管苷 I 的抗微管活性及其微管蛋白的秋水仙堿結(jié)合位點(diǎn)。

Tubeimoside I 通過(guò)下調(diào) ERK 和上調(diào) p38 信號(hào)通路使順鉑耐藥人卵巢癌細(xì)胞 （A2780/DDP） 中的順鉑敏感。

順鉑 （CDDP） 是一種用于治療人類(lèi)卵巢癌的主要化療藥物。Tubeimoside I （TBMS1） 也顯示出強(qiáng)大的抗腫瘤和抗腫瘤促進(jìn)作用，可能為有效治療 CDDP 耐藥人類(lèi)卵巢癌提供一種有前途的新方法。 本研究旨在探討 TBMS1 在 CDDP 耐藥人卵巢癌細(xì)胞 （A2780/DDP） 中致敏 CDDP 的作用。
方法和結(jié)果：
采用多種方法測(cè)量細(xì)胞凋亡、 p38 、 ERK1/2 和谷胱甘肽 S-轉(zhuǎn)移酶 （GST） π表達(dá)。研究發(fā)現(xiàn)，TBMS1 聯(lián)合 CDDP 促進(jìn)細(xì)胞凋亡，降低增殖活性并增加胞質(zhì) Ca2+ 水平。Bcl-2 蛋白表達(dá)下調(diào)，而 Bax 上調(diào)。此外，GST-π mRNA 和蛋白質(zhì)表達(dá)降低。TBMS1 降低了細(xì)胞對(duì) CDDP 誘導(dǎo)的細(xì)胞毒性的抵抗力。p38 抑制劑 （SB203580） 和 ERK1/2 抑制劑 （PD98059） 均有效阻斷了這種作用。
結(jié)論：
這些結(jié)果表明，TBMS1 可以通過(guò)下調(diào) ERK1/2 和上調(diào) p38 信號(hào)通路，有效地使 CDDP 耐藥人卵巢癌細(xì)胞中的 CDDP 敏感。

Tubeimoside I （TBMS1） 是從 Bolbostemma paniculatum （Maxim.） 的塊莖中分離出來(lái)的。弗蘭凱。TBMS1 顯示出強(qiáng)大的抗腫瘤活性。本研究旨在探討 TBMS1 的抗微管作用及其微管蛋白結(jié)合位點(diǎn)。
方法和結(jié)果：
TBMS1 處理后通過(guò) MTT 測(cè)量細(xì)胞生長(zhǎng)抑制。HPLC 檢測(cè)人鼻咽癌 CNE-2Z 細(xì)胞系 （CNE-2Z） 對(duì) TBMS1 的攝取動(dòng)力學(xué)。從豬腦中，在高摩爾濃度緩沖液中通過(guò)兩個(gè)聚合-解聚循環(huán)制備微管蛋白 （MTP）。通過(guò)濁度測(cè)量和沉降測(cè)定確定 TBMS1 誘導(dǎo)的 MTP 聚合的抑制作用;通過(guò)免疫熒光顯微鏡和免疫印跡研究 TBMS1 與 CNE-2Z 細(xì)胞內(nèi)微管蛋白的相互作用。通過(guò)競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合測(cè)定測(cè)試了 TBMS1 抑制已知微管蛋白配體結(jié)合的能力。 TBMS1 對(duì) CNE-2Z 細(xì)胞表現(xiàn)出生長(zhǎng)抑制活性，IC（50） 值為 16.7 μM，持續(xù) 72 小時(shí)。CNE-2Z 細(xì)胞對(duì) TBMS1 攝取的 HPLC 分析顯示，TBMS1 最初緩慢攝取，然后在 18 小時(shí)附近逐漸達(dá)到最大攝取。免疫印跡分析顯示，TBMS1 處理的細(xì)胞中胞質(zhì)微管蛋白的比例呈時(shí)間和濃度依賴性增加。TBMS1 不抑制長(zhǎng)春堿與微管蛋白的結(jié)合。在 TBMS1 存在下，秋水仙堿與微管蛋白的結(jié)合受到抑制。
結(jié)論：
TBMS1 是一種抗微管藥物，其微管蛋白的結(jié)合位點(diǎn)是微管蛋白的秋水仙堿結(jié)合位點(diǎn)。