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相關(guān)產(chǎn)品:
目錄號
產(chǎn)品名稱
規(guī)格
021
2× SYBR Green qPCR Mix
50次x 50μL反應(yīng)體系
022
200次x 50μL反應(yīng)體系
產(chǎn)品組成、儲存、濃度:
儲存:-20 ℃ 避光保存至少6個(gè)月,使用前充分融解混勻。短期使用可放在4 ℃,避免反復(fù)凍融。
制品說明:本制品本制品是采用SYBR Green I嵌合熒光法進(jìn)行Real Time PCR的專用試劑。已經(jīng)將DNA聚合酶、dNTP、特殊穩(wěn)定劑、優(yōu)化的反應(yīng)緩沖液、BSA和SYBR Green I等試劑預(yù)混成一種適合Real Time PCR反應(yīng)檢測用2×Premix Type試劑,具有靈敏度高、特異性強(qiáng)、穩(wěn)定性好等特點(diǎn)。使用時(shí)只需加入模板和引物和水,便可在寬廣的定量區(qū)域內(nèi)得到良好的標(biāo)準(zhǔn)曲線,對目的基因進(jìn)行準(zhǔn)確定量檢測,重復(fù)性好,可信度高。
注意事項(xiàng):
1.???????? 本制品不含參比染料ROX,客戶并根據(jù)qPCR儀器技術(shù)指導(dǎo)決定是否需要加ROX參比染料,用于消除信號本底以及校正孔與孔之間產(chǎn)生的熒光信號誤差。
2.???????? 本制品含SYBR Green I 強(qiáng)光下易分解,降低敏感度,使用時(shí)避免長時(shí)間強(qiáng)光照射本制品。
3.???????? 建議在冰上配制PCR反應(yīng)液,再放入PCR儀器中擴(kuò)增??梢蕴岣邤U(kuò)增特異性,減少背景。
4.???????? 本制品含有4 mM MgCl2(反應(yīng)體系終濃度是2 mM Mg2+),可用25mM MgCl2 優(yōu)化Mg2+濃度。
建議PCR條件(以50 μl反應(yīng)體系為例,反應(yīng)液配制請?jiān)诒线M(jìn)行)
Components
Volume
Final Concentration
2 x SYBR Green qPCR Mix
25 μl
1×
DNA Template
2 μl
as required
Forward Primer (10 μM)
1 μl
0.2 μM each
Reverse Primer (10 μM)
ddH2O to final volume
50 μl
Not applicable
PCR 循環(huán)
94℃ ?????????2~3 min???????????????????
94℃??? ?10~20 sec
55~65℃ 10~20 sec ????????35-45 cycles
72℃ ????????20~60 sec
72℃???? 5~10 min??
北京泛博生物化學(xué)有限公司
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