名稱：RIPA裂解液(強)
規(guī)格：100ml
存儲：冰袋運輸，-20℃保存，一年有效。盡量避免反復凍融，建議分裝后使用。
注意：如發(fā)現RIPA有沉淀，請放室溫半小時或者常溫水浴使沉淀溶解。
根據使用量，取每1ml RIPA 加入10ul PMSF，使PMSF的最終濃度為1mM，混勻備用 （PMSF現用現加）。
產品描述
RIPA裂解液(RIPA Lysis Buffer)是一種傳統(tǒng)的細胞組織快速裂解液。RIPA裂解液裂解得到的蛋白樣品可以用于常規(guī)的Western、IP和ELISA等。
RIPA的本意是Radio Immunoprecipitation Assay。RIPA裂解液的配方有很多種，根據其裂解液的強度大致可以分為強、中、弱三類。
RIPA裂解液(強)的主要成分為50mM Tris(pH 7.4)，150mM NaCl，1% Triton X-100，1% sodium deoxycholate，0.1% SDS，以及sodium orthovanadate，sodium fluoride，EDTA等多種抑制劑?？梢杂行б种频鞍捉到?。
用RIPA裂解液裂解得到的蛋白樣品，可以用PHYGENE的BCA蛋白濃度測定試劑盒(PH0326)測定蛋白濃度。由于含有較高濃度的去垢劑，不能用Bradford法測定由本裂解液裂解得到樣品的蛋白濃度。
使用說明
(一) 貼壁培養(yǎng)細胞：
1、 取 Enhanced RIPA Lysis Buffer 室溫溶解混勻， 加入 PMSF，使 PMSF 終濃度為 1mM。
2、 去除貼壁細胞的培養(yǎng)液，用 PBS、 NS 或無血清培養(yǎng)液清洗 1 次，低速離心，棄上清，留取沉淀。
3、 按照6孔板每孔加入150～250μl含有PMSF的裂解液的比例， 加入RIPA Lysis Buffer 。移液器輕輕吹打，使裂解液和細胞充分接觸。置于冰上或 4℃裂解 15～30min，通常裂解液作用于細胞 1～3 秒內，細胞就會被裂解。通常 6 孔板每孔細胞加入 150μl 裂解液已經足夠，但如果細胞密度非常高可以適當加大裂解液的用量到 200～250μl。
4、 充分裂解后，10000～12000g，4℃離心 5～10min(如無低溫離心機，室溫下離心亦可)，取上清，即可進行后續(xù)的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。
5、 進行后續(xù)的 SDS-PAGE、 Western、免疫沉淀和免疫共沉淀等操作。
關鍵字： RIPA裂解液;RIPA;
武漢卡諾斯科技有限公司成立于2016年，坐落于高速發(fā)展的華中大武漢，是一家集科研、生產、銷售和服務為一體的化工企業(yè)，產品涉及新材料、橡膠樹脂、選礦藥劑、香精香料、原藥中間體、表面活性劑和催化劑助劑等諸多領域，為國內實驗室、科研院校、化工廠提供優(yōu)質的產品和服務，已與國內外眾多客戶建立了長期穩(wěn)定的合作關系！
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