Thermolabile dsDNase
信裕生物生產(chǎn)的Thermolabile dsDNase，即熱敏感性雙鏈脫氧核糖核酸酶，是一種用于快速、安全地去除RNA樣品中基因組DNA(genomic DNA, gDNA)污染的重組表達(dá)的熱敏感性雙鏈脫氧核糖核酸酶。本產(chǎn)品可特異性剪切雙鏈DNA(double strand DNA, dsDNA)中的磷酸二酯鍵，產(chǎn)生帶有5’-磷酸與3’-羥基末端的寡核苷酸的核酸內(nèi)切酶。
本產(chǎn)品對(duì)RNA或單鏈DNA如cDNA和引物幾乎無(wú)酶切活性，在鎂離子存在的情況下，本產(chǎn)品對(duì)dsDNA的酶切活性比對(duì)ssDNA的酶切活性約高5000倍。并且本產(chǎn)品55℃加熱5分鐘即可被失活，因此非常適合用于在反轉(zhuǎn)錄之前快速便捷地去除RNA樣品中的基因組DNA污染。
本產(chǎn)品在20-40℃保持高活性狀態(tài)，比牛DNase I的活力約高30倍，但可通過(guò)55℃熱處理5分鐘而完全且不可逆地滅活。
特點(diǎn)：dsDNA特異性，特異性消化雙鏈DNA而對(duì)單鏈DNA及RNA無(wú)活性；熱不穩(wěn)定性，使用相對(duì)溫和的55℃加熱處理5分鐘可使Thermolabile dsDNase不可逆失活；活性強(qiáng)，2分鐘孵育即可將RNA樣品中所含有的基因組DNA或1μg基因組DNA消化完畢(參靠圖1)。
圖1. 信裕生物生產(chǎn)的Thermolabile dsDNase的特異性及熱敏感性檢測(cè)效果圖。A. 信裕生物生產(chǎn)的Thermolabile dsDNase、同類(lèi)產(chǎn)品(Competitor dsDNase)及DNase I (D7073)消化400bp雙鏈DNA (dsDNA)或45nt單鏈DNA (ssDNA)的效果對(duì)比圖。反應(yīng)體系均為10μl，dsDNA與ssDNA總量均為400ng，反應(yīng)條件為37°C孵育2min。圖中可見(jiàn)Thermolabile dsDNase特異性消化dsDNA，而對(duì)ssDNA無(wú)活性，DNase I對(duì)于dsDNA和ssDNA沒(méi)有選擇性。B. 55℃孵育5min可使Thermolabile dsDNase完全失活。400ng長(zhǎng)度約400bp的PCR產(chǎn)物，加入Thermolabile dsDNase后37℃孵育2min，或者先55℃孵育5min后再37℃孵育2min。
用途：制備不含DNA的RNA樣品；反轉(zhuǎn)錄前RNA樣品中去除基因組DNA污染；體外T3、T7、SP6等RNA Polymerases催化的RNA合成后消化去除模板DNA。
來(lái)源：Pichia pastoris重組表達(dá)Thermolabile dsDNase基因。
分子量：43kDa
純度：不含其它DNA內(nèi)切酶與外切酶活性，不含RNA酶活性。
酶儲(chǔ)存溶液：25mM Tris-HCl (pH7.5)，2mM MgCl2，10mM NaCl，0.01%(v/v) Triton X-100，50%(v/v) glycerol。
Reaction Buffer(10X)：200mM Tris-HCl (pH8.3)，60mM MgCl2。
失活或抑制：55℃加熱5min可使Thermolabile dsDNase完全失活；金屬離子螯合劑如EDTA、毫摩爾濃度的鋅等金屬離子、低于0.1%的SDS、高鹽以及還原劑如DTT和巰基乙醇均可抑制Thermolabile dsDNase的酶活性。
包裝清單：
產(chǎn)品編號(hào)
產(chǎn)品名稱(chēng)
包裝
XY-7078S-1
Thermolabile dsDNase
50μl
XY-7078S-2
Reaction Buffer (10X)
100μl
保存條件：
-20℃保存。
注意事項(xiàng)：
本產(chǎn)品用于反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)前RNA樣品中去除基因組DNA污染時(shí)，必須注意RNase-free的相關(guān)操作規(guī)范。
本產(chǎn)品僅限于專(zhuān)業(yè)人員的科學(xué)研究用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內(nèi)。
為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
使用說(shuō)明：
1. 使用本產(chǎn)品推薦反應(yīng)體系為10μl。待處理的RNA樣品中依次加入1μl的Thermolabile dsDNase和1μl Reaction Buffer (10X)，補(bǔ)充RNase-free water至10μl，混勻后置于37℃水浴孵育2min，即可有效去除RNA樣品中的基因組DNA污染或DNA模板等雙鏈DNA。
2. 經(jīng)過(guò)Thermolabile dsDNase處理的RNA樣品，后續(xù)如果用于反轉(zhuǎn)錄，必須在55℃加熱5min以充分滅活Thermolabile dsDNase。盡管Thermolabile dsDNase不會(huì)消化單鏈DNA，但單鏈的cDNA形成復(fù)雜的二級(jí)結(jié)構(gòu)中含有雙鏈時(shí)，還是有可能被Thermolabile dsDNase所識(shí)別并剪切的，因此在反轉(zhuǎn)錄前必須在55℃加熱5min以充分滅活Thermolabile dsDNase。
關(guān)鍵字： Thermolabile dsDNase說(shuō)明書(shū)；Thermolabile dsDNase廠家
上?？道噬锟萍加邢薰臼且患壹邪l(fā)、生產(chǎn)、銷(xiāo)售、服務(wù)于一體的一家生物科技企業(yè)，專(zhuān)營(yíng)生化試劑、標(biāo)準(zhǔn)品、基因、蛋白、抗體、Elisa試劑盒、細(xì)胞生物學(xué)，分子生物學(xué)等高生物產(chǎn)品?？偛课挥谏虾?，并在北京、廣東，江西，吉林等全國(guó)30多個(gè)省市設(shè)有分公司和代理機(jī)構(gòu)。涉及的產(chǎn)品被中國(guó)科學(xué)院、清華、北大、復(fù)旦，上海交大，復(fù)旦醫(yī)學(xué)院，上海中醫(yī)藥大學(xué)，華東師范大學(xué)，第二軍醫(yī)大學(xué)，曙光醫(yī)院，浦東新區(qū)人民醫(yī)院等知名科研院所廣泛使用，可靠而穩(wěn)定的質(zhì)量和完善的售后服務(wù)確。