Annexin V- Alexa Fluor 488 / PI雙染細胞凋亡檢測試劑盒
儲存條件:
2-8℃避光保存。 長期保存于-20℃避光。長期多次使用可分裝保存,避免反復凍融。
有效期:
一年。
產品簡介:
產品背景:
細胞凋亡是細胞的基本特征之一,它在機體的胚胎發(fā)育、組織修復、內環(huán)境的穩(wěn)定和一些疾病發(fā)生過程等方面起著十分重要的作用。在正常細胞中,磷脂酰絲氨酸(PS)只分布在細胞膜脂質雙層的內側,而在細胞凋亡早期,細胞膜中的磷脂酰絲氨酸(PS)由脂膜內側翻向外側。在體內,巨噬細胞可以識別翻轉到細胞膜表面的PS 從而將這些程序性死亡的細胞清除,因此凋亡過程中并不伴隨局部的炎癥反應,而在細胞壞死的過程中則常常伴隨著炎癥反應。
AnnexinⅤ是一種分子量為35-36kD的Ca2+依賴性磷脂結合蛋白,能與細胞凋亡過程中翻轉到膜外的PS高親和力特異性結合。PS 外翻發(fā)生在細胞核破裂,DNA 片段化以及凋亡相關蛋白出現(xiàn)之前,這使得Annexin V 與PS 的結合成為凋亡早期的一種重要檢測標志事件。
檢測原理:
用標記了Alexa Fluor 488的Annexin Ⅴ作為熒光探針,利用流式細胞儀或熒光顯微鏡可檢測細胞凋亡的發(fā)生。細胞壞死的過程中也會發(fā)生細胞膜損傷,壞死的細胞會結合Annexin V-Alexa Fluor 488。正常細胞和早期凋亡細胞的細胞膜是完整的,Propidium iodide(PI)是一種核酸染料,它不能透過完整的細胞膜,但在凋亡中晚期的細胞和壞死細胞,PI能夠透過細胞膜與細胞核結合呈現(xiàn)紅色。將AnnexinⅤ與PI匹配使用,可以將凋亡早期的細胞和晚期的細胞以及死細胞區(qū)分開來。壞死細胞可以同時與Annexin V-Alexa Fluor 488和PI結合顯色,而PI則被排除在活細胞(Alexa Fluor 488陰性)和早期凋亡細胞(Alexa Fluor 488陽性)之外。在沒有巨噬細胞的情況下,凋亡的最后階段會像細胞壞死一樣發(fā)生整個細胞的解體,從而使凋亡晚期的細胞也同時被Alexa Fluor 488和PI 結合染色呈現(xiàn)雙陽性。在雙變量流式細胞儀的散點圖上,左下象限顯示活細胞,為(Alexa Fluor 488-/PI-);右上象限是非活細胞,即壞死細胞,為(Alexa Fluor 488+ /PI+);而右下象限為凋亡細胞,顯現(xiàn)(Alexa Fluor 488+ /PI-)。nnexin V-Alexa Fluor 488細胞凋亡檢測試劑盒可以方便快捷的檢測凋亡細胞,使用流式細胞儀、熒光顯微鏡或其它熒光檢測設備進行檢測。
產品特點:
● 方便:可用流式細胞儀或熒光顯微鏡檢測;
● 快速:1小時內即可完成實驗;
● 準確:能準確區(qū)分活細胞、凋亡細胞和壞死細胞,并計數(shù)各群細胞的比例。
檢測方法: 流式細胞儀或熒光顯微鏡
樣本類型: ● 懸浮細胞 ● 貼壁細胞
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