"CNE1細胞：人鼻咽癌細胞

細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

CNE1 Cell

細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書

136547-17-6

我常看到一個比較復雜的四步消化法，這個挺有意思，我也是次聽說，應該是網友自己發(fā)展出來的方法，很有參考價值。但我估計這個方法可能對付少數非常怪異的細胞才需要這么復雜的程序。我目前養(yǎng)過的近300株細胞里面，還沒遇到這么怪異的。比如Caco2其實是很好消化的細胞，不需要胰酶孵育即可，只是有點成片分布。不要以為成片分布是自己沒養(yǎng)好，這個視細胞而定。如果和標準形態(tài)不一致，那可能是自己沒消化好導致的，但如果消化方法正確，仍然成片分布，甚至完全吹打成單細胞懸液，貼壁后仍然成片分布，這是細胞的特性，是因為貼壁過程中重新聚集了。這個時候你拼了命要去讓它均勻分布，你的細胞之后會對你越來越不好；比較難消化的細胞(潤洗方法5min還不能消化)，就以colon cancer為例，比如HCT15, LS411和KM12，這樣的細胞一般需要用少量胰酶孵育，但也不需要很多，一般100 mm dish，一次最多加入500ul，就足夠了，一般我加300ul。即使這樣難消化的細胞，一般不超過5min，即可見細胞成片移動，就應該停止消化。一些正常細胞也會有難消化的時候，比如tsDC細胞，但也只要用少量胰酶孵育，3min左右即可看到成片沙狀移動。

CNE1細胞：人鼻咽癌細胞

細胞生長特性：貼壁

EL4EL4細胞系；細胞傳代方法：1：2傳代；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：懸浮生長；細胞背景資料：EL4是從用9,10-二甲基-1,2-并蒽在C57BL小鼠中誘導的淋巴瘤中建立的。 能抗0.1 mM 化可的松，對20 mcg/ml PHA敏感。 還有一個亞株(EL4.IL-2, ATCC TIB-181)可以生成高水平的IL-2。 檢測表明肢骨發(fā)育畸形病毒(鼠痘)陰性。

MODE-K細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁；細胞背景資料：小腸；上皮細胞

C6細胞系；細胞傳代方法：1：2傳代；細胞形態(tài)特性：上皮細胞樣；細胞生長特性：貼壁生長；細胞背景資料：膠質細胞株C6是由Benda等用N-nitrosomethylurea誘導的大鼠膠質瘤克隆，并經過一系列的體外培養(yǎng)和動物傳代交替后建成的。 當細胞從低密度生長到滿瓶時，S-100產量增加10倍。

CRL細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞背景資料：詳見相關文獻介紹

MDA-MB-231細胞系；細胞傳代方法：消化3-5分鐘，1：2,3天內可長滿；細胞形態(tài)特性：上皮樣；細胞生長特性：貼壁生長；細胞背景資料：MDA-MB-231來自患有轉移乳腺腺癌的51歲女病人的胸水。在裸鼠和ALS處理的BALB/c小鼠中，它能形成低分化腺癌（III級）。

【細胞培養(yǎng)中支原體、黑蛟蟲、真菌的污染情況總結】支原體：黑色的，好象多為多形，培養(yǎng)液一般培養(yǎng)液一般會渾濁，原體感染，國內血清很多都沒有做支原體陰性檢測，而支原體是牛血清中最常見的微生物之一。而且它不能用過濾的辦法除去。支原體感染細胞以后，細胞病變不很明顯，只是慢慢死去。用泰樂菌素，獸用支原體病的藥，但可用于細胞培養(yǎng)，無任何不良反應。如果作為常用的抗生素的話, 建議用8ug/ml的濃度；黑蛟蟲：可以穿透濾膜，也可以通過空氣傳播，低倍下為黑色點狀，高倍下可看見黑色的小蟲游來游去，培養(yǎng)液也是不渾的，一般不會太影響，細胞還是可以用的。常常是細胞生長狀態(tài)良好，且觀測到的運動物無明顯增多，且培養(yǎng)液顏色、透明度無明顯變化，可在同一批號的血清養(yǎng)的細胞中發(fā)現類似現象。對細胞生長狀態(tài)不會有明顯影響，在細胞增殖旺盛之后會自然消失，除更換血清外無須特殊處理。建議如果細胞有可能是此種污染的話，可以增加細胞的種板密度，以提高細胞的生存率；真菌：一般培養(yǎng)液清亮，不變色，鏡下有絲狀物，有些真菌開始很像死細胞碎片，只是它很多很多的小塊很清楚，象珊瑚狀，不象細胞碎片分不清，慢慢的會長出很細的黑色絲狀物。真菌生長的比較慢，不象細菌那么容易被發(fā)現，但是一旦發(fā)現有它的存在細胞就被污染了，也很難救活了。

DMS53細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞背景資料：詳見相關文獻介紹

RTG細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞背景資料：詳見相關文獻介紹

DH82細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁；細胞背景資料：腎；Golden Retrieve

