細(xì)胞膜流動(dòng)性(fluidity)TMA-DPH熒光檢測(cè)試劑盒
產(chǎn)品簡介:
膜的流動(dòng)性是生物膜結(jié)構(gòu)的基本特征之一,主要指膜脂肪酸鏈部分及膜蛋白的運(yùn)動(dòng)狀態(tài)。膜脂類分子在相變溫度以上條件下主要有側(cè)向擴(kuò)散、旋轉(zhuǎn)、左右搖擺、伸縮振蕩、翻轉(zhuǎn)及異化運(yùn)動(dòng)等方式。膜蛋白的運(yùn)動(dòng)方式大體分為側(cè)向及旋轉(zhuǎn)運(yùn)動(dòng),主要受脂質(zhì)雙分子層的影響。脂肪酸不飽和鍵含量和鏈的長度明顯影響著膜脂流動(dòng)性,不飽和鍵的存在會(huì)降低膜脂分子間排列的有序性,從而增加膜的流動(dòng)性,短鏈能減低脂肪酸鏈尾部相互作用,在相變溫度下,不易于凝集,此外,脂肪酸烴鏈圍繞C- C鍵由全反式構(gòu)型到歪扭(CAUCHE)的旋轉(zhuǎn)異構(gòu)運(yùn)動(dòng),也可使流動(dòng)性加大。
生物膜適宜的流動(dòng)性是體現(xiàn)生物膜正常功能的必要條件,在一定范圍內(nèi),膜流動(dòng)性增加,有利于膜中酶分子的擴(kuò)散和旋轉(zhuǎn)運(yùn)動(dòng),使酶活性增加。一些載體蛋白分子的運(yùn)動(dòng)性也取決于膜中脂類分子的流動(dòng)性。研究發(fā)現(xiàn)腫瘤對(duì)化療藥物產(chǎn)生的耐藥性主要與細(xì)胞膜P糖蛋白過度表達(dá)谷胱甘肽及其相關(guān)酶系活性改變有關(guān),也有許多研究表明耐藥細(xì)胞膜流動(dòng)性較親代敏感細(xì)胞明顯增加。另有實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)腹水癌細(xì)胞的惡性程度隨著膜流動(dòng)性的增加而增加,白血病及轉(zhuǎn)移的腫瘤細(xì)胞的膜流動(dòng)性遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于非轉(zhuǎn)移細(xì)胞。因此,對(duì)敏感及耐藥的腫瘤細(xì)胞膜流動(dòng)性的監(jiān)測(cè)有著重要的意義。
膜流動(dòng)性的測(cè)定方法主要有熒光探針標(biāo)記,電子自旋共振以及差示掃描量熱法,x線衍射,棱碰共振等。
BBcellProbeTM TMA-DPH試劑盒是利用TMA-DPH測(cè)定膜流動(dòng)性的熒光探針法,它在脂蛋白及其類似系統(tǒng)的單分子層動(dòng)力學(xué)研究中特別有用。TMA-DPH呈圓柱形,會(huì)發(fā)生基于按長分子軸線平行排列而產(chǎn)生發(fā)射熒光向偶極躍遷,它們對(duì)由于周圍脂類相互作用而導(dǎo)致的再定位非常敏感。它們廣泛地被用于旋轉(zhuǎn)運(yùn)動(dòng)研究中的熒光偏振分析。
TMA-DPH本身不發(fā)熒光,當(dāng)與細(xì)胞膜結(jié)合后,熒光大大增強(qiáng),TMA-DPH與可用的細(xì)胞膜表面成比例,其熒光強(qiáng)度對(duì)由胞吐造成的質(zhì)膜表面積的增加敏感。因此,其熒光強(qiáng)度對(duì)于導(dǎo)致膜表面積凈變化的生理過程敏感,使其成為用于監(jiān)測(cè)諸如細(xì)胞體積和胞吐變化的事件的優(yōu)異探針。TMA-DPH熒光偏振測(cè)量可與視頻顯微鏡組合,以在大脂質(zhì)體和單細(xì)胞中提供磷脂順序的空間分辨圖像。
傳統(tǒng)的DPH探針可以進(jìn)入細(xì)胞內(nèi),試劑盒膜示蹤熒光探針TMA-DPH不能進(jìn)入細(xì)胞內(nèi),因此TMA-DPH探針較DPH探針能更準(zhǔn)確的反應(yīng)膜脂流動(dòng)性,本探針的激發(fā)波長為355nm,發(fā)射波長為430nm。
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