"M-07e|人巨核細胞

細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹

細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書

細胞培養(yǎng)過程中，總是會出現(xiàn)各種意想不到的問題，一不留神就會全盤皆輸。所謂細胞虐我千百遍，我待細胞如初戀。下面是貼壁細胞的保藏方法，希望對細胞培養(yǎng)初學操作者有所幫助：1)觀察細胞狀態(tài)：貼壁細胞密度達到85-90%，即可以細胞凍存形式進行保藏，拍照，記錄細胞狀態(tài)；2)細胞清洗：培養(yǎng)皿表面消毒后，轉(zhuǎn)移至生物安全柜中，去除培養(yǎng)皿中培養(yǎng)液，加入12mlPBS，輕輕搖晃培養(yǎng)皿清洗細胞，隨后吸除PBS清洗液；3)細胞消化：將2ml胰酶加入培養(yǎng)皿中，完全覆蓋細胞，置于顯微鏡下觀察（期間禁止搖晃培養(yǎng)皿），當細胞剛開始脫落時，立即轉(zhuǎn)移至生物安全柜中，除去大部分胰酶，剩余約0.5ml胰酶，轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)箱內(nèi)繼續(xù)消化，每30秒肉眼觀察細胞狀態(tài)，至細胞成流沙狀完全脫落，轉(zhuǎn)移至生物安全柜中，加入12ml完全培養(yǎng)基，終止消化；4)細胞離心：將終止消化后的細胞懸液吹打均勻，吸取至15ml離心管中，1000r/min（110g），離心3min；5)細胞凍存：離心后去除細胞上清液，按照凍存細胞量5*10^5/ml，吸取凍存液重懸細胞沉淀，吹打均勻后分裝至相應(yīng)的凍存管中，進行凍存；6)細胞保藏：凍存管做好標記，放至程序降溫盒中，于4℃冰箱放置30min，轉(zhuǎn)移至-80℃超低溫冰箱過夜，將過夜后的凍存細胞轉(zhuǎn)移至液氮中保藏。

M-07e Cell

29082-92-6

細胞培養(yǎng)中常用設(shè)施及設(shè)備：實驗室設(shè)計：細胞培養(yǎng)是一種無菌操作技術(shù)，要求工作環(huán)境和條件必須保證無微生物污染和不受其它有害因素的影響。細胞培養(yǎng)室和設(shè)計原則是防止微生物污染和有害因素影響，要求工作環(huán)境清潔、空氣清新，干燥和無煙塵。細胞培養(yǎng)室的設(shè)計原則一般是無菌操作區(qū)設(shè)在室內(nèi)較少走動的內(nèi)側(cè)，常規(guī)操作和封閉培養(yǎng)于一室，而洗刷消毒在另一室。常用設(shè)施及設(shè)備：1)超凈工作臺：也稱凈化工作臺，分為側(cè)流式、直流式和外流式三大類。2)無菌操作間：一般由更衣間、緩沖間和操作間三部分組成。操作間放置凈化工作臺及二氧化碳培養(yǎng)箱、離心機、倒置顯微鏡等。緩沖間可放置電冰箱、冷藏器及消毒好的無菌物品等。3)操作間：普通培養(yǎng)箱、離心機、水浴鍋、定時鐘、普通天平及日常分析處理物。4)洗刷消毒間：烤箱、消毒鍋、蒸餾水處理器及酸缸等。5)分析室：顯微鏡、計算機及打印機等。

M-07e|人巨核細胞

細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分

細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：1ml凍存管(兩支)

HME6細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹

HT29細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹

A875細胞系；細胞傳代方法：1：3傳代；3-4天1次；細胞形態(tài)特性：多角形；細胞生長特性：貼壁生長；細胞背景資料：NGF受體陽性。

SK-MEL-24細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：4傳代，2-3天換液1次；細胞形態(tài)特性：星形的；細胞生長特性：貼壁生長；細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹

CHGF-003細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹

C33A細胞系；細胞傳代方法：1：2傳代；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁生長??；細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹

K7M2 wt細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹

細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系

M-07e|人巨核細胞

細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次。

KNS-42細胞系；細胞傳代方法：1：2傳代；細胞形態(tài)特性：多邊形；細胞生長特性：貼壁生長；細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹

OV-90細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代，3-4天換液1次；細胞形態(tài)特性：上皮細胞；細胞生長特性：貼壁生長；細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹

NCI-H1568[H1568]細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹

KYSE70細胞系；細胞傳代方法：1：5傳代；細胞形態(tài)特性：上皮樣；細胞生長特性：貼壁生長；細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹

