產(chǎn)品描述
本產(chǎn)品中包含反應(yīng)緩沖液、BstLDNA聚合酶和耐熱型反轉(zhuǎn)錄酶的RT-EnzymesMix、凍干保護(hù)劑和熒光染料組分。其中反應(yīng)緩沖液中含Mg2+,dNTP等擴(kuò)增必須組分,使用時(shí)只需要將Buffer、反應(yīng)酶、熒光染料、引物混合并加入模板即可;若添加凍干保護(hù)劑可進(jìn)一步配置可凍干體系。
應(yīng)用
適用于DNA、RNA等溫?cái)U(kuò)增。
運(yùn)輸與保存方法
干冰運(yùn)輸,-25~-15℃保存。
避免反復(fù)凍融,產(chǎn)品有效期12月。
實(shí)驗(yàn)流程
1)將Buffer取出解凍,使用前充分渦旋混勻,并短暫離心收集液體至管底。
2)反應(yīng)體系按下表配制
備注:10×PrimerMix濃度:16μMFIP/BIP,2μMF3/B3,4μMLoopF/B。核酸模板建議使用DEPC水溶解。
3)擴(kuò)增反應(yīng)
在熒光PCR儀(如ABI7500等)上設(shè)置如下程序。
注意事項(xiàng)
1)Buffer融化后可能會(huì)有白色沉淀,在室溫下充分混勻即可澄清。
2)反應(yīng)溫度可根據(jù)引物情況在62℃-68℃間進(jìn)行優(yōu)化。
3)實(shí)驗(yàn)應(yīng)規(guī)范操作,包括反應(yīng)體系的配制、樣本處理及加樣等過(guò)程。為避免污染,建議在超凈臺(tái)中配制反應(yīng)體系,在其他房間的通風(fēng)櫥中加入模板以免產(chǎn)生假陽(yáng)性干擾。
關(guān)鍵字: RT-LAMP 核酸擴(kuò)增試劑;RT-LAMP;RT-LAMP 核酸擴(kuò)增試劑(熒光染料法;
瀚海新酶生物科技有限公司成立于2015年,是一家專業(yè)從事生物醫(yī)藥、體外診斷核心原料研發(fā)、生產(chǎn)、應(yīng)用和技術(shù)服務(wù)的高新技術(shù)企業(yè),在上海、武漢、蘇州、青島、宜昌等五地分別設(shè)立研發(fā)生產(chǎn)中心。