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酵母基因組DNA提取試劑盒,Yeast Genomic DNA Extraction Kit
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酵母基因組DNA提取試劑盒

價格 詢價
包裝 50次
最小起訂量 50次
發(fā)貨地 北京
更新日期 2025-06-30

產品詳情

中文名稱:酵母基因組DNA提取試劑盒英文名稱:Yeast Genomic DNA Extraction Kit
產品類別: 基因提取 DNA純化
2025-06-30 酵母基因組DNA提取試劑盒 Yeast Genomic DNA Extraction Kit 50次/RMB 基因提取 DNA純化

酵母基因組DNA提取試劑盒

Yeast DNA Kit

試劑盒內容及保存:

試劑盒組成

RTG2409

50次)

貯存方式

緩沖液YL

13 ml

常溫

緩沖液YBL

13 ml

常溫

緩沖液SE

15 ml

常溫

DNA Wash Buffer (濃縮液)

13 ml

常溫

緩沖液WB

30 ml

常溫

洗脫緩沖液EB

15 ml

常溫

蛋白酶K

1 ml

-20℃

Lyticase

1.6 ml

-20℃

RNaseA

0.5 ml

-20℃

Glass Beads

3 g

常溫

吸附柱CG

50個

常溫

收集管(2 ml)

50個

常溫

說明書

1份

 

 

儲存條件和效期:

室溫保存,12個月內有效。Proteinase K與Lyticase-20℃保存。緩沖液 YBL與緩沖液 YL可能有沉淀產生,37度水浴溶解后即可。

產品簡介:

酵母DNA提取試劑盒(Yeast DNA Kit)采用了一種新型的硅膠柱。在特定條件下,使DNA能在離心過柱的瞬間,結合到純化柱上,在一定條件下又能將DNA充分洗脫,從而實現(xiàn)DNA的快速純化。無需酚氯仿抽提,無需酒精沉淀。純化的DNA可直接用于PCR、Southern雜交和酶切等。

準備工作:

1. 準備30℃,65℃,70℃水??;無水乙醇;制冰機;1.5ml離心管;2ml離心管

2. 按照標簽所示在DNA Wash Buffer中加入無水乙醇,混勻后蓋緊瓶蓋后室溫貯存?zhèn)溆谩?/p>

3. 每次使用前請檢查緩沖液YBL,緩沖液YL是否有沉淀生成,如果出現(xiàn)沉淀,37℃溫浴至沉淀溶解后再使用。

標準操作步驟:

如非指出,所有離心步驟均為使用臺式離心機在室溫下離心。

1. 取1-3 ml 酵母培養(yǎng)物(不超過3×107 酵母細胞),12,000 rpm (~13,400×g )離心1分鐘,盡量吸除上清(菌液較多時可以通過幾次離心將菌體沉淀收集到一個離心管中)。

注:可用分光光度計或平板培養(yǎng)法檢測菌體量,一般對于釀酒酵母OD600值為1.0時,相當于1-2×107cell/ml。

2. 加入480 μl 緩沖液 SE,完全重懸細胞。加入30μl Lyticase溶液。30℃水浴處理30min。期間振蕩幾次。

注意:以處理時間為經驗值,根據酵母菌株和酵母細胞數量的不同,孵育時間應該進行適當調整。 

3. 4000 rpm(~1500×g)離心10鐘,棄上清,收集沉淀。加入200μl 緩沖液 YL重懸。加入50mg Glass Beads,劇烈渦旋5min。

4. 加入20μl  蛋白酶K,混勻。65℃水浴孵育直至裂解完全,孵育過程中,渦旋幾次。一般來說1小時以內能徹底裂解。

5. 可選步驟:加入5μl RNaseA并反復顛倒混勻,在室溫條件下孵育5分鐘。

6. 12,000 rpm (~13,400×g )離心1分鐘,轉移上清至新的離心管中。

7. 加入220 μl 緩沖液 YBL,振蕩15  秒,70℃放置10  分鐘,溶液應變清亮。

注意:加緩沖液YBL 時可能會產生白色沉淀,一般70℃放置時會消失,不會影響后續(xù)實驗。如溶液未變清亮,說明細胞裂解不徹底,可能導致提取DNA量少和提取出的DNA不純。

