GC-rich PCR Buffer (4種套裝)

GC-rich PCR Buffer (4管套裝)提供了4種不同的GC-rich PCR Buffer，為擴(kuò)增高GC含量的DNA片段提供了多種不同的選擇，大大提高了高GC含量DNA片段的擴(kuò)增成功率。
各種GC-rich PCR Buffer可以單獨(dú)使用，也可以組合使用。這樣可以在更多條件下優(yōu)化PCR條件。
提供了推薦的幾種經(jīng)過優(yōu)化的GC-rich PCR Buffer的組合方式，便于用戶直接選用。
根據(jù)相關(guān)文獻(xiàn)報道，單一的GC-rich PCR Buffer對于某一個高GC含量的DNA片段的擴(kuò)增效果很好，但對于另外一個高GC含量的DNA片段則很可能會擴(kuò)增效果不太理想。正因為很難采用一種通用的GC-rich PCR Buffer 完成對于不同的高GC含量DNA片段的擴(kuò)增，因此對于高GC含量DNA片段的擴(kuò)增一直是分子生物學(xué)操作過程中的一個難點。針對這一實際情況，信裕生物推出了可以給予用戶多種條件進(jìn)行優(yōu)化組合的4管套裝GC-rich PCR Buffer。
本GC-rich PCR Buffer (4種套裝)可以適用于各種常見的耐熱DNA 聚合酶例如Taq DNA polymerase、Pfu DNA
polymerase等。
包裝清單：

保存條件：
-20℃保存。
注意事項：
在使用本試劑盒提供的GC-rich PCR Buffer的同時，必須同時使用和DNA聚合酶配套的最終濃度為1X的含鎂離子PCR Buffer。
由于PCR反應(yīng)非常靈敏可以擴(kuò)增目的基因序列超過1000萬倍，在操作時請注意避免微量待擴(kuò)增DNA的污染，并盡量考慮設(shè)置不加模板的空白對照以確認(rèn)是否有待擴(kuò)增DNA的污染。
本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內(nèi)。
為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
使用說明：

1. 1.PCR反應(yīng)參數(shù)的設(shè)置也可以參考特定的耐熱DNA聚合酶的說明進(jìn)行。通常對于擴(kuò)增高GC含量DNA片段的情況，延伸時間可以比常規(guī)的延伸時間適當(dāng)延長一些。
2. 2.PCR反應(yīng)體系的設(shè)置可以參考特定的耐熱DNA聚合酶進(jìn)行，僅僅添加適量本試劑盒所提供的GC-rich PCR buffer即可?？梢詤⒖既缦路磻?yīng)體系設(shè)置PCR反應(yīng)：
   ▼

   ▲

   試劑

   最終濃度

   體積

   體積

   雙蒸水或Milli-Q水

   -

   (26.75-x)μl

   (10.7-y)μl

   10X PCR Buffer (with Mg²⁺)

   1X

   5μl

   2μl

   5X GC-rich Buffer

   1X

   10μl

   4μl

   dNTP (2.5mM each)

   0.2mM each

   4μl

   1.6μl

   模板DNA

   10pg-1μg*

   xμl

   yμl

   引物混合物(10μM each)

   0.8μM

   4μl

   1.6μl

   Taq DNA Polymerase (5U/μl)

   1.25U/50μl

   0.25μl

   0.1μl

   總體積

   -

   50μl

   20μl
3. 3.也可以嘗試采用0.5X GC-rich Buffer:
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   試劑

   最終濃度

   體積

   體積

   雙蒸水或Milli-Q水

   -

   (31.75-x)μl

   (12.7-y)μl

   10X PCR Buffer (with Mg²⁺)

   1X

   5μl

   2μl

   5X GC-rich Buffer

   0.5X

   5μl

   2μl

   dNTP (2.5mM each)

   0.2mM each

   4μl

   1.6μl

   模板DNA

   10pg-1μg*

   xμl

   yμl

   引物混合物(10μM each)

   0.8μM

   4μl

   1.6μl

   Taq DNA Polymerase (5U/μl)

   1.25U/50μl

   0.25μl

   0.1μl

   總體積

   -

   50μl

   20μl
4. 4.還可以嘗試在PCR反應(yīng)體系中同時含有2-4種不同的1X GC-rich Buffer或0.5X GC-rich Buffer。以形成不同的組合用于優(yōu)化PCR反應(yīng)條件。優(yōu)先推薦的GC-rich Buffer 及其組合(最終濃度)包括：
   a. 1X GC-rich Buffer A
   b. 1X GC-rich Buffer B
   c. 0.5X GC-rich Buffer B
   d. 1X GC-rich Buffer C 
   e. 2X GC-rich Buffer C
   f. 1X GC-rich Buffer C + 1X GC-rich Buffer D
   g. 2X GC-rich Buffer C + 1X GC-rich Buffer D
   h. 1X GC-rich Buffer C + 0.2X GC-rich Buffer B 
   i. 2X GC-rich Buffer C + 0.2X GC-rich Buffer B 
5. 5.可以根據(jù)初步的PCR擴(kuò)增效果，再對效果較好的GC-rich Buffer再進(jìn)行優(yōu)化組合，進(jìn)一步優(yōu)化GC-rich Buffer的組合。最后根據(jù)PCR反應(yīng)的擴(kuò)增效果，選擇的GC-rich PCR buffer或其組合。