中文名稱

羥甲基化DNA定量試劑盒（熒光法）（48次分析）

英文名字

MethylFlash Hydroxymethylated DNA Quantification Kit(Fluorometric)(48 assays)

供應(yīng)商

Epigentek

產(chǎn)品貨號(hào)

P-1037-48

產(chǎn)品報(bào)價(jià)

￥6464/48Assays

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產(chǎn)品新聞

背景資料

MethylFlash羥甲基化DNA定量試劑盒（熒光法）提供了化的緩沖液和試劑，運(yùn)用熒光定量的方法，通過(guò)檢測(cè)微孔板上5-hmC的水平，以定量檢測(cè)全基因組的DNA羥甲基化水平.而沒(méi)有甲基化和未甲基化胞嘧啶的結(jié)合活性.本試劑盒與MethylFlash DNA羥甲基化定量試劑盒（熒光法）能夠完美配合，用來(lái)同時(shí)定量檢測(cè)DNA的甲基化和羥甲基化水平.
關(guān)于5-hmC
5-hmC是近年來(lái)在動(dòng)物組織中發(fā)現(xiàn)的，由胞嘧啶修飾而來(lái).5-hmC在表觀遺傳學(xué)上的功能可能與5-甲基化胞嘧啶（5-mC）不同.盡管到現(xiàn)在為止還不確知其功能，有研究者猜測(cè)它在調(diào)控基因的表達(dá)與關(guān)閉過(guò)程中起著重要的作用.5-mC的發(fā)現(xiàn)讓我們不得不重新評(píng)估DNA甲基信息，也不得不監(jiān)測(cè)人類的健康組織和病理組織之間5-mC相對(duì)分布的差異.在Epigentek的MethylFlash技術(shù)之前，我們還沒(méi)有發(fā)現(xiàn)任何直接的常規(guī)方法來(lái)檢測(cè)5- hmC，以及區(qū)分5-hmC和5-mC.
5-hmC 和 5-mC的區(qū)別
時(shí)下常用的DNA甲基化分析方法包括限制內(nèi)切酶酶切和亞硫酸氫鹽或MeDIP介導(dǎo)的MS-PCR和測(cè)序，這些技術(shù)都不適合用來(lái)檢測(cè)5-hmC，因?yàn)樗c5-mC事實(shí)上很難用這類方法區(qū)分開(kāi)來(lái).為了解決這個(gè)問(wèn)題，Epigentek研制了MethylFlash羥甲基化DNA定量試劑盒（熒光法）.本試劑盒提供了一種很經(jīng)濟(jì)的方法來(lái)檢測(cè)5-羥甲基化胞嘧啶，并且區(qū)分5-hmC， 5-mC， 和 C，使得研究者能夠重新評(píng)估他們的DNA甲基化信息，也能夠在新樣品中尋找DNA羥甲基化.本試劑盒有以下優(yōu)點(diǎn)和特性：
簡(jiǎn)單易學(xué)方便快捷的熒光分析技術(shù).整個(gè)檢測(cè)過(guò)程只需要3小時(shí)20分鐘.
靈敏度高，檢測(cè)極限為10pg羥甲基化的DNA
高度的專一性，不與甲基化胞嘧啶和非甲基化的胞嘧啶結(jié)合.5-hmC被專一地堅(jiān)持.試劑盒中還提供有適用于定量所有物種羥甲基化DNA的普遍陰性對(duì)照和陽(yáng)性對(duì)照.
96孔板模式讓您可以根據(jù)自己的需要地選擇用手工或者高通量.
簡(jiǎn)單、可靠、檢測(cè)條件恒定.

