方法和結(jié)果:Conchocarpus fontanesianus (A. St.-Hill.)Kallunki&Pirani,蕓香科,俗稱pitaguará,是巴西圣保羅州和里約熱內(nèi)盧州的本土特有樹種?;诳鼓憠A酯衍生物可以作為治療阿爾茨海默病的新原型的信息,這項工作描述了通過評估來自域塔內(nèi)西婭的乙醇莖提取物的抗膽堿酯酶活性來指導(dǎo)的分餾。結(jié)論:該程序提供了生物堿 Dictamnine (1)、γ-fagarine (2)、skimianine (3) 和 2-phenyl-1-methyl-4-quinolone (4) 以及香豆素 marmesin (5)。
據(jù)報道,Dictamnine 是一種天然植物產(chǎn)品,對細(xì)菌和真菌具有抗菌活性;然而,人們對微生物的Dictamnine反應(yīng)機制仍然知之甚少。方法和結(jié)果:我們已經(jīng)證明,Dictamnine對模式真菌釀酒酵母具有抗菌活性,最低抑制濃度(MIC)值為64 μg/ml。商業(yè)寡核苷酸微陣列用于確定由Dictamnine處理觸發(fā)的釀酒酵母的整體轉(zhuǎn)錄反應(yīng)。我們使用分層聚類工具 T-profiler 來解釋我們的微陣列數(shù)據(jù)。Dictamnine誘導(dǎo)了幾個主要的轉(zhuǎn)錄反應(yīng)。首先是誘導(dǎo)的環(huán)境脅迫響應(yīng),主要在Msn2p和Msn4p轉(zhuǎn)錄因子的控制下,以及含有PAC(RNA聚合酶A和C盒)和rRPE(核糖體RNA加工元件)基序的基因受到抑制的環(huán)境脅迫響應(yīng)。第二個是涉及脂質(zhì)生物合成的Upc2p介導(dǎo)的反應(yīng)。第三個包括涉及多藥耐藥性 (MDR) 的 PDR3 和 RPN4 介導(dǎo)的反應(yīng)。最后,用Dictamnine治療誘導(dǎo)TBP介導(dǎo)的反應(yīng)。結(jié)論:TBP是指導(dǎo)基因轉(zhuǎn)錄的重要通用轉(zhuǎn)錄因子。對選定的基因進(jìn)行定量實時RT-PCR,以驗證微陣列結(jié)果。此外,使用共聚焦激光顯微鏡檢查了 Dictamnine 暴露于釀酒酵母 L1190 (MATa/alpha) 期間的形態(tài)轉(zhuǎn)變。
白色念珠菌(C. albicans)和其他真菌是重要的人類和獸醫(yī)病原體。方法和結(jié)果:檢測Dictamnine單獨使用和聯(lián)合氟康唑(FLC)對臨床22種臨床白色念珠菌的最小抑制濃度(MIC),采用棋盤法分析Dictamnine和FLC聯(lián)合使用的作用抑制濃度指數(shù)(FICI)。結(jié)論:結(jié)果表明,Dictamnine單獨使用和與FLC聯(lián)合使用對白色念珠菌均具有良好的抗真菌活性。
檢測從 Dictamni Cortex 中提取和分離的乙醇提取物和 Dictamnine 的抗炎作用。方法和結(jié)果:采用高效離心分配色譜法分離必需的 Dictamnine,通過二甲苯誘導(dǎo)的小鼠 aruical 腫脹和小鼠腹部毛細(xì)血管通透性,研究乙醇提取物和 Dictamnine 的抗炎作用。采用己烷乙酸乙酯-乙醇-水(1∶1∶1∶1)組成的兩相溶劑體系進(jìn)行分離。用高效液相色譜儀測定得到的Dictamnine的純度為98%。結(jié)果表明,與對照組相比,各添加量乙醇提取物均能顯著抑制二甲苯腫脹引起的小鼠耳廓(P0.05),分別為44.26%、52.46%、44.26%。中等劑量組Dictamnine能明顯抑制小鼠耳廓(P0.01),但與對照組相比,劑量在小鼠腹部毛細(xì)血管通透性上未顯著增加。結(jié)論:HPCPC是一種推薦的制備和純化方法,具有良好的分離效果,方法簡單、準(zhǔn)確且易于操作。結(jié)果表明,乙醇提取物和Dictamnine在多種動物模型的抗炎效果中均表現(xiàn)出不同的抗炎作用。
研究Dictamnine在體外誘導(dǎo)的肝毒性,并探討其機制。方法與結(jié)果:HepG2細(xì)胞暴露于Dictamnine 2.5-800 μmol·L-1 24 h,MTT法檢測細(xì)胞活力。通過檢測乳酸脫氫酶(LDH)的釋放率檢測細(xì)胞膜損傷,并在造影顯微鏡下觀察細(xì)胞膜損傷的形態(tài)變化。采用酶標(biāo)記儀分別測定HepG2細(xì)胞培養(yǎng)物中丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、天冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶(AST)、谷胱甘肽S-轉(zhuǎn)移酶(GST)和谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶(GGT)活性。通過激光掃描共聚焦熒光顯微鏡測量線粒體膜電位。結(jié)果 25-800 μmol· Dictamnine暴露后HepG2細(xì)胞活力顯著降低L-1為24 h,呈濃度依賴性(r=0.965,P0.05),IC50值為(283±27)μmol·L-1.12.5-50 μmol· 暴露于Dictamnine后,HepG2細(xì)胞的LDH釋放速率顯著增加。L-1為24 h(P0.01)。HepG2細(xì)胞暴露于Dictamnine 100和200 μmol·L-1發(fā)生了很大的變化。細(xì)胞起皺又掉落。與對照組相比,Dictamnine 100和200 μmol后HepG2細(xì)胞培養(yǎng)物ALT和AST活性呈濃度依賴性顯著升高(P0.05)(r=0.995,P0.05和r=0.996,P0.05)L-1 24 h,線粒體膜電位明顯下降(r=0.978,P0.05)。暴露于Dictamnine 100和200 μmol·L-1 4 h,HepG2細(xì)胞培養(yǎng)物中GST活性顯著升高(P0.05);24 h時,Dictamnine中的GST活性為50,100和200 μmol·L-1組的升高也呈濃度依賴性(r=0.987,P0.05)。暴露于Dictamnine 200 μmol·L-1 48 h,HepG2細(xì)胞培養(yǎng)物中GGT活性升高(P0.05)。結(jié)論:較高濃度(≥100 μmol·L-1)具有潛在的肝毒性。細(xì)胞膜損傷和線粒體膜損傷可能與Dictamnine誘導(dǎo)的肝氧性機制有關(guān)。
Dictamni Radicis Cortex 的甲醇提取物對鼠傷寒沙門氏菌 TA100 和 TA98 具有致突變作用。方法和結(jié)果:采用 Sephadex LH 20 色譜柱和硅膠柱層析法,采用制備型 TLC 分離 Dictamni Radicis Cortex 中的兩種致突變化合物。這些通過UV、EI-Mass、1H-NMR鑒定為Dictamnine和γ-fagarine。Dictamnine 和 γ-fagarine 在菌株 TA100 和 TA98 中具有致突變性,其中 S9 混合物。劑量反應(yīng)曲線在10-40μg范圍內(nèi)呈線性。結(jié)論:Dictamnine和γ-fagarine在TA100菌株中具有約50-70個可逆轉(zhuǎn)菌落的特異性活性(His+/μg),而TA98菌株中約有30-50個可逆轉(zhuǎn)菌落。
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王玲