H-4-11-E細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹

細胞培養(yǎng)常見問題及解決方案:１)培養(yǎng)瓶有破裂，培養(yǎng)液有漏液：細胞極大可能會污染，所以我們會及時安排幫老師解決；２)細胞漂浮：培養(yǎng)瓶不開封，瓶口酒精擦拭后平躺放置在培養(yǎng)箱。次日觀察，如細胞大部分又貼回瓶底，表明細胞活力正常，剩余漂浮的細胞可以離心去掉，留１０ml培養(yǎng)液培養(yǎng)觀察，細胞生長至匯合度８０%，進行消化傳代；如細胞還是不貼壁，將細胞離心收集轉(zhuǎn)到新培養(yǎng)瓶，原培養(yǎng)瓶加部分培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)，中間注意觀察，我們的技術(shù)人員會一直跟蹤指導，直到問題解決；３)對于生長緩慢的貼壁細胞：可采用適當?shù)奶岣吲囵B(yǎng)基中血清濃度，或隔日換液的方法來保證細胞的狀態(tài)和生長速度；４)對于生長不均的貼壁細胞：在培養(yǎng)過程中若出現(xiàn)細胞分布明顯不均時(即某一區(qū)域細胞已重疊生長，而旁邊則為一塊空白)，此時可將細胞進行消化，重新打散，貼壁，加入新培養(yǎng)基進行培養(yǎng)。

293(HEK-293)細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：上皮細胞樣；細胞生長特性：貼壁；細胞背景資料：早期報道中指出該細胞基因組中含有腺病毒5（Ad5）基因組的左側(cè)端和右側(cè)端的DNA，但是現(xiàn)在明確了只存在其左側(cè)端的DNA。經(jīng)過對Ad5的插入點的克隆測序發(fā)現(xiàn)，Ad5的1～4344位線性核苷酸整合入細胞染色體19q13.2。該細胞為人類腺病毒載體擴增的宿主?？杀磉_異常的玻連蛋白的細胞表面受體，由整合素β1亞單位和玻連蛋白受體α-v亞單位組成。生物安全級別為2級。

PIG3細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁；細胞背景資料：皮膚；黑色素細胞

PG細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁；細胞背景資料：巨細胞肺癌

EVSA-T細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁；細胞背景資料：乳腺癌；腹水轉(zhuǎn)移；女性

CEM-T4細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：懸??；細胞背景資料：急性T淋巴細胞白血病；女性

P116細胞系；細胞傳代方法：每周換液2—3次；細胞形態(tài)特性：淋巴母細胞；細胞生長特性：懸浮生長；細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹

RPC細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹

NCI-H2228細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代，每周2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁生長；細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹

MADB106細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹

PK(15)細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹

KLN 205細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹

8505C細胞系；細胞傳代方法：1：6傳代；細胞形態(tài)特性：成纖維細胞；細胞生長特性：貼壁生長；細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹

SW 1271細胞系；細胞傳代方法：1：3-1：6傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：上皮細胞樣；細胞生長特性：貼壁生長；細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹

MES-SA細胞系；細胞傳代方法：1：6-1：8傳代；每周2-3次；細胞形態(tài)特性：成纖維細胞樣?。患毎L特性：貼壁生長；細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹

Sall BclxL C1細胞系；細胞傳代方法：1：2傳代；細胞形態(tài)特性：淋巴母細胞；細胞生長特性：懸浮生長；細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹

M-07e|人巨核細胞

NCI-H205細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹

J45.01細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：懸?。患毎尘百Y料：急性T淋巴細胞白血??；男性

P3X63Ag8.653細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹

LN-229細胞系；細胞傳代方法：1：4-1：6傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：上皮細胞；細胞生長特性：貼壁生長；細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹

NCI-BL2141[BL2141]細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹

Jiyoye細胞系；細胞傳代方法：每周2-3次；細胞形態(tài)特性：淋巴母細胞；細胞生長特性：懸浮生長；細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹

RIMEC細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁；細胞背景資料：腸粘膜；微血管；內(nèi)皮細胞

BLO-11細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹

CRFK細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁；細胞背景資料：腎；自發(fā)永生；女性

PK(15)[PK15,PK-15]細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹

UMR-106細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：上皮細胞樣；細胞生長特性：貼壁；細胞背景資料：注射放射性同位素磷(32P)誘導產(chǎn)生的可移植性大鼠骨肉瘤克隆建立了UMR-106細胞株。 細胞對PTH，前列腺素及破骨甾體有響應(yīng)。 對PTH的響應(yīng)度，UMR-106比相關(guān)細胞株UMR-108(ATCC CRL-1663)要高。 蛋白激酶C的活化抑制ATP誘導的胞內(nèi)鈣水平的升高。 起始骨肉瘤和克隆株都是University of Sheffield的T.J. Martin建立的。

SMC-1細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁；細胞背景資料：胸膜間皮瘤

A375[A-375]細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹

HPAF-II細胞系；細胞傳代方法：1：2傳代；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁生長；細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹

LIPF178C細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁；細胞背景資料：膽管癌

MBVP細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁；細胞背景資料：腦血管

NCI-H774細胞系；細胞傳代方法：每周換液2次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：懸浮生長；細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹

DOHH-2細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹

HIBEC細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁；細胞背景資料：肝內(nèi)膽管；上皮細胞 

NKM-1細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：懸??；細胞背景資料：急性髓系白血?。荒行?/div>