??????Caspase 3 活性檢測(cè)試劑盒(Caspase 3 Activity Assay Kit)是采用分光光度法檢測(cè)細(xì)胞或組織裂解液中caspase 3酶活性或純化的caspase 3酶活性的試劑盒。
??????Caspase(Cysteine-requiring Aspartate Protease)是一個(gè)在細(xì)胞凋亡過程中起重要作用的蛋白酶家族。Caspase?3也稱
CPP32、Yama或apopain，有時(shí)被寫作caspase-3或caspase 3，屬于caspase家族的CED-3亞家族(CED-3 subfamily)，是細(xì)胞凋亡過程中的一個(gè)關(guān)鍵酶。Caspase?3是哺乳動(dòng)物細(xì)胞中研究最多的一個(gè)caspase。Caspase?3可以剪切procaspase?3、6、7和9，并可以直接特異性剪切許多caspase底物，包括PARP(poly(ADP-ribose)polymerase)，ICAD(Inhibitor?of?caspase-activated deoxyribonuclease)，gelsolin和fodrin等。這些由caspase 3介導(dǎo)的蛋白剪切是細(xì)胞凋亡分子機(jī)制的重要組成部分。另外，caspase?3在細(xì)胞核凋亡過程中也起到了關(guān)鍵作用，包括染色質(zhì)固縮(chromatin?condensation)，DNA片段化(DNA?fragmentation)等。同時(shí)caspase?3對(duì)細(xì)胞起泡(cell blebbing)也起到關(guān)鍵作用。
??????本Caspase 3 活性檢測(cè)試劑盒是基于caspase 3可以催化底物Ac-DEVD-pNA(acetyl-Asp-Glu-Val-Asp?p-nitroanilide)產(chǎn)生黃色的pNA(p-nitroaniline)，從而可以通過測(cè)定吸光度來檢測(cè)caspase 3的活性。pNA在405nm附近有強(qiáng)吸收。
??????試劑盒中提供了caspase 3催化產(chǎn)生的黃色產(chǎn)物pNA，可以作為定量caspase 3酶活性的標(biāo)準(zhǔn)品。
??????本試劑盒用酶標(biāo)儀檢測(cè)或容量不超過100μl的分光光度檢測(cè)杯檢測(cè)時(shí)，除標(biāo)準(zhǔn)曲線外可以檢測(cè)20個(gè)樣品。
包裝清單：

保存條件：
??????-20℃保存，Ac-DEVD-pNA和pNA需避光保存。
注意事項(xiàng)：
??????須自備可以測(cè)定A405或A400的酶標(biāo)儀或容量不超過100μl的分光光度檢測(cè)杯及相應(yīng)分光光度計(jì)。優(yōu)先考慮測(cè)定A405，如有困難可以測(cè)定A400。
??????Ac-YVAD-pNA需盡量避免反復(fù)凍融，請(qǐng)注意適當(dāng)分裝。
??????測(cè)定蛋白濃度需Bradford蛋白濃度測(cè)定試劑盒(P0006)，可向碧云天訂購。建議樣品用水稀釋1倍后再用Bradford法測(cè)定蛋白濃度，以降低DTT對(duì)蛋白濃度測(cè)定的干擾。
??????有文獻(xiàn)報(bào)道少數(shù)類型的細(xì)胞凋亡檢測(cè)不到caspase 3的激活。?
??????pNA(中文名為4-硝基苯胺)對(duì)人體有毒，操作時(shí)請(qǐng)?zhí)貏e小心，并注意有效防護(hù)以避免直接接觸人體或吸入體內(nèi)。pNA(10mM)在4℃、冰浴等較低溫度情況下會(huì)凝固而粘在離心管管底、管壁或管蓋內(nèi)，可以20-25℃水浴溫育片刻至全部融解后使用。
??????本試劑盒的裂解液可以和碧云天生產(chǎn)的其它c(diǎn)aspase活性檢測(cè)試劑盒的裂解液通用，即本試劑盒裂解液制備的蛋白樣品可以用于碧云天其它c(diǎn)aspase活性檢測(cè)試劑盒的檢測(cè)。
? ? ? 本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內(nèi)。
??????為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。?