檢測原理：

本實驗采用雙抗體夾心ELISA法。抗人G-CSF單抗包被于微孔板上，樣品和標準品中的G-CSF會與固定在板上的抗體結合，游離的成分被洗去；加入辣根過氧化酶標記的抗人G-CSF多抗，未結合的抗體被洗去；加入底物溶液（顯色劑），溶液顏色與結合的目標蛋白成正比；加入終止液；用酶標儀測定吸光度。

檢測類型：雙抗夾心法

形式：預包被96孔板

檢測樣本類型：細胞上清液，血清，血漿

上樣量：100ul

試劑盒組分：

預包被96孔板、標準品、抗人G-CSF檢測抗體、稀釋用緩沖液、顯色液（A、B）、洗滌液、終止液、SA-HRP、封板膜和說明書一份。

靈敏度：0.089-0.740 pg/mL

檢測范圍：31.3 - 2,000 pg/mL

回收率范圍：96-103%

保存方法：2-8℃

標準曲線圖

背景：

粒細胞集落刺激因子（G-CSF）是24-25 kDa單體糖蛋白，可調節(jié)嗜中性粒細胞譜系中造血細胞的增殖，分化和激活。 成熟的人G-CSF是一種178個氨基酸（aa）的O-糖基化蛋白，包含兩個鏈內二硫鍵。 在人類中，交替剪接產生具有3個氨基酸缺失的第二個亞型。 小鼠和人G-CSF具有76％的氨基酸序列同一性，并且這兩種蛋白顯示出物種交叉反應性。 G-CSF由活化的單核細胞和巨噬細胞，成纖維細胞，內皮細胞，星形膠質細胞，神經元和骨髓基質細胞產生。 另外，各種腫瘤細胞組成性表達G-CSF。

人G-CSF受體（G-CSF R）是一種120 kDa的I型跨膜糖蛋白，屬于造血素受體超家族。 成熟蛋白由603氨基酸胞外域（ECD），23氨基酸跨膜片段和186氨基酸胞質域組成。 ECD包含一個N端Ig樣結構域，一個細胞因子受體同源結構域和三個纖連蛋白III型結構域。 人G-CSF R的可變剪接產生其他同種型，包括受體的潛在可溶形式。 小鼠和人G-CSF R的ECD具有63％的氨基酸序列同一性。 G-CSF R與配體以2：2的比例形成復合物。 它在單核細胞，嗜中性粒細胞，巨核細胞，血小板，骨髓祖細胞，滋養(yǎng)細胞和胎盤，內皮細胞和各種腫瘤細胞類型上表達。

G-CSF是體內粒細胞生成的重要調節(jié)劑，G-CSF R中的突變與先天性中性粒細胞減少有關。 G-CSF可以支持多系造血祖細胞的生長，并將其從骨髓動員到血液中。 G-CSF通過限制細胞凋亡率來增強成熟中性粒細胞的功能能力并支持其生存。 G-CSF還增強了造血祖細胞引起的M-CSF誘導的單核細胞生成，并刺激了外周誘導Th2的樹突狀細胞的增殖。 它促進心肌梗塞和腦缺血后T細胞免疫耐受的發(fā)展以及組織恢復。 Human G-CSF免疫測定法是一種3.5-4.5小時的固相ELISA，旨在測量細胞培養(yǎng)上清液，血清和血漿中的人G-CSF。 它包含大腸桿菌表達的重組人G-CSF和針對重組蛋白的抗體。 已顯示可準確定量重組人G-CSF。 使用天然人G-CSF獲得的結果顯示線性曲線與使用試劑盒標準獲得的標準曲線平行。 這些結果表明該試劑盒可用于確定天然人G-CSF的相對質量值。