1.細胞起源:
細胞簡稱 OP9
細胞別稱 OP-9
細胞背景描述 OP9細胞源自新生的op/op小鼠顱蓋。因編碼M-CSF的基因中的一個突變,OP9細胞不能生成有功能的巨噬細胞克隆刺激因子(M-CSF)。M-CSF的存在對胚胎干細胞(ES)分化成血細胞而不是其他巨噬細胞有抑制功能。OP9細胞可以用于與小鼠胚胎干細胞共培養(yǎng)以誘導(dǎo)胚胎干細胞分化成成紅血球來源的、骨髓來源的和B細胞譜系的血細胞。與OP9細胞共培養(yǎng)不需要外源的生長因子或復(fù)雜的胚胎結(jié)構(gòu),這個系統(tǒng)對研究造血細胞的發(fā)育和分化的分子機理有用。
供體年齡 胚胎
組織來源 骨髓,基質(zhì)
細胞形態(tài) 成纖維細胞樣
細胞類型 基質(zhì)細胞系
生長特性 貼壁細胞
生物安全等級 1
2.培養(yǎng)及保藏:
完全培養(yǎng)基 MEMα(PM150421)+20% FBS(164210-50)+1% P/S(PB180120)
培養(yǎng)環(huán)境 空氣,95%;CO 2,5%
37℃
凍存條件 55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO
液氮
3.傳代方法:
傳代步驟
1、吸出原培養(yǎng)液;
2、加入2ml左右PBS,輕輕晃動培養(yǎng)瓶潤洗細胞,吸出PBS丟棄;
3、加入1ml左右0.25%胰蛋白酶溶液(含EDTA),輕輕晃動培養(yǎng)瓶使之浸潤所有細胞;
4、放入培養(yǎng)箱消化,顯微鏡下看到細胞塊中間的細胞明顯變圓有間隙時可終止,全程不要拍打培養(yǎng)瓶;
5、加入3ml含血清的培養(yǎng)基終止消化,吹打細胞使之脫壁并在液體里反復(fù)吹打使細胞盡量呈單顆細胞的懸浮液;
6、收集細胞懸液離心,1200rpm/min 3分鐘,離心完吸出上清丟棄;
7、加入新鮮培養(yǎng)基,吹打幾下混勻細胞即可,按比例接種到新培養(yǎng)瓶,補足培養(yǎng)基,擰松瓶蓋或使用透氣瓶蓋進行培養(yǎng)。
消化時間 1~2分鐘
傳代比例(密度) 1:3-1:4
換液頻次 2~3次/周
倍增時間 ~26小時
本產(chǎn)品僅供科研使用。不能用于人和動物治療等其它臨床診斷使用!以實際收貨產(chǎn)品說明書為準(zhǔn),網(wǎng)站說明書僅供參考。