馬斯亮藍(Coomassie brilliant blue)是兩種相似三苯甲烷染料的總稱,有G250和R250兩種,結構上前者比后者多了2個甲基,命名上 “G”為Green 的縮寫,因G250的藍色染料泛淺綠色;命名上“R”為Red的縮寫,因R250的藍色染料呈微紅色調;“250”表示考馬斯亮藍的純度。生化實驗中常將考馬斯亮藍用于蛋白定量和蛋白電泳中蛋白染色。工作原理是:通過與蛋白質內的氨基和羧基基團間的靜電結合作用以及范德華力,考馬斯亮藍與蛋白質形成強但非共價鍵連接的復合物。蛋白-染料復合物的形成穩(wěn)定染料攜帶的負電荷陰離子(如磺酸基),從而產生在膜上或者膠上肉眼可見的藍色。
考馬斯亮藍R250(Coomassie brilliant blue R250)更多用于電泳蛋白的染色,染色靈敏度比氨基黑高5倍,可達0.1µg蛋白。R250染色后需要褪色,才能進行蛋白條帶的觀察。
考馬斯亮藍G250的檢測靈敏度雖然較低,但也可替代R250,使用一種快速而簡單的方法進行蛋白染色。因其具有以下特性,即在低于pH 2.0時,溶液無色;pH 7.0時溶液呈深藍黑色;若發(fā)生酸化,溶液呈現(xiàn)透明的棕褐色。當G250與蛋白結合,溶液又回到藍色,主要因為蛋白分子周圍具有更偏中性的pH環(huán)境。合適條件下,當把膠放在酸化的G250溶液中染色,顯示出藍色的蛋白條帶,背景呈淺琥珀色。此種方法條帶快速顯色,且背景顏色也很淺使得條帶看起來很清楚,則不需要做褪色處理。大部分蛋白用G250檢測的下限是0.5µg。雖然靈敏度降低,取而代之的是操作快速以及方便,比R250染色節(jié)省高達11 h。
G250還可通過“Bradford method”用于蛋白質定量。
英文名稱:Coomassie brilliant blue G250;Brilliant blue G;Serva blue G;Coomassie brilliant blue G;Brilliant indocyanin G;Brilliant blue G 250;Acid blue 90;C.I. 42655
其他名稱:考馬斯亮蘭G250;酸性藍90;考馬斯亮藍G;康美賽藍G250;酸性艷藍G;亮藍
CAS號:6104-58-1
C47H48N3NaO7S2=854.02
級別:High purity grade
EM(595nm,H2O):>36300
生物染色試驗:合格
性狀:暗藍-紫-棕色結晶粉末。溶于乙醇和熱水呈亮藍色,微溶于冷水。與濃硫酸顯血紅色,經稀釋變?yōu)槌燃t色,水溶液加入氫氧化鈉顯紫色。水中溶解度:40 g/L (20℃)。吸收波長 610nm。有刺激性
用途:生化研究。用于膠電泳蛋白染色。不用滲透到膠里就比萘酚藍黑B1(Naphthol Blue Black B1)靈敏度高3倍,簡單而又靈敏;可以進行各種蛋白檢測,和勞里反應相牽連的化學物質和游離氨基酸對此蛋白染色檢測無任何影響。也是P2X7嘌呤能受體激動劑
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關鍵字: 考馬斯亮藍G250
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