DT40(雞淋巴瘤細(xì)胞)
1.細(xì)胞起源:
細(xì)胞簡稱 DT40
細(xì)胞別稱 DT-40; DT 40; DT40B; LSCC-DT40
細(xì)胞背景描述 DT40細(xì)胞是Hyline SC雞法氏囊淋巴細(xì)胞株經(jīng)鳥類白血病病毒誘導(dǎo) 建株的細(xì)胞系。原始淋巴瘤用羅氏相關(guān)病毒1(RAV-1)感染出生1天的 小雞得到,法氏囊中生成的腫瘤制成細(xì)胞懸液后通過靜脈注射輸入 同基因型的受體小雞。經(jīng)過一次體內(nèi)移植后,建立了DT40細(xì)胞。DT 40細(xì)胞包含的前病毒基因整合在c-myc原癌基因的上游,表達(dá)的c-my c RNA水平較高。DT40細(xì)胞缺少一個正常c-myc基因,但含有兩個 拷貝ALV去調(diào)控的myc基因。DT40細(xì)胞保留了重排免疫球蛋白輕鏈 基因(IgL)的能力。在IgL位點,DT40包含一個重排和一個胚系同源基 因。c-rel基因和v-rel癌基因在DT40細(xì)胞中都能誘導(dǎo)組織相容性(MHC )Ⅱ類抗原表達(dá)。v-rel誘導(dǎo)的MHCⅡ表達(dá)比c-rel誘導(dǎo)快,且其有效性 在數(shù)周后達(dá)到c-rel的50倍。DT40細(xì)胞呈淋巴母細(xì)胞表型;傳染性檢 測表明,DT40細(xì)胞釋放低水平的傳染性RAV-1,DT40細(xì)胞株可以用 于穩(wěn)轉(zhuǎn)研究。
供體年齡 1日齡
組織來源 法氏囊,淋巴瘤
細(xì)胞形態(tài) 淋巴母細(xì)胞樣
細(xì)胞類型 腫瘤細(xì)胞
腫瘤類型 淋巴瘤細(xì)胞
生長特性 懸浮細(xì)胞
生物安全等級 1
2.培養(yǎng)及保藏:
完全培養(yǎng)基 DMEM(PM150210)+0.05mM β-mercaptoethanol(PB180633)+10% Tryptose Phosphate Broth+5% Chicken Serum+10% FBS(164210-50)+1% P/S(PB180120)
培養(yǎng)環(huán)境 空氣,95%;CO 2,5%
37℃
凍存條件 55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO
液氮
3.傳代方法:
傳代步驟
可通過補充新鮮培養(yǎng)基或者離心換液兩種方式維持培養(yǎng),離心轉(zhuǎn)速參考1200 rpm(250g左右),離心3分鐘
傳代比例(密度) 1:3-1:4
換液頻次 2~3次/周
倍增時間 ~48 hours
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