中文名：Cell Tracker CM-DiI（細(xì)胞膜橙紅色熒光探針）

英文名：Cell tracker cm DiI (cell membrane orange red fluorescent probe)

貨號(hào)：C598347

包裝：20μg

Cas號(hào)：180854-97-1

存儲(chǔ)溫度：避光,-20°C儲(chǔ)存

產(chǎn)品介紹：

?Cell Tracker CM-DiI是DiI的衍生物，在水中的溶解性比DiI好。它可以自由穿過細(xì)胞膜進(jìn)入細(xì)胞，轉(zhuǎn)化為細(xì)胞膜不可滲透的反應(yīng)產(chǎn)物。Cell Tracker CM-DiI染料通過幾代培養(yǎng)保留在活細(xì)胞中。Cell Tracker CM-DiI染料至少能穩(wěn)定發(fā)出72 h的熒光，具有理想的跟蹤性能，且擁有性質(zhì)穩(wěn)定，工作濃度無毒性，良好的細(xì)胞保留性等優(yōu)點(diǎn)，在生理pH條件下可具有明亮的熒光。此外，Cell Tracker CM-DiI 染料的激發(fā)和發(fā)射光譜與GFP（綠色熒光蛋白）光譜充分分離，可以多種顏色復(fù)用。 Cell Tracker CM-DiI包含一個(gè)溫和的巰基反應(yīng)氯甲基取代基，該取代基通過與含巰基的肽和蛋白質(zhì)共價(jià)結(jié)合，從而可以與含醛基的固定劑交聯(lián)，固定后染色信號(hào)不會(huì)丟失。相比于DiI等非共價(jià)結(jié)合的染料，更適合于固定細(xì)胞的染色。 以每次使用100 μL染色工作液，染色工作液濃度5 μM計(jì)算，20 μg配置為工作液大概可以用38次，1 mg配置為工作液大概可以用1900次。

注意事項(xiàng)：

1. 使用前請(qǐng)將產(chǎn)品瞬時(shí)離心至管底，再進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)。 2. 熒光染料均存在淬滅問題，請(qǐng)盡量注意避光，以減緩熒光淬滅。 3. 為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

產(chǎn)品參數(shù)：

Ex/Em ：553/570 nm

應(yīng)用范圍：

細(xì)胞膜熒光染料、細(xì)胞追蹤與長期示蹤

使用方法：
1. 染色液制備
（1） 配置 DMSO 或 DMF 儲(chǔ)存液：儲(chǔ)存液用 DMSO 或 DMF 配置成濃度 1 mM 的儲(chǔ)液。
注：未使用的儲(chǔ)存液分裝儲(chǔ)存在-20℃，避免反復(fù)凍融。
（2）工作液制備：用合適的緩沖液（如：無血清培養(yǎng)基，HBSS 或 PBS）稀釋儲(chǔ)存液，配制濃度為 1~5 μM 的工作液。
注：工作液最終濃度建議根據(jù)不同細(xì)胞系和實(shí)驗(yàn)體系來優(yōu)化。建議從推薦濃度的 10 倍范圍內(nèi)開始最優(yōu)濃度的摸索。
2. 細(xì)胞染色
將細(xì)胞用工作液在 37℃下孵育 60 min，標(biāo)記完成后，用 PBS 清洗細(xì)胞，并在新鮮培養(yǎng)基中重懸。對(duì)于貼壁細(xì)胞，貼壁培養(yǎng)時(shí)進(jìn)行標(biāo)記比消化成懸液后標(biāo)記，細(xì)胞生存力更高。
以下為可選步驟：
Cell Tracker CM-DiI 染色兼容后續(xù)的固定和透化。
（1）固定。用 3.7%多聚甲醛（溶于 PBS），室溫固定 10 min。室溫條件 PBS 清洗 2 次，每次 5 min。
（2）透化。用丙酮在-20℃下透化 10 min。室溫條件 PBS 清洗 2 次， 每次5 min。

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