產(chǎn)品描述

MethylFlash羥甲基化DNA定量試劑盒（熒光法）中含有定量檢測(cè)全基因組羥甲基化所必需的所有試劑.在檢測(cè)實(shí)驗(yàn)中，DNA被固定在一種有DNA吸附能力的孔上，羥甲基化的片段會(huì)被捕獲劑以及檢測(cè)抗體識(shí)別，用熒光分光光度計(jì)讀取在ex=530 +/-20/em=580 +/-20 nm處的熒光強(qiáng)度來(lái)定量.羥甲基化的DNA的量與熒光強(qiáng)度值成線性關(guān)系，可以通過(guò)本試劑盒提供的方程來(lái)計(jì)算兩種不同的羥甲基化DNA樣品的相對(duì)羥甲基化狀態(tài)或者通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線完全定量5-mc.基于其工作原理和微孔板模式，本試劑盒可以用于各種物種來(lái)源的多種樣品形式，包括培養(yǎng)的細(xì)胞、新鮮和冷凍的組織、石蠟包埋組織、血漿/血清樣品以及體液樣品.本試劑盒曾經(jīng)對(duì)來(lái)自小鼠大腦和海拉細(xì)胞系的樣品成功地進(jìn)行了5-hmC的定量，所得到的結(jié)果與用HPLC和LC-MS的方法相當(dāng).通過(guò)使用本試劑盒，研究者們首次在正常人類腦部組織和結(jié)腸組織中發(fā)現(xiàn)了高豐度的5-hmC.同時(shí)，研究結(jié)果還顯示，正常人類腦部組織和結(jié)腸組織中5-hmC分別占總甲基化胞嘧啶（5-mC和5-hmC的總和）的32%和16%.相反，在結(jié)腸癌細(xì)胞系（HCT116）和宮頸癌細(xì)胞系（HeLa）中，5-hmC的比率很低，幾乎沒(méi)有. 該羥甲基化DNA定量試劑盒（熒光法）內(nèi)主要產(chǎn)品組份包括：HF1 （10X Wash Buffer） HF2 （Binding Solution） HF3 （Negative Control I， 20 ug/ml） HF4 （Negative Control II， 20 ug/ml） HF5 （Positive Control， 20 ug/ml） HF6 （Capture Antibody， 1000 ug/ml HF7 （Detection Antibody， 400 ug/ml） HF8 （Enhancer Solution） HF9 （Fluoro Developer） HF10 （Fluoro Enhancer） HF11 （Fluoro Dilutor） 8-Well Assay Strips （With Frame） 用戶指南手冊(cè)

產(chǎn)品特點(diǎn)

1、整個(gè)比色法檢測(cè)實(shí)驗(yàn)的操作簡(jiǎn)單易學(xué)，方便快捷，只需要3小時(shí)45分鐘就能完成實(shí)驗(yàn).96孔板模式讓您可以根據(jù)自己的需要地選擇用手工或者高通量；2、試劑盒中提供通用陽(yáng)性和陰性對(duì)照，能用于定量檢測(cè)各種來(lái)源的DNA樣品中的羥甲基化狀態(tài)，包括哺乳動(dòng)物、植物、真菌、細(xì)菌以及病毒；3、試劑盒中含有定量檢測(cè)全基因組DNA羥甲基化實(shí)驗(yàn)所有用到的試劑，包括陽(yáng)性和陰性對(duì)照.直接測(cè)定熒光強(qiáng)度的方法來(lái)進(jìn)行定量檢測(cè)取代了已過(guò)時(shí)的和劣質(zhì)的方法，無(wú)須DNA消化/變性、提取，不用使用套色版，不接觸放射性材料；4、試劑盒用到的新方法和專利試劑使得羥甲基化DNA定量實(shí)驗(yàn)結(jié)果精確、高度靈敏特異，檢測(cè)極限為40 pg的羥甲基化DNA，檢測(cè)范圍寬至40 pg 到 20 ng，檢測(cè)靈敏度是HPLC的十倍（0、008% vs 0、08%），不與DNA上甲基化或者未甲基化胞嘧啶反應(yīng)，特異檢測(cè)5-hmC.

保存建議

請(qǐng)?jiān)谀盏紼pigentek的羥甲基化DNA定量試劑盒（熒光法）（48次分析）產(chǎn)品后，參考說(shuō)明書(shū)建議，使用不同的保存條件或溫度來(lái)保存試劑盒內(nèi)組分.

其他

Epigentek 公司是全球領(lǐng)先的表觀遺傳學(xué)相關(guān)研究的技術(shù)創(chuàng)新者和產(chǎn)品開(kāi)發(fā)供應(yīng)商。開(kāi)發(fā)了超過(guò)700多個(gè)專利產(chǎn)品，為表觀遺傳學(xué)方面的研究和新藥研發(fā)提供全面系統(tǒng)的解決方案，涵蓋樣品制備、DNA/RNA甲基化（5-mc, 5-hmc, 5-fc, m6A）/DNMT分析、ChIP、組蛋白甲基化/乙酰化/去乙?；?磷酸化/SUMO-等領(lǐng)域，提供小分子抑制劑、蛋白質(zhì)、抗體、以及分析試劑盒產(chǎn)品。