增強型DAB顯色試劑盒

產品及特點增強型 DAB 顯色試劑盒中含有檢測辣根過氧化物酶（HRP）的所有試劑，適合于檢測各種印跡膜上標記的 HRP。其反應原理是 HRP 可以催化底物 DAB 在目的蛋白所在的位置轉變?yōu)樯詈稚幕衔?，可根?jù)顏色的有無和深淺來檢測 HRP 的存在與否或存在量，進而推測 HPR 標記物識別的靶分子的位置及含量。該反應的示意圖如下：

本產品具有下列特點：

1. 即開即用，不需要用戶準備任何材料。

2. DAB 以干粉提供，方便運輸。

3. 可用于各種印跡膜（包括 Southern、Northern、Western 印跡膜）和免疫組化中的組織切片。免疫組織顯色后還可用 Nuclear fast red 復染。

4. 跟 PVDF 膜、尼龍膜兼容。

5. 顯色過程中需要避光，在顯色后可拍照或掃描。
規(guī)格及成分 成 份 編 號十孔盒包裝
DAB 干粉 LM81223a 100 mg（棕色管）
10 mL 塑料瓶 81223b 1 個
20×DAB 溶解液 81223c 5 mL
增強劑 81223d 1 mL（棕色管）
H2O2 81223e 1 mL（白蓋）
使用手冊 81223sc 1 份
注意：本產品可以配制 100mL 增強型 DAB 顯色液，但其具體使用次數(shù)根據(jù)跟印跡膜 的大小密切相關

運輸及保存 常溫運輸，4℃保存，有效期 1 年。

自備試劑 超純水、HRP 標記物（抗體或探針）處理過的印跡膜 

使用方法 注意：DAB 有毒性，處理時需要戴手套。

1. 在 10mL 塑料瓶（本試劑盒提供）中加入自備去離子水 4.75mL，加入 20× DAB 溶解液 0.25 mL，搖勻，將 100 mg DAB 干粉全部加入，充分振蕩混勻， 所得溶液即是 20×DAB 濃縮液。此溶液如果一次不能用完，可以分裝成小管 在-20℃避光放置 6 個月。

2. 按每 cm2印跡膜需要 0.1mL DAB 顯色液的比例計算所需顯色液的量，并按下 表配制 DAB 顯色液（此處以配制 10 mL 為例，用戶如需要配制其他體積，可按比例增減各成分用量）： 成份 用量 20×DAB 溶解液 0.5 mL 自備去離子水 9 mL 20×DAB 濃縮液 0.5 mL 增強劑 0.1 mL H2O2 10 uL

3. 如果是印跡膜，則迅速將印跡膜轉移到上步得到的 DAB 顯色液中，室溫避光 靜置。待印跡膜上出現(xiàn)滿意的條帶時（一般需要 2-3 分鐘，最長不超過 10 分 鐘，具體跟靶分子濃度密切相關），迅速將印跡膜轉移到盛有超純水的托盤中搖 晃，終止顯色反應。數(shù)分鐘后需要換水，共三次。用吸水紙吸干印跡膜上的水 分，照相處理后避光干燥保存印跡膜。

4. 如果是組織切片，則直接將 DAB 染色液滴加在切片上，室溫避光放置 10 分鐘， 然后浸在超純水中數(shù)次，空氣中干燥后顯微鏡下檢測或照相。