絞股藍(lán)苷 XVII 通過(guò)雌激素受體依賴性激活 Nrf2/ARE 通路減弱 Aβ25-35 誘導(dǎo)的平行自噬和凋亡細(xì)胞死亡。

β 淀粉樣蛋白 （Aβ） 在阿爾茨海默病的發(fā)病機(jī)制中起著關(guān)鍵作用。
方法和結(jié)果：
為了研究 Aβ 神經(jīng)毒性，我們使用了一種體外模型，該模型涉及 Aβ25-35 誘導(dǎo)的神經(jīng)生長(zhǎng)因子誘導(dǎo)的 PC12 細(xì)胞分化中的細(xì)胞死亡。Aβ25-35 （20μM） 處理 24 小時(shí)導(dǎo)致凋亡細(xì)胞死亡，PC12 細(xì)胞中細(xì)胞活力顯著降低、LDH 釋放、磷脂酰絲氨酸外化、線粒體膜電位破壞、細(xì)胞色素 c 釋放、caspase-3 激活、PARP 切割和 DNA 片段化證明了這一點(diǎn)。Aβ25-35 處理導(dǎo)致自噬細(xì)胞死亡，GFP-LC3 點(diǎn)增加、LC3-I 轉(zhuǎn)化為 LC3-II 以及 LC3-II/LC3-I 比率增加證明了這一點(diǎn)。Aβ25-35 治療誘導(dǎo)氧化應(yīng)激，細(xì)胞內(nèi) ROS 積累和線粒體超氧化物、丙二醛、羰基蛋白和 8-OHdG 的產(chǎn)生增加證明了這一點(diǎn)。植物雌激素已被證明對(duì) Aβ 誘導(dǎo)的神經(jīng)毒性具有保護(hù)作用，并被認(rèn)為是 AD 藥物開發(fā)的相對(duì)安全的靶點(diǎn)。絞股藍(lán)皂苷 XVII （GP-17） 是從絞股藍(lán)或三七中分離的一種新型植物雌激素。股藍(lán)皂苷 XVII （10μM） 預(yù)處理 12 小時(shí)增加了雌激素反應(yīng)元件報(bào)告基因活性，激活了 PI3K/Akt 通路，抑制了 GSK-3β，誘導(dǎo)了 Nrf2 核易位，增強(qiáng)了抗氧化反應(yīng)元件增強(qiáng)子活性，上調(diào)了血紅素加氧酶 1 （HO-1） 的表達(dá)和活性，并提供了對(duì) Aβ25-35 誘導(dǎo)的神經(jīng)毒性（包括氧化應(yīng)激、細(xì)胞凋亡和自噬細(xì)胞死亡）的保護(hù)作用。總之，絞股藍(lán)皂苷 XVII 通過(guò)雌激素受體依賴性激活 PI3K/Akt 通路、GSK-3β 失活和 Nrf2/ARE/HO-1 通路激活，對(duì) Aβ25-35 誘導(dǎo)的神經(jīng)毒性提供保護(hù)。
結(jié)論：
這一發(fā)現(xiàn)可能為理解植物雌激素或絞股藍(lán)苷的神經(jīng)保護(hù)作用機(jī)制提供新的見(jiàn)解。

