??????Fura-2 AM,也稱Fura-2 pentakis(acetoxymethyl) ester,是最常用的檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)鈣離子濃度的熒光探針之一。分子式為 C44H47N3O24,分子量為1001.9。 ??????本Fura-2 AM(鈣離子熒光探針)是配制于無(wú)水DMSO(anhydrous DMSO)中的儲(chǔ)存液,濃度為2mM。 ??????Fura-2 AM是一種可以穿透細(xì)胞膜的熒光染料。Fura-2 AM的熒光比較弱,激發(fā)波長(zhǎng)為369nm,發(fā)射波長(zhǎng)為 478nm,并且其熒光不會(huì)隨鈣離子濃度改變而改變。Fura-2?AM進(jìn)入細(xì)胞后可以被細(xì)胞內(nèi)的酯酶剪切形成Fura-2,從而被滯留在細(xì)胞內(nèi)。Fura-2可以和鈣離子結(jié)合,結(jié)合鈣離子后在330-350nm激發(fā)光下可以產(chǎn)生較強(qiáng)的熒光,而在380nm激發(fā)光下則會(huì)導(dǎo)致熒光減弱。這樣就可以使用340nm和380nm這兩個(gè)熒光的比值來(lái)檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的鈣離子濃度,可以消除不同細(xì)胞樣品間熒光探針裝載效率的差異,熒光探針的滲漏,細(xì)胞厚度差異等一些誤差因素。Fura-2和鈣離子結(jié)合后,激發(fā)波長(zhǎng)為335nm(激發(fā)波長(zhǎng)隨離子濃度的的不同而有所不同),發(fā)射波長(zhǎng)為505nm。實(shí)際檢測(cè)時(shí)推薦使用的激發(fā)波長(zhǎng)為340nm,發(fā)射波長(zhǎng)為510nm。如果做雙波長(zhǎng)檢測(cè),則推薦使用的激發(fā)波長(zhǎng)為340nm和380nm。Fura-2的激發(fā)光譜參考下圖,不同曲線表示不同鈣離子濃度時(shí)的激發(fā)光譜。
??????用于細(xì)胞內(nèi)鈣離子檢測(cè)時(shí),F(xiàn)ura-2 AM的常用濃度為0.5-5μM。通常用含有0.5-5μM的Fura-2 AM的適當(dāng)溶液和細(xì)胞一起在4-37℃孵育15-60分鐘,即可完成熒光探針的裝載。 包裝清單:
保存條件: ??????-20℃避光保存,6個(gè)月有效。 注意事項(xiàng): ??????本Fura-2?AM在4℃、冰浴等較低溫度情況下會(huì)凝固而粘在離心管管底、管壁或管蓋內(nèi),可以20-25℃水浴溫育片刻至全部融解后使用。 ??????熒光染料均存在淬滅問(wèn)題,請(qǐng)盡量注意避光,以減緩熒光淬滅。 ? ? ? 本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)。 ??????為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
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