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檸檬酸(citric acid, CA)含量測定試劑盒,citric acid
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檸檬酸(citric acid, CA)含量測定試劑盒

價格 1500
包裝 1盒
最小起訂量 1盒
發(fā)貨地 上海
更新日期 2025-01-17
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產(chǎn)品詳情

中文名稱:檸檬酸(citric acid, CA)含量測定試劑盒英文名稱:citric acid
CAS:保存條件: 2-8℃
產(chǎn)品類別: 試劑盒 生化試劑盒
2025-01-17 檸檬酸(citric acid, CA)含量測定試劑盒 citric acid 1盒/1500RMB 1500 2-8℃ 試劑盒 生化試劑盒

檸檬酸(citric acid, CA)含量測定試劑盒說明書

                                                  
                                                       分光光度法50/48

 

    意:正式測定之前選擇2-3個預期差異大的樣本做預測定。

測定意義:

CA是生物體內常見的有機酸,是重要的食品風味物質。此外,CA是三羧酸循環(huán)步反應的產(chǎn)物。


檸檬酸(citric acid, CA)含量測定試劑盒測定原理:

酸性條件下,檸檬酸還原Cr6+生成Cr3+,在545nm處有特征吸收峰;通過測定545nm吸光值的增加,即可計算出樣品中檸檬酸含量。


自備儀器和用品

可見分光光度計、低溫離心機、水浴鍋、可調式移液槍、1mL玻璃比色皿和蒸餾水。


試劑組成和配制:

試劑一:液體×1瓶,4℃保存。

試劑二:液體×1瓶,4℃保存。

試劑三:液體×1支,-20℃保存。

試劑四:粉劑×1瓶,室溫保存。臨用前配制,加入5mL試劑一,充分溶解。

試劑五:液體×1瓶,4℃避光保存。

標準品:液體×1支,250μmol/L檸檬酸標準液,4℃保存。


樣品處理

1. 液體樣品:取0.1mL液體加試劑一0.9mL,充分混勻,11000g, 4℃離心10min,取上清液待測。

2. 組織:按照組織質量(g:提取液體積(mL)15~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL試劑一)進行冰浴勻漿。11000g,4離心10min,取上清置冰上待測。

3. 線粒體:按照組織質量(g:提取液體積(mL)15~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL試劑一)進行冰浴勻漿,600g/min,4℃離心5min;取上清至另一EP管中,11000g,4℃離心10min,棄上清(此上清液可用于細胞質CA含量測定);向沉淀中加試劑二200μl,以及試劑三2μl,充分懸浮溶解,11000g,4℃離心10min,取上清液待測。

4. 細菌、真菌中:按照細胞數(shù)量(104個):試劑一體積(mL)為500~10001的比例(建議500萬細胞加入1mL試劑一),冰浴超聲波破碎細胞(功率300w,超聲3秒,間隔7秒,總時間3min);11000g,4離心10min,取上清置冰上待測。


檸檬酸(citric acid, CA)含量測定試劑盒測定操作:

1. 分光光度計預熱30 min,調節(jié)波長到545 nm,蒸餾水調零。

2. 試劑一置于30℃水浴中預熱30min。

3. 空白管:取EP管,依次加入100μL蒸餾水,700μL試劑一,100μL試劑四,100μL試劑五,混勻后室溫靜置30min,于545nm測定吸光度,記為A空白管。

 

4. 標準管:取EP管,依次加入100μL標準液,700μL試劑一,100μL試劑四,100μL試劑五,混勻后室溫靜置30min,于545nm測定吸光度,記為A標準管。

 

5. 測定管:取EP管,依次加入100μL上清液,700μL試劑一,100μL試劑四,100μL試劑五,充分混勻后室溫靜置30min,于545nm測定吸光度,記為A測定管。

注意:空白管和標準管只需測定一次。


計算公式:

1. 按液體樣品的體積計算

檸檬酸含量(nmol/L= [C標準液×(A測定管-A空白管)÷(A標準管-A空白管)]×樣品稀釋倍數(shù)×V

= 2500×(A測定管-A空白管)÷(A標準管-A空白管)