Hs 940.T細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代，2-3天換液1次；細胞形態(tài)特性：成纖維細胞；細胞生長特性：貼壁生長；細胞背景資料：詳見相關文獻介紹

RKN細胞系；細胞傳代方法：1：2傳代；細胞形態(tài)特性：上皮細胞；細胞生長特性：貼壁生長；細胞背景資料：詳見相關文獻介紹

STO細胞系；細胞傳代方法：1：2傳代；細胞形態(tài)特性：成纖維細胞樣；細胞生長特性：貼壁生長；細胞背景資料：STO是一株繼代生長的胚成纖維細胞系，可用于制備飼養(yǎng)層細胞（feederlayers）和其他研究。

CNE1細胞：人鼻咽癌細胞

細胞產品包裝：復蘇形式：T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：1ml凍存管(兩支)

細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數國外著名大學建系

目前，跟公司簽訂長期戰(zhàn)略合作伙伴的科研單位有山西中醫(yī)學院、福建醫(yī)科大學附屬第二醫(yī)院、上海市第六人民醫(yī)院、北京大學醫(yī)學部、同濟大學、四平中心醫(yī)院、廣州中醫(yī)藥大學、中科院上海生命科學研究院生化與細胞研究所、解放軍第306醫(yī)院、江南大學、西南醫(yī)院、吉首大學、西南大學化學化工學院、寧波大學、福建醫(yī)科大學附屬醫(yī)院、蘇州市同濟醫(yī)院、中南大學、延安大學附屬醫(yī)院、中國科學院上海藥物研究所、天津市兒童醫(yī)院、江蘇省中醫(yī)藥研究院、湘雅醫(yī)學院、第四軍醫(yī)大學預防系勞動與環(huán)境教研室、揚州大學、上海交通大學、中國醫(yī)科大學、浙江省立同德醫(yī)院、中國人民解放軍第150中心醫(yī)院、蘇州大學、四川大學華西醫(yī)院、云南大學、揚州大學獸醫(yī)學院、上海交通大學醫(yī)學院附屬第九人民醫(yī)院、海南醫(yī)學院、江蘇腫瘤醫(yī)院、上海市閔行區(qū)中心醫(yī)院、大連醫(yī)科大學附屬醫(yī)院、中國科學院廣州生物醫(yī)藥與健康研究院、沈陽藥科大學、廣州市第八人民醫(yī)院、南京大學、浙江中醫(yī)藥大學、蘭州大學、上海中醫(yī)藥大學、中國農業(yè)科學院飼料研究所、廈門市婦幼保健院、大學、南京軍區(qū)總醫(yī)院、天津市人民醫(yī)院、北京醫(yī)學科學腫瘤醫(yī)院、上海市同濟醫(yī)院、江蘇大學、桂林醫(yī)學院附屬醫(yī)院、中國科學院化學研究所

細胞背景資料：鼻咽癌；高分化

CNE1細胞：人鼻咽癌細胞

細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次。

傳代細胞培養(yǎng)注意事項：1)掌握好細胞消化的時間，消化時間過短時，細胞不宜從瓶壁脫落，過長的消化會導致細胞脫落、損傷；2)掌握好消化濃度，當消化液濃度過高時，消化時間應縮短，過低時細胞消化時間相對延長。體內細胞培養(yǎng)及其操作步驟：瘤細胞懸液接種1)無菌選取生長良好(有光澤，淡紅色)瘤組織或對數生長期培養(yǎng)瘤細胞；2)在PBS中將瘤組織剪碎后用勻漿器研磨，經80～100目篩網過濾成細胞懸液；3)培養(yǎng)細胞應用PBS洗兩遍；4)計數并調整細胞濃度至10(7)～10(8)/ml；5)常規(guī)消毒后，于接種部位(通常為背部或腋窩腹股溝皮下)用醫(yī)用注射器皮下潛行一段后注入細胞懸液(0.1ml/部位，＞10(6)細胞)。初次接種成功率低，細胞數盡可能多一些；6)次日注意觀察動物一般情況。初次接種一般有一段較長的潛伏期，以后隨著傳代潛伏期逐漸縮短，最后固定為一個相對穩(wěn)定的時間。腹水瘤的建立與腹水瘤的接種：將實體瘤細胞直接種于小鼠腹腔、腹壁或其他部位，引起腹水，腹水中含有瘤細胞，將這種腹水反復傳代，即可成為腹水瘤。初次傳代時，腹水常呈血性(含大量紅細胞)，反復傳代后腹水逐漸變成乳白色。腹水瘤的接種過程如下：1)將凍存或培養(yǎng)的腹水瘤細胞離心和洗滌，進行細胞計數；2)消毒動物，左下腹穿刺接種1×10(6)腹水瘤細胞；3)接種腹水瘤細胞后約7-12d，待小鼠腹部明顯膨大。用碘酒棉球消毒小鼠腹部，用9號針頭抽取腹水，也可行腹部解剖后，用滴管吸取。每只小鼠可抽3-5ml；4)抽取的腹水經3000rpm離心15min，收集上清，分裝凍存?zhèn)溆谩?/div>