植物花色苷含量試劑盒說明書 

分光光度法 50 管/48 樣 

正式測定前務(wù)必取 2-3 個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定 

測定意義：

花色苷是一類易溶于極性溶劑的天然色素，屬黃酮類化合物?；ㄉ諒V泛存在于植物的根、莖、葉、 花和果實(shí)中，使其呈現(xiàn)由紅到紫等不同顏色，是植物主要的呈色物質(zhì)。 

測定原理：

采用 pH 示差法測定花色苷含量，當(dāng) pH 為 1.0 時(shí)花色苷在 530nm 處有最大吸收峰,而當(dāng) pH 為 4.5 時(shí), 花色苷轉(zhuǎn)變?yōu)闊o色查爾酮形式,在 530 處無吸收峰, 利用此特性分別測定在不同 pH 下的 530nm 和 700nm 處 的吸光度值。pH 示差法減少了溶液 pH 和溶劑差異的影響，排除了其他非花色苷類物質(zhì)對(duì)檢測結(jié)果的干擾。

需自備儀器和用品：

可見分光光度計(jì)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1ml 玻璃比色皿、研缽和蒸餾水 按照烘干樣品質(zhì)量（g）：提取液體積(ml)為 1：5~10 的比例（建議稱取約 0.1g 烘干樣品，加入 1ml 提取 液），充分勻漿后轉(zhuǎn)移到 EP 管中，提取液定容至 1 ml，蓋緊后 4℃浸提 24 h，8000 g，25℃離心 10 min， 取上清液待測。

測定步驟：

1、分光光度計(jì)預(yù)熱 30min 以上；試劑一和試劑二預(yù)熱 10min 以上。

2、取 100 μl 上清液和 900 μl 試劑一（相當(dāng)于稀釋 10 倍），40℃水浴 20min，分別測定 530nm 和 700nm 處的吸光值，分別記為 A1 和 A2。 

3、 取 100 μl 上清液和 900 μl 試劑二（相當(dāng)于稀釋 10 倍），40℃水浴 20min，分別測定 530nm 和 700nm 處的吸光值，分別記為 A3 和 A4。 

4、 計(jì)算△A=（A1-A2）-(A3-A4)。