C標準液:250μmol/L=0.25 m mol/L;樣品稀釋倍數(shù):(0.1 mL樣品+0.9mL試劑一)÷ 0.1 mL樣品=10V總:1mL。

2. 按組織質量計算

檸檬酸含量(nmol/g 鮮重= [C標準液×(A測定管-A空白管)÷(A標準管-A空白管)]×V÷W

= 250×(A測定管-A空白管)÷(A標準管-A空白管) ÷W

C標準液:250 μ mol/LV總:上清液總體積,1.0 mL=0.001 L;W:樣品質量,g

3. 按蛋白含量計算

檸檬酸含量(nmol/mg prot= [C標準液×(A測定管-A空白管)÷(A標準管-A空白管)]÷Cpr

= 250×(A測定管-A空白管)÷(A標準管-A空白管) ÷Cpr

C標準液:250 μ mol/L=0.25μ mol/mL;Cpr:上清液蛋白質含量,mg/mL。

4. 按細胞數(shù)量計算

檸檬酸含量(nmol/104 cell= [C標準液×(A測定管-A空白管)÷(A標準管-A空白管)]×V÷細胞數(shù)量

= 250×(A測定管-A空白管) ÷(A標準管-A空白管) ÷細胞數(shù)量

C標準液:250 μ mol/L;V總:上清液總體積,1.0 mL=0.001 L

 

注意事項:

1. 樣品處理等過程均需要在冰上進行。

2. 試劑四需現(xiàn)配現(xiàn)用,配置好的一周內使用完

3. 試劑五為易致癌物質,實驗過程中,需佩戴手套,避免試劑五濺到皮膚上。

4. 檸檬酸提取液不能用于蛋白含量測定,如需測定蛋白含量,需另取組織,使用本公司BCA試劑盒進行測定。


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公司簡介

上海雅吉生物科技有限公司成立于2011年3月,是一家面向生命科學領域,提供科研類試劑、耗材、儀器、技術服務的生物企業(yè)。包括分子生物學、免疫學、微生物學、細胞學等 。旗下?lián)碛?“雅吉生物”、“晶風生物”、“彩佑實業(yè)”、“GTX” 品牌。通過公司各部門員工的共同努力在行業(yè)內擁有較高知名度,深得新老客戶厚愛,本著“優(yōu)質、服務、信譽”的精神,堅持以優(yōu)良的技術、優(yōu)質的產(chǎn)品、良好的信譽為國內外廣大用戶提供優(yōu)質生物產(chǎn)品和服務。 公司在重視產(chǎn)品質量的同時,也建立了一套集技術支持,物流售后服務等多部門聯(lián)動服務體系,努力把我們方便、快捷、周到的服務提供給每一個客戶,雅吉生物的試劑盒,在國內眾多重點實驗室廣泛使用,深受廣大科研人員好評,先后在權威雜志文章中被引用。 本公司鄭重承諾:質量保證、供貨及時、服務周到。
成立日期 2011-04-17 (14年) 注冊資本 50.000000萬人民幣
員工人數(shù) 50-100人 年營業(yè)額 ¥ 100萬以內
主營行業(yè) 抗體 經(jīng)營模式 試劑,定制
  • 上海雅吉生物科技有限公司
VIP 4年
  • 公司成立:14年
  • 注冊資本:50.000000萬人民幣
  • 企業(yè)類型:有限責任公司(自然人投資或控股)
  • 主營產(chǎn)品:抗體,細胞,生物試劑等
  • 公司地址:上海市閔行區(qū)元江路5500號第 1幢5658室
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以上所展示的信息由商家自行提供,內容的真實性、準確性和合法性由發(fā)布商家負責。 商家發(fā)布價格指該商品的參考價格,并非原價,該價格可能隨著市場變化,或是由于您購買數(shù)量不同或所選規(guī)格不同而發(fā)生變化。最終成交價格,請咨詢商家,以實際成交價格為準。請意識到互聯(lián)網(wǎng)交易中的風險是客觀存在的
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