1.細胞起源:
細胞簡稱 NCTC clone 929 [L cell, L-929]
細胞別稱 NCTC 929; NCTC-929; L cell; L cells; L-cell; L-cells; L cell line; L; 種屬ain L-929; L-929; L 929; L929; L929(NCTC); Clone 929; Earles's cells; Earle's L cells
細胞背景描述 NCTC clone 929 [L cell, L-929, derivative of 種屬ain L]細胞是1948年3月建立的細胞系L的克隆株;細胞系L是最早建立的連續(xù)培養(yǎng)細胞系之一,而NCTC clone 929 [L cell, L-929, derivative of 種屬ain L]是最早的克隆株。從一只100日齡的雄性C3H/An小鼠的皮下疏松結(jié)締組織入脂肪組織中建立了親本細胞系L,第95
代的細胞系L使用毛細管法分離單細胞建立了NCTC clone 929 [L cell, L-929, derivative of 種屬ain L]。
供體年齡 雄性,100日齡
組織來源 未知
細胞形態(tài) 成纖維細胞樣
細胞類型 自發(fā)永生化細胞
生長特性 貼壁細胞
生物安全等級 1
2.培養(yǎng)及保藏:
完全培養(yǎng)基 MEM(含NEAA)(PM150410)+10% FBS(164210-50)+1%
P/S(PB180120)
培養(yǎng)環(huán)境 空氣,95%;CO 2,5%
37℃
凍存條件 55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO
液氮
3.傳代方法:
傳代步驟
1、吸出原培養(yǎng)液;
2、加入2ml左右PBS,輕輕晃動培養(yǎng)瓶潤洗細胞,吸出PBS丟棄;
3、加入1ml左右0.25%胰蛋白酶溶液(含EDTA),輕輕晃動培養(yǎng)瓶使之浸潤所有細胞;
4、放入培養(yǎng)箱消化,顯微鏡下看到細胞塊中間的細胞明顯變圓有間隙時可終止,全程不要拍打培養(yǎng)瓶;
5、加入3ml含血清的培養(yǎng)基終止消化,吹打細胞使之脫壁并在液體里反復(fù)吹打使細胞盡量呈單顆細胞的懸浮液;
6、收集細胞懸液離心,1200rpm/min 3分鐘,離心完吸出上清丟棄;
7、加入新鮮培養(yǎng)基,吹打幾下混勻細胞即可,按比例接種到新培養(yǎng)瓶,補足培養(yǎng)基,擰松瓶蓋或使用透氣瓶蓋進行培養(yǎng)。
消化時間 1~2分鐘
傳代比例(密度) 1:3-1:4
換液頻次 2~3次/周
倍增時間 ~28-36小時
本產(chǎn)品僅供科研使用。不能用于人和動物治療等其它臨床診斷使用!以實際收貨產(chǎn)品說明書為準,網(wǎng)站說明書僅供參考。