水樣病毒沉淀劑
產(chǎn)品及特點(diǎn)
生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)中,常常需要從液體樣品(如血漿,培養(yǎng)基)中純化病毒,但由于病 毒顆粒十分細(xì)小,傳統(tǒng)的分離方法是使用長(zhǎng)時(shí)間超速離心才能將其從液體樣品中分離出 來,此操作非常繁瑣,并且病毒在此過程中容易變性。為了克服傳統(tǒng)方法的缺點(diǎn),本公 司開發(fā)了本產(chǎn)品,它具有下列特點(diǎn):
1. 能濃縮病毒100倍以上,適合各種病毒。
2. 比超速離心法、密度梯度離心分離法和過濾法更溫和,回收率更高,并且大部分病 毒能保持活性,適合各種后續(xù)實(shí)驗(yàn),包括轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)和核酸純化。
3. 比超速離心法和密度梯度離心分離法簡(jiǎn)單,不需要大型離心機(jī)等設(shè)備。
4. 適合水樣、細(xì)胞培養(yǎng)基上清和其他不含細(xì)胞的樣品。本產(chǎn)品100mL可以處理400 mL 含病毒的溶液,可以將病毒濃縮100倍以上。
5. 已 經(jīng) 成 功 用 于 coronaviruses 、 rhabdoviruses 、 parainfluenzaviruses 、 respiratory syncytial virus、rubella virus、picornaviruses等病毒。
6. 對(duì)環(huán)境水樣,請(qǐng)不要使用本產(chǎn)品,而是使用水體病毒沉淀劑
規(guī)格及成分 成 份 編 號(hào) 100 mL 包裝
本產(chǎn)品 LM110810 100 mL 使用手冊(cè) 1 份
運(yùn)輸及保存 常溫運(yùn)輸和保存,有效期一年。
自備試劑 PBS 緩沖液或 TES 緩沖液(用于重懸病毒)
使用方法 注意:需要盡量減少含病毒溶液中蛋白的濃度。收集培養(yǎng)細(xì)胞分泌的病毒前,好換上 不含血清蛋白和其他蛋白成分的培養(yǎng)基。
1. 將培養(yǎng)細(xì)胞刮下,和培養(yǎng)基一起全部轉(zhuǎn)移到干凈的離心管中,10000rpm 4℃離心 20 分鐘。轉(zhuǎn)移上清(含病毒)到新離心管中。如果培養(yǎng)細(xì)胞內(nèi)還有病毒顆粒,并且 病毒顆粒可以抵抗凍融,則可以把細(xì)胞凍融數(shù)次,釋放出包漿的病毒,然后再轉(zhuǎn)移 到干凈的離心管中,10000rpm 4℃離心 20 分鐘。轉(zhuǎn)移上清(含病毒)到新離心管 中。如果病毒溶液不含細(xì)胞成分,則直接進(jìn)入下一步。
2. 在含病毒的上清中加入 1/4 總體積的本產(chǎn)品(4 mL 病毒溶液則加 1 mL 本產(chǎn)品), 4℃冰箱中放置過夜或 12 小時(shí)以上。病毒在此期間將形成沉淀。
3. 10000rpm 4℃離心 20 分鐘收集病毒沉淀,盡可能棄掉所有上清(可以暫時(shí)保留上 清,等確認(rèn)病毒濃縮成功后再丟棄)。
4. 將離心管放回離心機(jī)短暫離心數(shù)秒,再次小心去除殘留上清。
5. 將沉淀(病毒顆粒)溶于適量預(yù)冷的自備的緩沖液(如 PBS 緩沖液、TES 緩沖液和 培養(yǎng)基中,取決于后續(xù)實(shí)驗(yàn)),立即使用或者-20℃長(zhǎng)期保存。
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