來(lái)自約翰遜黃桿菌的重組 β-葡萄糖苷酶將人參皂苷 Rb1 和絞股藍(lán)皂苷 XVII 酶促生物轉(zhuǎn)化成人參皂苷 Rd 和 F2。

方法和結(jié)果：
本研究側(cè)重于使用來(lái)自約翰遜黃桿菌的新型重組 β-葡萄糖苷酶將主要人參皂苷 Rb1 酶生物轉(zhuǎn)化成 Rd，用于大規(guī)模生產(chǎn)次要人參皂苷?？寺∮?2,235 bp （744 個(gè)氨基酸殘基） 組成的基因 （bglF3），并表征了在大腸桿菌 BL21 （DE3） 中過(guò)表達(dá)的重組酶。該酶可以將人參皂苷 Rb1 和絞股藍(lán)皂苷 XVII 分別轉(zhuǎn)化為人參皂苷 Rd 和 F2。用 GST 結(jié)合瓊脂糖樹脂純化谷胱甘肽 S-轉(zhuǎn)移酶 （GST） 融合的 BglF3 并進(jìn)行表征。β-葡萄糖苷酶對(duì)對(duì)硝基苯基-β-D-吡喃葡萄糖苷和 Rb1 蛋白 （-1） 的表觀 Km 值為 0.91±0.02 和 2.84±0.05 mM，Vmax 值分別為 5.75±0.12 和 0.71±0.01 μmol·min（-1）·mg。在 pH 6.0 和 37°C 的最佳條件下，BglF3 只能在糖苷基的 C-20 位置將人參皂苷 Rb1 和絞股藍(lán)皂苷 XVII 的外葡萄糖部分分別水解成人參皂苷 Rd 和 F2。
結(jié)論：
這些結(jié)果表明，重組 BglF3 可用于制藥或化妝品行業(yè)人參皂苷 Rd 和 F2 的大規(guī)模生產(chǎn)。

絞股藍(lán)皂苷 XVII 通過(guò) TFEB 激活增強(qiáng)溶酶體生物發(fā)生和自噬通量，并加速淀粉樣蛋白β的自噬清除。

激活轉(zhuǎn)錄因子 EB （TFEB） 以恢復(fù)自噬通量的策略可能提供針對(duì)阿爾茨海默病的神經(jīng)保護(hù)。我們之前的研究報(bào)道了絞股藍(lán)皂苷 XVII （GP-17） 是人參和三七中豐富的主要皂苷，通過(guò)調(diào)節(jié)自噬改善 PC12 細(xì)胞中的淀粉樣蛋白-β （Aβ）25-35 誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡。
方法和結(jié)果：
在本研究中，我們旨在確定 GP-17 是否對(duì)表達(dá) APP695 （APP695swe） 瑞典突變體的 PC12 細(xì)胞和 APP/PS1 小鼠具有神經(jīng)保護(hù)作用。我們還研究了潛在的機(jī)制。我們發(fā)現(xiàn) GP-17 可以顯著增加 APP695 細(xì)胞中 Atg5 的表達(dá)和 LC3-I 向 LC3-II 的轉(zhuǎn)化，這與 p62 表達(dá)的降低有關(guān)。GP-17 還增加了用 pCMV-GFP-LC3 轉(zhuǎn)導(dǎo)的 APP695 細(xì)胞中 LC3 點(diǎn)的數(shù)量。GP-17 促進(jìn) APP695swe 細(xì)胞中基于自噬的 AβPP 、 Aβ40 和 Aβ42 消除，并阻止 APP/PS1 小鼠海馬和皮層中 Aβ 斑塊的形成。此外，空間學(xué)習(xí)和記憶缺陷也得到了治愈。Atg5 敲除可以消除 GP-17 介導(dǎo)的 APP695swe 細(xì)胞中 AβPP 、 Aβ40 和 Aβ42 的去除。GP-17 上調(diào) LAMP-1，增加 LysoTracker 染色，并增強(qiáng) LAMP-1/LC3-II 共定位。GP-17 可以從 TFEB/14-3-3 復(fù)合物中釋放 TFEB，導(dǎo)致 TFEB 核易位和自噬和溶酶體生物發(fā)生的誘導(dǎo)，并導(dǎo)致自噬通量的改善。敲除 TFEB 可以消除 GP-17 的這些作用。
結(jié)論：
綜上所述，這些結(jié)果表明，GP-17 通過(guò)激活 TFEB 賦予阿爾茨海默病細(xì)胞和嚙齒動(dòng)物模型的保護(hù)作用。