8. 加220 μl 無水乙醇,充分混勻,此時可能會出現(xiàn)絮狀沉淀。

9. 將上一步所得溶液和絮狀沉淀都加入吸附柱中(吸附柱放入收集管中),12,000 rpm (~13,400×g ) 離心30  秒,倒掉廢液,將吸附柱放入收集管中。

10.  向吸附柱中加入500 μl  緩沖液 WB,12,000 rpm (~13,400×g )  離心30  秒,倒掉廢液,將吸附柱放入收集管中。

11. 向吸附柱  中加入600 μl DNA Wash Buffer(使用前請先檢查是否已加入無水乙醇),12,000 rpm (~13,400×g )  離心30秒,倒掉廢液,吸附柱放入收集管中。

12.  向吸附柱中加入600 μl DNA Wash Buffer,12,000 rpm (~13,400×g ) 離心30秒,倒掉廢液,將吸附柱放入收集管中。

13. 12,000 rpm(~13,400×g)離心2 分鐘,以徹底晾干吸附材料中殘余的漂洗液。

14.  將吸附柱轉入一個干凈的離心管中,向吸附膜的中間部位懸空滴加50-200 μl  洗脫緩沖液EB或滅菌去離子水,室溫放置2-5分鐘,12,000 rpm (~13,400×g )  離心1分鐘,將溶液收集到離心管中。

注:洗脫緩沖液體積不應少于50 μl,體積過小影響回收效率。洗脫液的pH值對于洗脫效率有很大影響。若用水做洗脫液應保證其pH  值在7.0-8.5  范圍內(可以用NaOH將水的pH  值調到此范圍),pH  值低于7.0  會降低洗脫效率;

15. DNA產物應保存在-20℃,以防DNA降解。

DNA濃度及純度檢測:

基因組DNA片段的大小與樣品保存時間、操作過程中的剪切力等因素有關。提取的DNA片段可用瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計檢測濃度與純度。可配制0.8-1.0%瓊脂糖凝膠,使用λ/HindIII判斷基因組的大小,完整的基因組大小應在23kb以上。使用分光光度計檢測時, OD260/OD280比值應為1.7–1.9之間,如果洗脫時不使用洗脫緩沖液,而使用去離子水洗脫,比值可能偏低,但并不表明DNA純度不高。

關鍵字: 酵母基因組DNA提取試劑盒_DNA純化_DNA提取_

公司簡介

中科瑞泰(北京)生物科技有限公司成立于2006年,是一家致力于產品研發(fā)、試劑銷售、技術服務為一體的生物技術企業(yè)。公司秉承“以人為本,誠信至上”的服務理念,依靠客戶的大力支持和我們的不懈努力獲得了快速的發(fā)展。 公司組織結構清晰,內部管理科學,擁有一支配備合理的年輕化隊伍,充分保障了公司的研發(fā)能力和在競爭日益激烈的市場中占據一席之地。 我們深知一顆幼苗的萌發(fā)和成長不僅需要我們堅強的信念和持久的毅力,更離不開廣大用戶的呵護和培養(yǎng),是廣大客戶給了我們廣闊的成長和發(fā)展空間,使這顆幼苗得以抽枝展葉,繼而繁茂生長。在這里,請廣大客戶接受我們最為誠摯的謝意!我們也承諾將為你們提供最為優(yōu)質的產品和最為優(yōu)良的
成立日期 2006-07-31 (19年) 注冊資本 10.000000萬人民幣
員工人數 50-100人 年營業(yè)額 ¥ 300萬-500萬
主營行業(yè) 細胞培養(yǎng),蛋白組學,分子生物學,免疫安全,生物芯片 經營模式 貿易,工廠,試劑,定制,服務
  • 中科瑞泰(北京)生物科技有限公司
普通會員
  • 公司成立:19年
  • 注冊資本:10.000000萬人民幣
  • 企業(yè)類型:有限責任公司(自然人投資或控股)
  • 主營產品:技術服務、技術推廣;銷售儀器儀表、化工產品(不含危險化學品及一類易制毒化學品)、衛(wèi)生用品、文化用品、計算機、軟件及輔助設備。
  • 公司地址:北京市海淀區(qū)高里掌路1號院6號樓301-13
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