胞、Sp2/O細胞、H-64細胞
DLD1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AgC11x3A細胞、Roswell Park Memorial Institute 1846細胞、Mahlavu細胞
HCC1008細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC1588細胞、REC細胞、SNU-16細胞
H2106細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RIMEC細胞、SW 403細胞、RCC-10RGB細胞
KU 812細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A9 (Hamprecht)細胞、SK-MEL-28細胞、SKUT-1細胞
KU 812細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A9 (Hamprecht)細胞、SK-MEL-28細胞、SKUT-1細胞
Glioma 261細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A431細胞、KYSE450細胞、WM 115細胞
526 mel細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RTE細胞、293-EBNA細胞、Biologics Standards-Cercopithecus-1細胞
NIH:OVCAR-10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPTEC TERT1細胞、HONE-1細胞、MDA MB 175 VII細胞
NSI/1-Ag4-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2066細胞、Nthy-ori 3.1細胞、alpha TC1 clone 6細胞
P3HR1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU119細胞、KYSE 450細胞、Clone 166細胞
MKN 7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCAEC細胞、COR-L279細胞、JEG-3細胞
NCI-H1385細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TCCSUP細胞、H1703細胞、LYR細胞
P3X63-Ag8.653細胞系相關(guān)產(chǎn)品：8226/S細胞、PC14細胞、OV3121細胞
MDA-MB-134VI細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-AML3細胞、LM-TK-細胞、NCI-H2087細胞
PLC/PRF/5：人肝癌亞力山大傳代細胞
H-2073細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Sf21細胞、KMB17細胞、Huh-7細胞
VMCUB-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Huh 7.5.1細胞、NB1RGB細胞、NOR10細胞
DH82細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IM-95細胞、J774 A1細胞、NCIH1793細胞
UMNSAH-DF-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U343MG細胞、WM115mel細胞、VAESBJ細胞
hRPTC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PANC0504細胞、Medical Research Council cell strain-9細胞、KCL-22細胞
CHOS細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF 7細胞、HBE 135-E6E7細胞、TYKnu細胞
IMCD3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P560細胞、MKN-1細胞、NCI-H2052細胞
WM-266-mel細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2066細胞、SK-RC-39細胞、SPC-A1細胞
HO-8910PM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：3T6細胞、TYKnu細胞、T98G細胞
P36細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MGSMC細胞、NCIH2227細胞、NHDF細胞
NCI-H1238細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1668細胞、BAC1.2F5細胞、SKMEL-31細胞
SW 962細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-Ly07細胞、MMAc.SF細胞、SNU-119細胞
SNU-251細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NSC-34細胞、751-NA-15細胞、CPA 47細胞
SKMEL5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C57 Mouse Tumor 93細胞、PC-3M-1E8細胞、293-EBNA1細胞
211H細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Gejiu Lung Carcinoma-82細胞、TO175T細胞、HSC 3細胞
CHG5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BE2-M17細胞、OCI-Ly1細胞、UCLA-SO-M20細胞
GAK細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RSC-364細胞、C-28I2細胞、SVEC4-10細胞
P3X63Ag8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK293A細胞、SCC-7細胞、SNU407細胞
Fetal Human Lens-124細胞系相關(guān)產(chǎn)品：bEnd.3[BEND3]細胞、A375-S2細胞、A-431細胞
HEK.EBNA細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2196細胞、WM115F細胞、NCIH226細胞
IOSE 29細胞系相關(guān)產(chǎn)品：293-EBNA1細胞、F442A細胞、Hx147細胞
IOSE 29細胞系相關(guān)產(chǎn)品：293-EBNA1細胞、F442A細胞、Hx147細胞
QGY7701細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U343細胞、CX1細胞、AM細胞
H-1651細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A431/P細胞、SC1細胞、LTEP-sm細胞
Y3-Ag123細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C4-1細胞、SK RC 20細胞、Hep-G2/C3A細胞
NTERA2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NBL-4細胞、NK-92 MI細胞、SW 1353細胞
HCA7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAKI1細胞、H128細胞、Hs-606-T細胞
Hs888T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C4 I細胞、LPC-H12細胞、GOS3細胞
C57 Mouse Tumor 93細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ramos(RA1)細胞、HeLa-229細胞、Sf21細胞
Karpas422細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL 12細胞、Hepa 1-6細胞、W133細胞
N2a細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MPP89細胞、Gejiu Lung Carcinoma-82細胞、SNU16細胞
A3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SF-763細胞、X63-Ag8-653細胞、NPA87細胞
SUP-B1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI 7951細胞、Hep-G2細胞、SKLMS1細胞
KOSC-2 cl3-43細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Calu6細胞、MDCC-MSB1細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-175-VIII細胞
PLC/PRF/5：人肝癌亞力山大傳代細胞
Ishikawa細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C166細胞、CCD19Lu細胞、SUM-102PT細胞
H-2227細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT1197細胞、SKNBE2C細胞、T-84細胞
LS 513細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H292細胞、Reuber H-35細胞、NTERA2-cloneD1細胞
CAL12T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L6細胞、IB-RS2細胞、KMM-1細胞
Microbiological Associates-104細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHO-K1細胞、H-1954細胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-2細胞
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關(guān)鍵字： PLC/PRF/5：人肝癌亞力山大傳代細;
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